时间：2023-08-03 09:20:06
绪论：在寻找写作灵感吗？爱发表网为您精选了8篇细胞化学元素，愿这些内容能够启迪您的思维，激发您的创作热情，欢迎您的阅读与分享！
[关键词] 贝母素甲；K562细胞；氧化-还原；细胞增殖
[中图分类号] R733.7；R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2017）06（c）-0016-04
[Abstract] Objective To investigate the effect of peimine on cell proliferation of human leukemia K562 cells and the function of redox imbalance in this progress. Methods The human leukemia K562 cells were cultured in vitro. After K562 cells were treated with peimine at concentrations of 50， 100， 200， 400 and 800 μmol/L for 24 h， the cell proliferation was measured by thiazolyl blue tetrazolium bromide （MTT） assay. And the half maximal inhibitory concentration （IC50） of peimine was calculated using the Bliss method. The changes of intracellular reactive oxygen species （ROS） and glutathione （GSH） concentration were detected using spectrophotometry. Results Peimine inhibited the proliferation of K562 cells in a dose-dependent manner. And the IC50 of peimine was 238 μmol/L. Furthermore， peimine could promote the ROS production and glutathione （GSH） depletion. The balance of oxidation-antioxidation function destroyed. Pre-incubation with antioxidants GSH or N acetyl cysteine （NAC） almost abolished the effects of peimine. Conclusion The present study therefore shows that peimine inhibits the proliferation activity in K562 cells. The redox imbalance may play a key role in this process.
[Key words] Peimine； K562 cells； Redox； Cell proliferation
浙母为临床常用止咳化痰中药，始载于《本草正》，为贝母属植物浙贝母（Fritillatia thunbergii Miq.）的干燥鳞茎[1]。贝母素甲（Peimine）是浙贝母的主要药效成分之一[2]，对多种肿瘤细胞的生长有抑制作用，能逆转肿瘤细胞的多耐药现象[2-7]。以浙贝母为君药的复方淅贝母颗粒能提高难治性急性白血病围化疗期临床缓解率[8]。尽管这些研究提示贝母素甲具有抗肿瘤活性，但其对慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leu？鄄kemia，CML）细胞增殖影响的研究依然甚少，诸多相关问题有待厘清。
细胞在生命活动过程中会产生活性氧（reactive oxygen species，ROS）。同时，细胞中还存在谷胱甘肽（glutathione，GSH）、过氧化氢酶（catalase，GAT）等构成的抗氧化系统，可清除过多的ROS，避免细胞受到过度的氧化损伤[9]。ROS的生成与清除之间的动态平衡使细胞处于一个正常的氧化-还原状态，维持细胞生长、增殖等正常生命过程[10-12]。此状态的失衡会导致细胞活力下降，甚至死亡。Bcr-Abl突变的CML细胞ROS水平比正常细胞高，对氧化-还原状态的改变更为敏感[13]。一些药物可通过诱导肿瘤细胞ROS爆发、GSH含量下调，抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡，从而起到抗肿瘤的效果[14-16]。
对此，本项研究采用人白血病细胞株K562为体外研究模型，试图从细胞氧化-还原状态变化的角度分析贝母素甲对人白血病细胞体外增殖的影响机制，为贝母素甲用于人白血病治疗提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
人慢性粒细胞白血病细胞株K562由福建中医药大学中西医结合基础实验室保存。
1.2 实验药物
贝母素甲（Peimine，纯度> 98%）产自美国阿拉丁工业公司。称取21.6 mg贝母素甲，采用0.2 mL无水乙醇助溶，再加19.8 mL RPMI 1640 培养基，配制成50 mmol/L工作液，过滤除菌，保存于-20℃备用。
1.3 主要试剂及设备
培养基RPMI 1640与胎牛血清（fetal calf serum，FBS）为Gibco公司生产；MTT[3-（4，5-Dimethylthiazol-2-yl）-2，5-diphenyltetrazolium bromide]和二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）产自Amresco公司；还原型谷胱苷肽（glutathione，GSH）、N-乙酰-L-半胱氨酸（N-acetyl-L-cystein，NAC）、GSH检测试剂盒（S0053）和活性氧检测试剂盒（S0033）购自碧云天生物技术研究所。CO2培养箱为德国Heraeus公司产品，超净工作台产于苏州净化设备有限公司，倒置相差显微镜购自日本Olympus公司，ELX800全自动酶标仪产自BioTek公司，Infinite 200 PRO全波长多功能微孔板检测仪产自瑞士TECAN公司。
1.4 实验方法
1.4.1 细胞培养 K562细胞培养于RPMI 1640培养基（含10%FBS），培养环境为37℃、饱和湿度、5%CO2，3d传代1次，收取对数生长期细胞用于实验。
1.4.2 细胞增殖的检测 将对数生长期的K562细胞（4×104个/mL）同步化后接种于96孔板内，每孔加细胞悬液100 μL。各药物组加入贝母素甲至终浓度分别为50、100、200、400、800 μmol/L，空白对照组加等体积的药物溶解介质。清除剂实验中，用GSH（5 mmol/L）或NAC（5 mmol/L）分别预处理K562细胞1 h，然后进行相应的药物处理。加药处理24 h后，每孔加MTT至0.5 mg/mL，常规培养3 h，离心弃上清，加100 μL DMSO溶解沉淀。采用570 nm为主波长，630 nm为参比波长，测定各孔光吸收值（A值）。细胞增殖抑制率=（1-实验组A值/对照组A值）×100%，药物对细胞的半数抑制浓度（IC50）采用Bliss法。实验重复3次。
1.4.3 细胞ROS含量的检测 参照文献[17]所述方法进行测量。大致如下：同步化适量的K562细胞并随机分组。以不同终浓度贝母素甲处理的为药物组，以加等体积药物溶解介质处理的为空白对照组。抑制剂实验中，采用ROS清除剂NAC预处理细胞1 h，然后进行相应的药物处理。常规培养细胞9 h后，各组细胞加ROS特异性荧光探针DCFH2-CA至10 μmol/L，37℃避光培养30 min，收集并用无血清细胞培养液洗涤细胞。采用激发波长488 nm，发射波长525 nm，于全波长多功能微孔板检测仪检测。以相对于空白对照组的倍数表示各组的ROS含量。实验重复3次。
1.4.4 细胞GSH含量的检测 按“1.4.3”所述方法分组并处理细胞，常规培养24 h后收集细胞，PBS洗涤1次，加入适量蛋白去除试剂溶液，振荡混匀，反复冻融破碎细胞，离心取上清液进行测定。具体方法参照试剂盒说明书进行，405 nm处检测光吸收值，计算GSH含量。
1.5 统计学方法
采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 贝母素甲对K562细胞增殖的抑制
利用MTT法检测细胞活力是分析细胞增殖的一种快捷、常用的方法。本研究结果表明，各药物组与空白对照组相比，100、200、400、800 μmol/L浓度组的吸光值显著下降，差异有统计学意义（P < 0.05），抑制率随药物浓度增大而升高。贝母素甲对K562的IC50为238 μmol/L。上述结果提示贝母素甲对K562细胞增殖存在抑制作用。见表1。
2.2 贝母素甲对K562细胞ROS生成的诱导
应用DCFH2-DA荧光探针检测贝母素甲对K562细胞ROS含量的影响。实验结果显示，贝母素甲100、200、400 μmol/L处理组的ROS含量分别为空白对照组的（1.41±0.17）倍、（1.81±0.18）倍和（2.19±0.18）倍。统计学分析表明，贝母素甲可诱导细胞ROS含量上升，差异有统计学意义（P < 0.05），呈现出剂量依赖性。采用ROS清除剂NAC预处理细胞1 h，然后再添加贝母素甲（400 μmol/L）处理，K562细胞ROS含量与对照组相比，差异无统计学意义（P > 0.05），而与贝母素甲（400 μmol/L）处理组明显降低，差异有统计学意义（P < 0.05），提示贝母素甲诱导细胞ROS的增加受到NAC抑制。提示贝母素甲可以诱导K562细胞ROS的生成。见图1。
2.3 贝母素甲可引起K562细胞GSH含量的下降
研究结果表明，贝母素甲可以引起K562细胞内GSH含量的显著下降，差异有统计学意义（P < 0.05）。100、200、400 μmol/L贝母素甲处理可分别使GSH含量下降至空白对照组GSH含量的（72.01±9.15）%、（64.60±5.29）%和（50.89±3.34）%，具有量效P系。这提示贝母素甲可能抑制K562细胞内GSH生成或促进其消耗，下调细胞内GSH含量。见图2。
2.4 氧化-还原状态的失衡参与贝母素甲对K562细胞增殖的抑制
结果显示，NAC或GSH能有效逆转贝母素甲对K562细胞增殖的抑制。利用NAC清除过多的ROS或是直接补充GSH，可避免细胞内氧化-还原状态的失衡。这提示氧化-还原状态的失衡在贝母素甲对K562细胞增殖的抑制过程中起重要作用。见表2。
3 讨论
浙贝母是临床上常用的化痰药物，具有清热化痰，开郁散结之功效。其中主要活性成分之一贝母素甲的抗肿瘤作用颇受关注[18]。胡凯文等[7]率先报道贝母素甲对人白血病细胞K562具有体外抑制细胞增殖的作用。本研究亦证实贝母素甲可抑制K562细胞增殖与上述文献报道相符。
细胞内正常的氧化-还原状态是其生命活动所必需的。细胞内ROS大量产生或抗氧化防护系统（如GSH）功能的下降，可导致氧化-还原状态的失常，造成细胞氧化损伤乃至死亡。一些抗肿瘤药物通过诱导K562细胞大量产生ROS，下调GSH含量，改变细胞的氧化-还原状态，从而抑制K562细胞增殖，杀伤细胞[10，14，19]。GSH是细胞内的一种重要抗氧化肽。有证据表明，细胞内GSH含量变化与某些药物对肿瘤细胞增殖的抑制作用相关。郑智等[20]报道复方浙贝母颗粒协同阿霉素可降低人白血病细胞移植瘤组织细胞中GSH含量，抑制抗氧化酶的表达，提高难治耐药性白血病临床缓解率。本研究结果表明，贝母素甲处理可改变K562细胞的氧化-还原状态，具体表现为贝母素甲处理引起K562细胞ROS水平上调，细胞内GSH含量下降。这导致细胞内氧化-还原状态的失衡。在上述工作基础上，本研究进一步采用ROS清除剂NAC（5 mmol/L）或GHS（5 mmol/L）预处理K562细胞1 h，再给予贝母素甲（400 μmol/L）干预24 h，随后进行MTT检测，分析氧化-还原状态失衡与贝母素甲对K562细胞增殖抑制的相关性。ROS清除剂NAC的预处理和GSH的补充几乎完全消除了贝母素甲对K562细胞增殖的抑制。这些结果说明贝母素甲引发细胞内氧化-还原失衡可能是其抑制K562细胞增殖，具有体外细胞毒作用的重要机制。
综上所述，本研究发现贝母素甲能抑制K562细胞增殖。在这一过程中，贝母素甲调节了K562细胞内ROS和GSH含量，破坏其氧化-还原平衡。活性氧清除剂NAC和GSH的处理能抑制贝母素甲的上述效应，提示氧化-还原状态影响贝母素甲对人白血病细胞K562增殖的抑制作用。
[参考文献]
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（宿迁学院五系，江苏宿迁223800）
摘要：职业生涯规划是宿迁学院新生入学教育的关键环节，科学地进行学生职业规划测评是学生职业生涯规划工作的重要组成部分。本文是依据朗途职业规划测评系统，组织宿迁学院五系新生在接受系统教育与提示之后进行测量，并以学院职业生涯规划的基本精神为指导进行的一次报告分析。一方面，这些分析会为系部学生的职业生涯规划指导提供直接的数据参考；另一方面，这也为学生个体的职业生涯规划提供了重要的指南。
关键词 ：新生；职业生涯规划；测评；分析报告
中图分类号：G645文献标识码：A文章编号：1671—1580（2014）06—0031—02
收稿日期：2014—01—10
作者简介：高雷（1986— ），男，江苏宿迁人。宿迁学院五系专职政治辅导员，助教，硕士，研究方向：思想政治教育。
本分析报告依据的理论预设、分析的维度以及数据源都取自于朗途职业规划测试系统。朗途职业规划测试系统可以对学生个体稳定的性格特质以及创业的深层次动力进行测试，并针对学生的不同测试情况提供专业的职业规划指导。从测试的指标项目来看，该系统设计了岗位与学生特长、与学生的动力驱动类型之间的匹配参考。通过综合的测量结果，可以让学生个体发现自身职业获取的短板以及具体的改进方略。
学生个体在获取自身职业生涯发展规划的参照系之后，也懂得了“取人之长，补己之短”的现实途径。同时，我们应该提醒每位参与测试的学生：无论是自身稳定的性格特质，还是个体的动力类型，都是具有“先赋”意味的。它的稳定与独特只是相对的。随着生命成长历程的延续与生活情境的变迁，个体的知识库和经验都会得到不断的丰富，并影响学生的个体性格特质与职业选择的动力类型。这些都是职业生涯规划指导教师应该注意的问题。
结合宿迁学院五系新生在朗途职业规划测评过程中所呈现出的统计规律，我们尝试着分析本届新生在职业规划过程中的状况，并期望分析过程能够为我们之后的具体职业生涯规划指导提供重要的参考。
一、参评学生基本状况分析
五系新生的性别分布比例为女生占71%，男生占29%，女生的数量几乎是男生的3倍。由于受中国传统文化、生活成长环境、社会角色期望以及个体层次心理因素的影响，性别因素在职业规划中的影响也比较明显。五系新生年龄分布范围是19~20岁的区间范围，这与全院新生的年龄段分布是一致的。
二、与个体职业规划测评相关的指标维度分析
（一）性格特质类型维度
从数据显示来看，学生在职业规划受性格类型影响的元素中，“内向感觉 情感 判断”与“外向直觉 情感 判断”的两端分布较为均衡。一方面，证实了新生对本次测评的参与程度比较高，而且在填报测评报告时价值比较中立；另一方面，也告诉我们每一位指导教师要在这两种类型性格匹配的职业种类中做好指导，并兼顾到其他性格类型的职业匹配，帮助学生发掘资源，整合有益信息，针对学生个体性格与职业的匹配衔接，做好进一步的指导工作。同时，通过分析得知，男生与女生在性格特质普遍分布情况上有着较大的区别。这也就告诉我们，除了在性格特质整体分布上要综合关注与学生相匹配的职业规划路径，同时，也不能忽略性别因素对性格特质的影响。当然，这一过程也蕴含着中国传统文化、生活成长环境、社会角色期望以及个体层次心理因素对性格特质的影响。
（二）职业规划的深层次动力源维度
1.成功愿望指数
统计分析结果显示，五系新生有职业获取成功强烈愿望的，只占学生总数的1/5，如果将这部分学生的过往经历与学生的成功愿望指数相关联，学生在职业规划过程中是否具有积极主动、努力进取的相关因素就可以从其过往的生命成长历程中窥探一二，这也为我们进行有针对性的指导与分类教育提供了可能。当然，在这一过程中还涵盖着学生职业目标设定、新情境的驾驭以及自身位置的定位等指标体系，而这些也为指导教师对学生进行有针对性的、个别化的教育与指导提供了维度参照。
2.挫折承受指数
挫折承受指数是指针对受测者在面对挫折、失败与困境时的心态、情绪与行动的可能性的测量。调查显示，宿迁学院五系新生中有近半数的学生在面对失败与困境时表现出的承受能力较低。这也就提示我们要在学生的抗压能力方面进行有益的引导与帮助。在这一过程中，可以引入移情体验与想象获取的技巧，更为关键的是能够将这方面的引导与教育融入到具体的情境与案例中。
3.人际交往指数
人际交往涉及互动过程中的“镜中我”的内心认知与对互动本身的意义的界定与意识问题。从调查中我们可以发现，五系新生中有超过1/3的学生存在人际交往方面的困境，表现出与人交往的动力不足、与人交往的技巧不够、与人交往的程度不清等状况。人际交往是个很传统的社会心理问题。职业规划专项测试中所显示的学生人际交往系数分值只能作为一种参照。但交往也是有基本准则与要求的，如从容的心态、道德的规范、民族的风俗与地域的特点等，这就需要我们准确地把握与有针对性地对待学生的人际交往问题。
4.影响愿望指数
影响愿望指数反馈的是一种人际交往过程中的状态，即要求或希望别人按照自身想法行事的愿望程度。这类动力指数在五系新生群体中体现得较为明显。这在一定程度上印证了“95后”学生的群体特质，也给了每位教师一个提示，即要适当地引导他们学会积极地与人交流互动，懂得“谦让”、“团队”与“包容”。“谦让”会让自身变得懂礼节、明事理；“团队”能汇聚众智，成就事业；“包容”能体现涵养，彰显气度。而这些都是我们职业、事业成功的重要保障。
以上四个方面的动力类型源构成了影响学生个体职业规划的重要的内在影响因素。它的具体体现是动力类型归类，如向着职业目标努力过程中所体现出的主宰型、寄托型、满足型与自强型；在面对挫折、困境时所体现的承受类型（这是逆向的动力），有开拓型、坚守型、安定型与尝试型。
这些性格类型与动力类型测试分类的最终目的，是指导学生在具体的职业规划中进行职业定位。而这一过程的具体依据是学生在这些指标体系中所集中体现出的个体职业规划的长处与短板。因为这些长处与短板的形成是基于具体性格特质测试与动力类型归类的，反映的是个体情况，这是提供职业规划个别化指导的重要基础。长处与短板最终又成为职业选择与规避的重要参照，显得直接明了，为学生在自身的职业定位与今后的职业角色扮演中进行积极的知识技能储备指引了方向。这正是职业规划工作的重要意义与价值所在。
［
参考文献］
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一本章的主要内容和特点
本章包括《组成生物体的化学元素》和《组成生物体的化合物》两节教材。第一节教材需用1课时教学，第二节教材需用2课时教学。此外，有1个学生实验。
第一节《组成生物体的化学元素》。首先，在节的引言中，明确指出自然界中的生物和非生物都是由化学元素组成的。接着，讲述组成生物体的化学元素、组成生物体化学元素的重要作用、生物界与非生物界的统一性和差异性三方面内容。
关于组成生物体的化学元素的内容，一开始就指出组成生物体的化学元素主要有20多种，紧接着以玉米和人体为例，将含量较多的化学元素以及这些元素的含量列成表。通过对表中内容的分析，概括出两点：一是组成玉米和人体的基本元素是C、O、H、N；二是组成生物体的各种化学元素，在不同的生物体内，含量相差很大，由此进一步提出了大量元素和微量元素的概念和种类。
关于组成生物体化学元素的重要作用的内容，首先强调指出，在大量元素中，C是最基本的元素，C、H、O、N、P、S这6种元素是组成细胞的主要元素。接着，说明组成生物体的化学元素进一步组成多种多样的化合物，这些化合物是生物体结构和生命活动的物质基础。
关于生物界与非生物界的统一性和差异性的内容，主要是从组成生物体和无机自然界的化学元素的相同和不同，提出了辩证唯物主义观点：一点是从组成生物体的化学元素在无机自然界中都可以找到的事实，来说明生物界和非生物界具有统一性；另一点是从组成生物体的化学元素在生物体内的含量与在无机自然界中的含量相比，两者相差很大的事实，来说明生物界和非生物界还具有差异性。
第二节《组成生物体的化合物》。首先，明确提出构成细胞的化合物，主要包括无机化合物的水和无机盐，有机化合物的糖类、脂质、蛋白质和核酸。然后，依次讲述构成细胞的这6种化合物。，全国公务员共同天地
关于无机化合物的水，着重说明它在细胞中含量最多；水在不同的生物体中和不同的组织、器官中含量不同；水在细胞中以结合水和自由水两种形式存在；水在细胞内的重要作用。最后强调指出，生物体的一切生命活动，绝对不能离开水。
关于无机盐，强调指出它在细胞中虽然含量很少，且大多数无机盐以离子状态存在于细胞中，但是具有多方面的重要作用：无机盐既是细胞内复杂化合物的重要组成成分，又对维持生物体的生命活动有重要作用。
关于糖类，主要说明它由C、H、O3种化学元素组成，它是构成生物体的重要成分，也是细胞的主要能源物质；糖类大致分为单糖、二糖和多糖等几类(其中的葡萄糖、核糖、脱氧核糖、淀粉、糖元等是重要种类)，以及它们在生物体内的分布和重要作用。
关于脂质，主要说明它由C、H、O3种元素组成，一般包括脂肪、类，全国公务员共同天地脂和固醇等；这几类物质在生物体内的分布和重要作用，并强调指出，磷脂是构成细胞膜和多种细胞器的膜结构的重要组成成分。
关于蛋白质，是本节的重点内容，教材中比较详细地讲述了有关内容。首先，强调蛋白质在细胞中只比水的含量少，大致占细胞干重的50%以上，它是细胞中各种结构的重要化学成分。接着，说明蛋白质主要由C、H、O、N4种化学元素组成；它是一种高分子化合物，相对分子质量很大；基本组成单位是氨基酸；蛋白质的分子结构是由许多氨基酸分子互相连接而成；蛋白质分子的多样性，决定了蛋白质在生物体内有多种重要的功能。
关于核酸，首先明确指出核酸是遗传信息的载体，它对生物体的遗传、变异和蛋白质的生物合成有极重要的作用。然后，说明核酸由C、H、O、N、P等化学元素组成，也是一种高分子化合物；核酸的基本组成单位是核苷酸；核酸可以分为脱氧核糖核酸和核糖核酸两大类。
本节教材的最后一段指出，任何一种化合物都不能单独地完成某一种生命活动，只有按照一定的方式有机地组织起来，才能表现出细胞和生物体的生命现象。这里也体现了辩证唯物主义的观点。
在本章中，为了配合学习有机化合物的内容，安排了学生实验《生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定》，主要是根据某些化学试剂，能够分别使生物组织中上述三种有机化合物，产生特定的颜色反应，来鉴定生物组织中有还原糖、脂肪和蛋白质的存在。
二本章与其他章的联系
1.本章是绪论后的开篇章，所讲内容是最基础的知识，因此与后面的各章都有密切关系，是学习好其他各章的基础，教学中要注意前后知识的联系。
2.组成生物体的化学元素和化合物的知识，是讲述第二章《生命活动的基本单位──细胞》的重要基础。例如，讲述细胞膜的结构和功能，会用到磷脂、蛋白质等知识。
3.第三章《生物的新陈代谢》，与本章联系十分紧密。例如，讲述植物的物质代谢时，要用到酶、水、大量元素、微量元素等知识；在讲到人和动物的物质代谢时，要用到糖类、脂质和蛋白质的知识。
4.第四章《生命活动的调节》在讲到激素的调节作用时，要用到蛋白质等知识。
5.第六章《遗传和变异》在讲到生物体的遗传性和变异性时，有关蛋白质和核酸的知识，是重要的基础知识。
一、教学目标分析
（一）知识与技能：
（1）了解人体的元素组成。
（2）了解一些元素对人体健康的重要作用。
（3）了解人体中元素的存在形式，知道常量元素和微量元素。
（二）过程与方法：
（1）通过与同学讨论、查阅资料，了解钙、铁、锌、碘等营养元素的食物来源。
（2）调查市场上有关补钙、补锌等保健药剂，查看它们的标签或说明书，了解它们的主要成分。
（三）情感态度与价值观：
（1）通过查阅相关资料，丰富课本知识。
（2）通过本课题学习，更加注意平常的饮食营养搭配，改掉偏食、挑食、不吃蔬菜等不良习惯。
（3）学会用一分为二的观点辩证地看待化学元素对人体健康的影响.
二、教学重点：
人体的主要元素组成、分类及作用，一些元素对人体健康的影响。
三、教学难点：
微量元素对人体的作用及适宜摄入量。
四、教学准备：
1、学生以“你知道人体内含有哪些元素”为题，在课前进行资料查找。
2、教师在充分估计学生查找资料的情况的前提下，制作好课件。
五、教学过程：
课时安排：1个课时
新课导入：
师：俗话说：“吃什么补什么”生活中有些人用骨头炖汤，多喝骨头汤，能补充什么营养元素呢？（展示骨头）
生：
师：那么人体由哪些元素组成，这些元素对人体健康有什么重要？怎样补充这些元素？这节课我们就来一起学习课题2
化学元素与人体健康
（板书
课题2
化学元素与人体健康）
讲授新课：
同样是为了补充钙元素，喝纯牛奶和高钙奶，哪一种补充钙元素的效果更好呢？
生：（回答）
师：铁强化的生抽比普通的生抽，强化补充了什么元素？
生：（回答）
师：用加碘盐呢，强化补充了什么元素？
生：（回答）
师：请同学们来讨论一下，这几种营养强化食品有哪些共同之处?还能列出类似的食品吗？
生：
师：人类为什么要生产营养强化品？
师：前面我们学习过生物细胞中的元素，让我们通过微课一起认识人体中存在的元素。
（板书：一、人体中含有的元素）
师：同学们能说说人体中有多少种元素吗？《板书：（50）》
生：
师：下面请同学来回答
生：回答2、3、4、
（板书：常量元素
＞0.01%
微量元素
＜0.01%）
同学们读课本P97页图12-10人体中存在的常量元素、微量元素有哪些
（板书：O、C、H、N
...
Fe、Co、Cu、Zn...）
师：这些元素在人体中的生理功能是什么？让我们继续通过微课来了解某些元素对人体健康的影响
（板书：二、某些元素对人体健康的影响）
师：人体中含量最高的金属元素是什么？
生：
师：谁来说说钙元素在人体中以什么形式存在？
生：
师：它的生理作用是什么呢？
生：
师：缺乏钙元素，对人体健康有哪些危害？
生：
师：钠元素和钾元素对人体健康也有着重要作用，它们在人体中存在形式分别是什么呢？
生：
师：它们的生理作用呢？
生：
师：同学们来思考一下运动员激烈运动，大量出汗之后，常会饮用一些含无机盐的运动饮料。为什么？
生：
师：除常量元素外，不少微量元素也是人体必需的，下面请几位同学抽签回答几种必需元素对人体的作用及摄入量过低对人体健康的影响。
生：
师：同学们来了解一下几种元素的主要食物来源，为接着的小游戏做准备（板书：微量元素）
师：先请一位同学上来做模特，出示某元素，其他同学上讲台选出该元素的缺乏症，及其主要的食物来源，看看谁最快，选出的有多又正确，参与的同学都有奖励哈！
师：铁、锌、碘等这些人体必需的微量元素，还有一些微量元素是有害元素
比如：摄入汞、铅、镉等摄入过多会中毒、
所以我们要防止有害元素对人体的侵害。
师：“缺什么补什么如何补”，我们来看一段视频了解一下
关键词：生物 学习 观点
2010年秋季，甘肃省全面实施高中新课程。新课程标准下的高中生物与旧课程相比，更强调了探究能力的培养，要求全面提高学生的生物科学素养。主要的思路是沿着科学家们对生物学的认识过程来呈现知识内容，使学生体会探究的乐趣。树立正确的生物学观点是学习生物学、提高学生科学素质的重要目标之一，是生物新课程改革的一个基本要求；正确的生物学观点又是学习、研究生物学的有力武器。
一、生命的物质性观点
生物具有共同的物质基础，即组成生物体的化学元素和化合物基本相同。组成生物体的化学元素有二十多种，它们在生物体内的含量不同。含量占生物体总质量的万分之一以上的元素称大量元素，如C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg等。生物生活所必需，但是需要量却很少的一些元素，称微量元素，如Fe、Mn、Zn、Cu、B、Mo等。这些化学元素对生物体都有重要作用。组成生物体的二十多种化学元素，在无机自然界都可以找到，没有一种化学元素是生物所特有的。这个事实说明，生物界和非生物界具有统一性。生命的物质性观点能帮助我们理解生物界与无机自然界的统一性以及生物的进化历程。
二、生物结构与功能相统一的观点
生物体的结构与功能相适应。结构与功能相统一的观点包括两层意思：一是有一定的结构就必然有与之相对应功能的存在；二是任何功能都需要一定的结构来完成。例如C3植物和C4植物的叶片结构与其功能相适应：C3植物的维管束鞘细胞不含叶绿体，叶肉细胞含有正常叶绿体；C4植物的维管束鞘细胞含没有基粒的叶绿体，叶肉细胞则含有正常的叶绿体。所以C3植物的叶肉细胞中进行光合作用的光反应以及暗反应的C3途径，C4植物的叶肉细胞既进行光反应又进行暗反应的C4途径，而维管束鞘细胞只进行暗反应的C3途径，因此，C3植物光合作用产物淀粉存在于叶肉细胞，而C4植物光合作用产物淀粉则存在于维管束鞘细胞中。
三、生物的整体性观点
系统论有一个重要的思想，就是整体大于各部分之和，这一思想也完全适合生物领域。不论是细胞水平、组织水平、器官水平还是个体水平，甚至包括种群水平和群落水平，都体现出整体性的特点。例如生物体的结构基础――细胞，其亚显微结构中的细胞膜、核膜以及线粒体、叶绿体、内质网、核糖体、高尔基体、中心体、液泡、溶酶体等细胞器都有其特有的结构和功能，但是只有在它们组成一个整体――细胞的时候才能完成新陈代谢等生命活动，这就是细胞结构的完整性。若从结构上看，生物膜不仅具有直接的联系，而且具有间接的联系，即生物膜之间可以相互转化；从功能上看，细胞的各部分结构既有明确的分工，又有紧密的联系，协调一致地共同完成各项生命活动。从调控上看，细胞核是遗传物质储存、复制和转录的场所，是细胞遗传和代谢的控制中心，在遗传物质的调控下细胞成为一个统一的整体。从与外界环境的关系上看，细胞的整体性还表现在每一个细胞都要与相邻细胞进行物质交换和能量交换，而与外界直接接触的细胞都要与外界环境进行物质交换和能量转换。
四、生命活动对立统一的观点
生物的诸多生命活动之间都有一定的关系，有的甚至具有对立统一的关系。例如，植物的光合作用和呼吸作用、同化作用与异化作用就是对立统一的生命活动。光合作用的实质是合成有机物，储存能量；呼吸作用的实质是分解有机物，释放能量。很明显，两者之间是相互对立的。呼吸作用所分解的有机物正是光合作用的产物，可以说，如果没有光合作用，呼吸作用就无法进行；另一方面，光合作用过程中，原料和产物的运输所需要的能量，也正是呼吸作用释放出来的，如果没有呼吸作用，光合作用也无法进行。因此说，呼吸作用和光合作用又是相互联系、相互依存的。只有光合作用和呼吸作用的共同存在，才能使植物体的生命活动正常进行。
五、生物进化的观点
辩证唯物主义认为，一切事物都处在不断的运动变化之中，任何事物都有一个产生、发展和灭亡的过程。生物界也不例外，也有一个产生和发展的过程。所谓产生就是生命的起源，所谓发展就是生物的进化。生命的起源经历了从无机小分子物质生成有机小分子物质，再形成有机高分子物质，进而组成多分子体系，最后演变为原始生命的变化过程；生物的进化遵循从单细胞到多细胞，结构上从简单到复杂，生活环境上从水生到陆生，进化地位上从低等到高等的规律。生殖隔离是新物种形成的标志。
【摘要】
目的探讨川芎嗪对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)中血小板源生长因子（PDGF）表达的影响。方法培养大鼠主动脉VSMC，以 10-7mol/L AngⅡ刺激作为AngⅡ组 ，AngⅡ刺激前分别应用不同浓度川芎嗪预处理做为高、中、低剂量组，以正常的VSMC为对照组，测定VSMC增殖活度，免疫细胞化学法检测培养24h时VSMC PDGF-B的表达。结果AngⅡ组VSMC增殖活度与 PDGF-B表达显著高于对照组(P
【关键词】 川芎嗪 血管紧张素Ⅱ 血管平滑肌细胞 血小板源生长因子
经皮冠状动脉腔内成形术（percutaneous transluminal coronary angioplasty，PTCA）后再狭窄一直是冠心病治疗领域的一大难题，血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)异常增殖是PTCA术后再狭窄的一个重要病理改变［1］。有文献报道，血管紧张素II(angiotensin II，AngⅡ)、血小板源生长因子（platelet-derived growth factor， PDGF）在VSMC增殖中作用明显［2，3］。本研究以体外原代培养的大鼠主动脉平滑肌细胞为模型，观察AngⅡ与PDGF-B表达的关系以及川芎嗪(tetramethylpyrazine，TMP)对其影响，探讨TMP对VSMC增殖的作用机制。
1 材料与方法
1.1 动物及试剂
体重120～150 g的健康雄性SD大鼠 （河南省实验动物中心）。盐酸川芎嗪注射液（无锡市第七制药公司），DMEM培养基干粉（Sigma）、细胞培养器材、胎牛血清、胰蛋白酶购自华美生物工程公司；AngⅡ（Merck公司），PDGF-B抗体（博士德），sm-actin免疫试剂盒（Santa Cruz），其它试剂为分析纯产品。
1.2 细胞培养与鉴定
将大鼠断头处死，无菌条件下迅速打开胸腔，取出胸主动脉，按组织贴块法在细胞培养箱内以含20%胎牛血清的DMEM培养。光镜下以及倒置相差显微镜下观察细胞呈梭形，生长至融合状态时呈现特有的峰与谷特点，同时经sm-actin免疫细胞化学染色鉴定，细胞纯度达95%以上。选择4-6代VSMC进行实验。
1.3 实验分组
①对照组(control)：不加特殊试剂，仅给予无血清DMEM培养；②AngII组：AngII 10-7mol/L培养；③TMP低剂量组：20 mg/L TMP预孵育30 min后，加AngⅡ培养；④TMP中剂量组：200 mg/LTMP预孵育30 min，加AngⅡ培养；⑤TMP高剂量组：2 000 mg/L TMP预孵育30 min，加AngⅡ培养。
1.4 检测细胞增殖活度
采用MTT法。按上述方法接种于96孔培养板中培养48 h后终止，换无血清DMEM培养24 h，分组（同前）继续培养24 h，每孔加入MTT溶液20 μl，吸去培养上清液，每孔加入150 μl二甲基亚砜振荡；选择490 nm波长，在酶标仪上测定各孔吸光度值（A值）。
1.5 免疫细胞化学法检测
PDGF-B的表达0.25%胰蛋白酶消化制备细胞悬液，调整细胞密度为5×104/L，接种于内置有盖玻片的6孔培养板中培养48 h，无血清DMEM培养24 h，分组（同前）继续培养24 h。培养细胞爬片用PBS冲洗3次，4%多聚甲醛固定15 min，0.3%过氧化氢中孵育10 min；滴加复合消化液后滴加封闭血清，37℃，30 min，滴加PDGF-B一抗（1∶200），4℃过夜，滴加二抗工作液，37℃孵育30 min；滴加SABC，37℃孵育30 min。DAB 显色，中性树胶封片。
1.6 计算机图像分析
每一张涂片400倍显微镜下随机选择5个视野，计算其平均灰度值，数值越大表示抗原表达量越小。
1.7 统计学处理数据用±s表示
计算机统计软件分析SPSS11.0，采用One-way ANOVA分析，两两比较LSD检验。
转贴于
2 结 果
2.1 TMP对AngⅡ刺激的VSMC增殖活度的影响
AngⅡ组细胞增殖活度明显高于对照组（P
2.2 TMP对AngⅡ诱导的VSMC PDGF-B表达的影响
显微镜下观察，PDGF-B阳性表达为VSMC胞浆与胞核呈棕黄色反应，主要为胞浆表达。与对照组相比，AngⅡ刺激24h后，VSMC表达PDGF-B显著增强(P
3 讨论
TMP是从中药川芎中分离提纯的有效成分，其化学结构为四甲基吡嗪。广泛用于高血压病、冠心病等的防治。研究表明TMP具有扩张冠状动脉、抗凝、抗血小板聚集、抗心肌缺血/再灌注损伤降低血压、降低肺动脉高压以及抑制血管平滑肌细胞增殖等多种心血管药理作用［4］。TMP可能通过抑制VSMC增殖发挥抗血管再狭窄作用，但其具体分子机制尚不清楚。
我们先前的研究表明［5］，血管损伤后再狭窄时血浆AngⅡ水平显著升高，血管壁PDGF-B表达显著增强。PDGF是由血小板、平滑肌细胞等分泌的一种糖蛋白，其家族目前至少有4个亚基，即PDGF-A，PDGF-B，PDGF-C，PDGF-D。其中由PDGF-A，PDGF-B形成的同源二聚体具有强烈的促进有丝分裂及细胞趋化作用，在体外可刺激心肌细胞、血管平滑肌细胞、成纤维细胞等多种类型细胞的肥大或增殖。PDGF与其膜表面受体结合，激活受体的内源性酪氨酸激酶活性，通过磷酸化胞浆中的信号分子，最终将信息传递到核内，导致VSMC增殖［6］。
本实验结果显示，AngⅡ诱导的VSMC PDGF-B表达水平显著高于对照组，同时VSMC增殖活度增强。提示AngⅡ可以通过上调PDGF-B表达、增强PDGF-B介导的细胞信号通路进一步促进血管平滑肌细胞增殖；不同剂量的TMP作用后，AngⅡ诱导的VSMC PDGF-B表达水平显著下调，VSMC增殖活度显著减弱。说明TMP能抑制AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖，该效应与抑制PDGF-B表达有关；在相同培养时间内，随着TMP浓度增加，细胞增殖活度及PDGF-B表达水平逐渐降低，说明TMP的抑制作用具有量效关系。
综上所述，川芎嗪对AngⅡ诱导的VSMC增殖有显著抑制作用，其作用机制与抑制PDGF介导的信号转导有关。
参考文献
［1］Yang W， Ge J， Liu H，et al. Arsenic trioxide eluting stent reduces neointima formation in a rabbit iliac artery injury model［J］.Cardiovasc Res， 2006 ，72(3)：483.
［2］罗德生，郑红花，李映红，等.川芎嗪抗血管紧张素Ⅱ诱导的离体培养血管平滑肌细胞增殖的实验研究［J］.时珍国医国药，2006，17（3）：321.
［3］Kim TJ， Yun YP. Antiproliferative activity of NQ304， a synthetic 1，4-naphthoquinone， is mediated via the pressions of the PI3K/Akt and ERK1/2 signaling pathways in PDGF-BB-stimulated vascular smooth muscle cells［J］. Vascul pharmacol， 2007，46(1)：43.
［4］梁爱群.川芎嗪的药理及机理研究［J］.时珍国医国药，2005，16（6）：532.
红磷的相对原子质量取31。
磷：第15号化学元素，符号P。处于元素周期表的第三周期、第ⅤA族。磷存在于人体所有细胞中，是维持骨骼和牙齿的必要物质，几乎参与所有生理上的化学反应。磷还是使心脏有规律地跳动、维持肾脏正常机能和传达神经刺激的重要物质。
相对原子质量：元素的相对原子质量是其各种同位素相对原子质量的加权平均值。元素周期表中最下面的数字为相对原子质量。
（来源：文章屋网 ）
硒是一种化学元素，化学符号是Se，一种非金属。可以用作光敏材料、电解锰行业催化剂、动物体必需的营养元素和植物有益的营养元素等。
硒在自然界的存在方式分为两种：无机硒和植物活性硒。无机硒一般指亚硒酸钠和硒酸钠，从金属矿藏的副产品中获得；植物活性硒是硒通过生物转化与氨基酸结合而成，一般以硒蛋氨酸的形式存在。
硒作用与应用是在体内硒和维生素E协同，能够保护细胞膜，防止不饱和脂肪酸的氧化，微量硒具有防癌作用及保护肝脏的作用。
（来源：文章屋网 ）
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