时间：2023-03-20 16:16:47
绪论：在寻找写作灵感吗？爱发表网为您精选了8篇生物检测技术论文，愿这些内容能够启迪您的思维，激发您的创作热情，欢迎您的阅读与分享！
PCR技术是一种将特异性DN段在体外合成方法，也是聚合酶链式反应。通过PCR技术，环境中的有害生物，包括病毒，病原菌等都可以被监测到。过程主要包括分析与监测PCR扩增产物、PCR扩增靶序列、提取模板核酸等。不仅如此，环境中的特异性种群也都可以通过PCR进行监测，甚至基因表达都可以以之来测定。同时，PCR也可以用来对环境中基因工程菌株进行跟踪监测。
2生物发光监测技术
大自然非常神奇，各种各样的生物都有。而在其中有些昆虫会发出亮光，比如萤火虫。其实不止萤火虫等昆虫，包括真菌、细菌等在内的许多生物也都可以发出亮光。这些细菌天生对土壤中的重金属敏感，会根据重金属的多少而发出强弱程度不同的光。只需要通过判断其放射荧光的强度便可以对其所处环境的污染程度完成监测。较之常规监测方法，生物发光监测技术具有监测方便、快速、特异性强、灵敏度高等特点。
3生物酶技术
3.1处理功效高
生物酶技术利用微生物和酶结合，极大地提高了其处理污染的效率，较之通常的化学和生物方法，生物酶技术可对有机物进行快速降解，速度得到极大提升，是传统方法的百倍。将生物酶技术应用到污染物之后，可迅速祛除污染物的臭味，同时也能对水质进行净化处理，甚而降低COD、BOD5、氨、氮等的含量。这也是有些洗衣粉品牌在广告语中强调酶含量的原因所在。
3.2适应性更广
生物酶技术通过微生物和酶的结合，大幅度增加了微生物对环境的适应性，使得微生物可以在多种生存条件下得以生存并逐渐适应多种温度和pH值范围。如此一来，微生物便可以在低氧环境中也能有效发挥作用。
3.3更有针对性
生物酶技术现在拥有多个研究配方，甚至多达四十多种。可在不同领域、不同用途和不同的污染环境中广泛使用；即使碰上处理不了的，也可根据具体治理对象的具体情况，专门研发出针对性的、最具效力的配方。
3.4治理成本最低
生物酶技术产品投入资本小，但治理效果却十分显著。无需花高价购买地皮建厂，也不必购置大型仪器，在综合治理成本上有着明显优势，非常值得采用。
3.5纯绿色环保
当今环保意识已逐渐渗透到每个人们的心中，绿色产品成为人们普遍关注的焦点。而生物酶技术产品由纯天然菌种和酶复合后生成，在它的成分内既无转基因，也不包含任何的化学物质，也自不会给环境造成二次污染，是一种生物技术在环境保护应用上非常值得大力推广的环测方法。
4生物芯片技术
生物芯片技术起源于速测试试条发明后的次年，亦即1995年，通过这项技术，数以万计的基因的表达情形都可以被自动且迅速地监测出来。依照固定于芯片上的探针种类的不同，生物芯片可分为基因芯片、蛋白芯片、细胞芯片以及组织芯片等。近日，国外的一个资深生物学家通过不断研究，发明了一种新的，独特的，可提供更多基因信息的组织芯片和细胞芯片。较之基因芯片或蛋白芯片，组织芯片可提供的信息更为庞杂，对于环境监测而言更为有用。因此许多环境科学家逐渐意识到了生物芯片技术的强大，并将之引入到环境科学研究中来。在科学技术较为发达的西方国家，他们基因学研究的新趋向便是基于生物芯片技术的环境基因学。作为科学技术稍显落后的我国，在生物芯片研究上成果并不那么突出。好在国家自然基金委与科技部都对这项新兴技术予以大力支持，并将之列入了前沿课题项目中，相信在不久的将来，我国的生物芯片技术也会取得非常成就。
5生物传感器技术
电子科技技术研发的不断深入、以及生物技术的研究的持续发力，使得生物传感技术应运而生，并获得人们的逐渐认可。它的特点在于高度集成化、微型化和自动化，能够快而有效地帮助环境监测进行有害物质分析。不仅常被用于环境监测，在食品工业与生物医药领域也都应用广泛。生物传感器通常由转换器和敏感材料（分子识别单元）俩个部分构成，其特点为:测定速度快、成本低、且操作简便。相信在未来会被广泛应用于环境监测中去，会大有所为。
6结语
关键词：课堂教学 成绩评定 综合素质
根据我校培养方案，食品微生物检测技术是生物工程专业质检方向以及食品质量与安全专业的选修课之一。计划课时为37(约三分之一的实验课时)，总的教学目的是通过本课程的学习,使学生掌握食品微生物检测的基本原理、国家标准方法及内容体系，各种食品、饮料等的采样原则及前处理方法等；了解国内外微生物检验技术的现状及发展情况，理解各种快速检测新技术的原理、使用范围和方法等。作为食品质量与安全专业以及生工专业质检方向的专业选修课，食品微生物检测技术的教学内容决定了它是一门操作性、实用性很强的课程，其教学的直接目的是教会学生掌握目前使用的国家标准方法、知识以及对这些知识和技能的综合应用，教会学生在实际工作中自己动手解决问题的方法，提高学生应对实战的能力。
考核成绩评定是课堂教学的重要组成内容之一，对教学的效果、课堂的效率、学生学习的主动性、积极性以及学风都有着非常重要的影响。本课程以微生物检验基础理论知识、快速检测技术和检验实验三部分构成课程结构框架，分别在三部分中设置不同的考核方式如下表1，以其在课程学时数较少的有限时间内为学生传授完善的知识体系，确保理论知识和技能的有效掌握，并获得较理想的教学效果，是笔者对教学进行不断改革的追求。
一、以“考勤和提问”方式督促学生形成认真、严谨的学习态度
学生的学习出勤和课堂提问的表现能够间接地反映他们的学习态度。如有的学生上课经常迟到或借故缺勤，甚至旷课；有的学生虽然每次出勤，但在上课时，不专心听老师讲课，而是看与本课程无关的书，或者做其他专业课的作业，可谓“出工不出力”。持这样学习态度的学生，上课心不在焉，往往不能正确回答或回答不出老师的课堂提问，其学习效果可想而知。因此要从考勤和提问中端正学生的学习态度，出勤包括迟到、缺课（病假和事假）、旷课三种行为，迟到1次扣0.5分，旷课1次扣1分，缺课需要病假或事假证明，病假不扣分，事假扣0.5分。“提问”以随机提名方式进行，一个学期每个学生1～2次，答不出扣1分，答的不好酌情扣分，出勤和提问占课程总成绩的10%。全勤、学习态度端正、认真听讲学生得10分。
二、以“随堂作业”形式考察基础理论知识的掌握
占总评权重的10%，即10分。在教学进行到某一章节或某一部分的结束时，适时对学生进行相关内容的定时随堂测试，让学生独立完成。测试题目以知识测试为主，能力测试为辅，主要考查学生对于所学理论知识的掌握程度。知识测试题目事先拟好标准答案，而能力测试题目可是开放性的，可事先制定答题给分的档次标准随堂测试具有两方面的功能，一是检测学生的习效果，促进学生平时的学习；二是对于教学效果的反馈作用，教师可据测试的情况及时掌握学生的学习情况，以便及时调整教学的节奏、方法和深度。一般以3～4次为宜,各次得分相加换算成10分，再计入总评成绩。
三、以“PPT准备与汇报”形式掌握学科前沿技术
占总评权重的20%，即20分。本课程的教材为自编教材，其中大部分内容介绍了微生物快速检测的新技术，学生分两人一组准备PPT汇报，学生介绍内容涵盖了“微量多项实验鉴定系统”、“快速自动化微生物检测仪器和设备”、“现代分子生物学和免疫学技术的采用(包括DNA探针、PCR、DNA芯片、ELESA、免疫荧光技术、放射免疫和全自动免疫诊断系统)”、“生物传感器”等。通过对不同新技术的精心准备和交流，学生基本上掌握了这些新技术在微生物检测中的应用。以“PPT准备与汇报”开展教学，不尽提高了学生的自主学习积极性，也大大锻炼了学生的语言组织、表达以及交流（汇报结束，台下老师、同学提问）应变能力。
四、以“课程论文撰写”形式培养科研思维
课程论文的撰写需要学生融合贯通微生物检测技术中理论知识和快速检测技术的基础上，通过指导学生如何查阅和有效利用资料，并将其转化并形成自己的知识体系。要求学生在学习教材内容以外，关注学科前沿技术，开创教学内容新领域教学过程中，在保证现有国标主要内容和知识体系的前提下，使学生了解食品微生物学检验学科领域(目前虽没有放入GB中)的其他知识及技术和前沿知识及新技术，并了解获得它们的途径和方法。学生论文有以某种病原菌为例，介绍对此致病菌的各种检测方法，也有以某种检测方法为手段，介绍此方法在不同病原菌中的检测及特点等各种方式展开的综述，不但锻炼了学生检索文献、利用文献的能力，开阔了学生视眼，学习了科研论文的撰写，培养了学生的科研思维能力。
五、注重实验设计和操作过程，培养严谨的科学作风和良好的研究思维能力
综合考虑微生物检验的教学特点及实验条件，以培养学生科学研究的思维方法为目标，引导学生对实验材料进行选择（如有些同学选择放置不同天数的牛奶，也有选择不同货架期的各种食品等），对实验内容、步骤等各个环节进行设计，并自己计算所需要的耗材和玻璃器皿，树立学生对自己的实验全权负责的信念。在实验条件允许的情况下，可以扩展学生的实验设计形成研究论文，因条件不允许的实验内容，鼓励学生申请校开放实验室项目、学生科研计划项目及大学生创新设计大赛等。建立培养学生学习的长效机制，学生学完课程后仍然可以充分利用实验室的平台，独立从事科学研究，增强学生勇于攀登科学高峰的意识。
另外，要求学生严格遵守各项注意事项，仪器、设备、药品、试剂的使用，甚至包括衣帽、操作姿势、言行、手法、材料处理、善后清洁等都严格按要求进行。通过严格的要求培养学生细腻、严谨的科学作风。
[关键词]环境保护；检测技术；可持续发展
中图分类号：X321 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2015）40-0358-01
自进入二十一世纪以后，人类社会得到了突飞猛进的发展，无论是工业发展速度、社会经济发展速度还是人口增长速度，都给生态环境带来巨大的压力，环境污染与能源问题已经影响到人类社会的生存与发展，环境问题已经成为关系整个人类社会可持续发展的重要问题。面对严峻的环境问题，全球各国都加强了环境污染监测与治理方面的工作，微生物对环境污染或环境变化极为敏感，利用微生物检测技术对微生物进行检测，能有效的通过微生物信息掌握环境状况，从生物学角度监测和评估环境质量，并且还能反映出环境污染的历史情况，能有效弥补物理、化学检测的不足，在环境监测中有着得天独厚的优势。？
一、我国环境技术的发展概况
我国环境技术的发展始于20世纪70年代初，自“六五”期间国家将环保科技列入国家科技计划以来，环境技术得到了稳定且逐步加强的支持渠道。30多年来，国家各级科技计划中均在环境保护中一些迫切需要解决的关键技术（如环保基础研究、技术开发等）方面开展了跨学科、跨部门的联合攻关，已取得了丰硕的成果，并为产业化奠定了坚实的基础。
二、环境检测技术目前存在的问题
1.我国现行环境监测分析方法的问题
检测参数已基本齐全，但仍存在一定的缺口。有些标准中的检测参数仍不能涵盖其中，或是参数的检出限不能满足标准要求，需要进行一些新项目、新方法的开发。国内现行有效的国家标准等涵盖面仍不够广，更新也不够及时，导致日常工农业生产中易造成环境污染的部分项目参数未受监控，特别在发生应急事故时，如有机氯农药和有机磷农药。即实验室所检测的目标化合物与市场使用的产品发生脱节现象，需要及时了解实际情况进行补充。？
环境空气监测主要监测项目仍为延续多年的常规监测项目，用于霾污染、臭氧光化学污染特征及生成机制、空气污染的人体健康和生态效应的跟踪评估和控制研究等监测项目尚为空白。
噪声监测技术和规范尚需不断完善随着城市建设的高速发展，一些过去不被重视的噪声和振动源逐渐显现，如飞机噪声、轨道噪声和振动等，市民中比例比较高的居民小区固定设施、空调噪声、振动扰民等，都需要有相应的监测技术与管理要求相配套。目前，噪声投诉已跃居各类环境污染投诉的首位。面对这种严峻的声环境污染，传统的人工监测、手持仪器监测显然无法满足声环境监测自动化、网络化、智能化的要求。
尚未建立突发环境事件应急监测分析方法标准体系。我国2006年颁布《国家突发环境事件应急预案》，2010年颁布《突发环境事件应急监测技术规范》。目前，我国的应急监测技术还没有形成一套完整的体系，已有的监测方法标准大多不适合突发污染事故的现场快速、动态测定，且分析成本较高。发达国家应急监测仪器体积小、重量轻、分析速度快、操作简便、种类繁多，有些仪器的性能指标接近或达到实验室仪器的水平，而能源和溶剂的消耗却大大减少等特点，相比之下我国环境应急仪器、设备还有一定差距，而且应急仪器方法多为非标方法，许多监测数据只能作定性或半定量使用。事故应急的简易、快速现场测定方法应与相应的现行标准方法进行比对，立正尽快提升为标准方法。
2.我国现行环境监测技术体系构建的问题
1）对环境监测技术体系建设缺乏完整的构想和统一的规划，一直没有系统地分析各环境要素监测技术的发展走向。
（2）环境监测基础技术结合实际工作需要研究得不深、不透，实际监测工作中存在的技术难点没能及时解决，个别解决了的，也没能及时总结成技术规范（规定）。
（3）对环境监测发展规律研究不够，前瞻性、方向性的监测技术把握不准，环境监测新理论、新技术研究不深入。随着社会经济的发展，人口、资源、环境问题的日益严峻，单纯从理化、生物指标监测来了解环境质量已经不能满足要求，综合各要素的生态监测是环境监测发展的必然趋势。生态监测本身仍然是处于发展中的新监测技术和方向，很多地方仍需完善。
三、环境检测技术在生态可持续发展中的重要作用
环境检测技术可以对水源污染、水土流失、物种多样性等生态环境问题进行检测和监控，通过对数据的及时采集和分析，对当前的生态环境问题有所正确的了解，从而能够根据这些数据进行分析制定相应的措施和政策，以达到环境保护的目的，促进生态的可持续发展。
1.环境检测技术的构建
环境检测技术的构建首先要注重环境检测观念的改变，政府及相关部门在加大环境检测技术的硬件投入时，还要注重培养环境检测人员的技术能力，为环境监督执法提供基础保证，建立对现代企业环境保护工作、污染治理的技术支持机构，加大对现代企业污染排放的监督，从而减少污染源的排放。同时构建环境检测技术的预警体系，促进环境检测技术体系的完善。另外，要形成以现代信息自动化检测技术为中心的环境检测技术体系。信息自动化检测，不仅能够提高环境检测的工作效率，而且能够实现环境实时在线的监测，促进监测工作质量的提高。最后，要以环境检测技术体系构成要件强化为基础，实现环境检测技术体系的完善与建立。加快环境检测技术体系相关法律的完善，以法律规范实现对环境监测工作的规范与指导。
2.环境检测技术在不同生态问题中的应用
环境检测技术的应用可以对不同的生态问题进行监控，从而提出及时有效的解决办法。比如，污染问题。大气污染、噪声污染、水源污染等问题都属于环境污染问题。这些问题不仅对环境造成了一定的破坏，同时危害了资源的利用，阻碍了社会的发展。环境检测技术可以通过在不同的污染点进行检测，及时发现污染源头，控制污染排放。同时环境检测技术的应用，有效的对企业和个人的污染排放进行制约，减少了污染排放，环境污染问题自然的到改善，这就实现了环境、资源与人口之间的协调，有利于生态的可持续发展。
再比如，在水土流失问题中的应用。对水土流失问题的分析需要长时间的数据采集，环境检测技术的应用可以很好的满足这一要求。环境检测技术可以对水土流失问题进行数据采集，通过不同年份、不同季节的水土流失情况，环境检测人员可以从中发现规律，制定改善水土流失的方法。
结束语
我国环境技术的发展始于20世纪70年代初，自“六五”期间国家将环保科技列入国家科技计划以来，环境技术得到了稳定且逐步加强的支持渠道。30多年来，国家各级科技计划中均在环境保护中一些迫切需要解决的关键技术方面开展了跨学科、跨部门的联合攻关，已取得了丰硕的成果，并为产业化奠定了坚实的基础。
参考文献
[1] 余财金.论环境监测技术体系的构建【期刊论文】华章-2012.
[2] 张亚斌，郝俊江.农村生态环境污染快速检测技术研究及应用【期刊论文】小城镇建设-2011.
论文关键词：翻译杂交释放技术，翻译杂交捕获技术，无细胞翻译系统，重组子，筛选
1.引言
翻译杂交释放（Hybrid-Release Translation , HRT）技术和翻译杂交捕获（Hybrid-ARrest Translation , HART）技术，是鉴定克隆基因翻译产物的有效方法。两种方法都利用纯化的mRNA通过无细胞翻译系统（cell-free translationsystem）直接合成蛋白质。细胞裂解物，可以来自于发芽的小麦种子中，或者来自于兔网状细胞，都具有很强的合成蛋白的能力，含有蛋白质合成所必需的核糖体，tRNA和其他蛋白质合成所必需的分子。然后加入mRNA和必需的20种氨基酸，其中Met是35S标记的。mRNA被转录成放射性蛋白质的混合物，可以通过电泳分离，自显影显示出来。每一条带都代表mRNA所翻译的一种蛋白。
当有cDNA克隆存在时HRT和HART可以非常好的工作。在HRT中，首先将cDNA变性，结合到纤维素膜上或者尼龙膜上，加入mRNA样品，能与cDNA杂交的特异mRNA保留在膜上，除去未结合的分子后，可以收集mRNA并加到细胞外系统中生物论文，这样将产生cDNA编码的特异的蛋白质。
HART的不同点在于，HART并不除去未杂交的分子，而是将整个膜转入细胞外系统，杂交的mRNA不能直接翻译，所以除此之外，所有的mRNA都翻译。翻译产物中缺失的蛋白可以进行鉴定中国知网论文数据库。
2. 无细胞翻译系统（Cell-Free Translation System）
实验室中常用的无细胞翻译系统是麦芽胚（germinating wheat seeds）提取物和兔网织红细胞（rabbit reticulocyte cell）提取物，也有使用非洲爪蟾（Xenopus laeuis）卵母细胞体系的[1]。无细胞翻译系统主要含有：
（1）核糖体；
（2）tRNA；
（3）20种氨基酸，其中一种带有放射性标记（实验室中也经常使用35S-甲硫氨酸<35S-methionine>），供放射自显影检测之用；
（4）控制蛋白质合成的相关因子。
无细胞翻译系统主要有如下3点优越性：
（1）在无细胞翻译系统中，蛋白质合成的活性极高。
无细胞翻译系统就是一种人工制造的蛋白质“合成机器”， 其功能就是专门进行蛋白质的合成。相对于传统的宿主菌翻译系统而言，无细胞翻译系统不用考虑宿主菌本身的生活能力，只需大量合成目的蛋白质即可，效率极高[2]；
（2）专一性地翻译目的基因的序列。
与（1）相同，无细胞翻译系统不受到宿主菌的干扰。假设一重组子X，如果加入到无细胞翻译系统中，则该系统只翻译重组子上有限的核酸序列，便于对目的基因及其表达产物进行分析。相反，如果将重组子X导入某一受体细胞，则表达产物将包括重组子与宿主细胞两方面的蛋白质，且后者将占绝大多数，给分析工作带来极大的不便；
（3）加入了放射性标记的氨基酸，有利于对翻译产物进行检测；
作为基因工程研究的重要手段，无细胞翻译系统的主要功能就是定向地合成所需蛋白质，并对其进行检测。常在系统的氨基酸底物中添加一种带有放射性标记的氨基酸，或者使用35S-甲硫氨酸（35S-methionine），便于翻译后的检测工作[3]。
3.HRT和HART
HRT和HART的技术思想是相同的，核心内容都是以目的基因的mRNA为操作对象，用放射自显影的方法检测其表达产物的有无，而其中的关键步骤，就是以目的基因为模板，获得该基因的cDNA生物论文，在杂交检测中作为探针使用。
在HRT中，目的基因与载体连接之后，将进行如下操作：
（1）将连接后的重组子加入到无细胞翻译系统中，进行转录、表达，提取mRNA；
（2）从提取的mRNA中取出一部分，以目的基因为模板设计引物、以 mRNA为底物进行RT-PCR，获得目的基因的cDNA；
（3）将cDNA固定在硝酸纤维素（nitrocellulose）或尼龙（nylon）膜上，作为杂交探针之用；
（4）将余下的RNA与上述cDNA混合、温育，然后进行非特异性的洗脱，即通过控制洗脱反应的条件，将那些不与cDNA发生特异性杂交的RNA分子洗脱掉；
（5）转变洗脱条件，进行特异性的洗脱；如果有mRNA分子与cDNA发生特异性的结合，则此mRNA将在这一步骤中被洗脱下来，并且此mRNA就是目的基因的转录产物；
（6）收集洗脱产物，加入到无细胞翻译系统中，通过蛋白质电泳和放射自显影（autoradiography）检测表达产物。
显而易见，由于使用了无细胞翻译系统，去除了大量的、与检测实验无关的mRNA分子，所以HRT的实验结果只有两个：
（1）只有一条放射性条带，即目的基因的最终表达产物。此结果表明：目的基因与载体成功连接并转化、能够在宿主菌中顺利表达；
（2）没有任何放射信号，检测结果为空背景。此结果表明：目的基因可能与载体成功地连接并转化，但不能顺利地表达。
而对于HART而言，该方法中只有一点与HRT不同：在HRT中，最终要对目的基因的表达产物进行检测；而在HART中，则是要对目的基因表达产物之外的蛋白质进行检测，具体步骤为：
（1）将连接后的重组子加入到无细胞翻译系统中，进行转录、表达，提取mRNA；
（2）从提取的RNA中取出一部分，以目的基因为模板设计引物、以RNA为底物进行RT-PCR，获得目的基因的cDNA；
（3）余下的RNA再分成两部分，其中一部分与上述cDNA探针杂交，进行非特异性的洗脱生物论文，并将洗脱产物回收，而弃去与cDNA探针发生特异性杂交的mRNA。换言之，洗脱产物中已经特异性地去除了由目的基因转录的mRNA。将洗脱产物加入到无细胞翻译系统中进行表达，用蛋白质电泳和放射自显影技术检测其表达结果，记作结果-1；
（4）如（4）中所述，RNA分成两部分之后，一部分用于杂交。与此同时，将另一部分RNA直接加入到无细胞翻译系统中进行表达，用蛋白质电泳和放射自显影技术检测其表达结果，记作结果-2。
（5）结果-1和结果-2进行匹配，分析目的基因的转化情况。
同样，由于使用了无细胞表达系统，被检测的蛋白质种类少，仅限于载体所承载的表达信息，便于分析结果。结果-1和结果-2的比较，可以出现两种情况：
（1）结果-1仅仅比结果-2多一个条带，说明此条带就是目的基因的翻译产物，则可以推断转化实验是成功的；
（2）结果-1和结果-2完全相同，则至少说明目的基因不能顺利表达，转化实验不成功中国知网论文数据库。
以上是对HRT和HART总体技术思想的阐述。不难看出，HRT和HART的核心思想是完全相同的，不同的只是实现这一思想的具体方式[2]。在HRT中，是直接对目的基因的表达产物进行检测；而在HART中，则是对目的基因表达产物之外的蛋白质进行检测。图-1概括了两种方法的流程。从图中可以看出，HRT和HART的结果是互补的、互为“阳性”和“阴性”的。
4. 使用HRT和HART方法的相关问题
HRT和HART技术是在蛋白质水平检测重组子阳性克隆的方法，由于这两种技术的检测对象是目的基因的最终表达产物，故比起常见的蓝白筛选、PCR等基因水平检测技术而言，更直观、更严谨、更有说服力[1]。但是，从基因工程整体操作流程上看，对于重组子的检测只是其中的一部分，研究人员不可能将最主要的精力投入到检测工作中。而从上述对于HRT和HART操作步骤的介绍来看，作为检测手段生物论文，两种方法都过于繁琐，特别是频繁涉及对mRNA的操作，要特别注意对mRNA降解的预防，实验条件比较严格。
另外，虽然HRT和HART检测的是表达产物，在这一点上确实比蓝白筛选、PCR等基因水平检测技术更具有优越性，但是，在实际的工作中，研究人员完全可以利用Southern杂交、Northern杂交以及Western杂交等分子杂交手段，在基因工程操作的最后一步——重组子的表达阶段对蛋白质产物进行专门的检测。而在实际工作中，配合蓝白筛选、PCR等方法来使用，HRT和HART技术使检测结果更加可信，达到一种“锦上添花”的效果。随着技术的不断完善，近来又在DNA水平检测方法上有了新的突破-HCII第二代杂交检测方法的问世，无疑是对杂交检测方法的灵敏度的改善【4】。除此之外，检测基因表达产物的方法还有cDNA微距阵杂交技术【5】，磁珠捕获技术【6】，，多重核酸扩增荧光技术【7】，应用反向斑点杂交技术【8】等。
参考文献：
[1]邱泽生主编.基因工程.北京：首都师范大学出版社，1993，125-128；
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[3]吴乃虎编著.基因工程原理.第2版.北京：科学出版社，2001，382-384；
[4]王秋伟,虞斌,许培箴.HPV DNA HCII检测在宫颈病变筛查中的应用. 山东医药,2009,44-45
[5]胡吉,王宣春,沈烨.采用cDNA 微阵列杂交技术对垂体瘤基因表达谱的研究.复旦学报，2005，565-569
[6]王卉放,许化溪.磁珠捕获技术在定量液相杂交中的应用.江苏大学学报（医学版）2003,285-288
[7]李晴,乌兰娜等.多重核酸扩增荧光检测技术在宫颈癌筛查中的效果评价.中国肿瘤，2009，315-318
[8]胡军勇,金卉等.应用反向斑点杂交技术从转录序列的选择性捕获中筛选副猪嗜血杆菌表达差异基因.农业生物技术学报，2009，189-194
量子点（QDs）是一种半径小于或接近于激子波尔半径的新型半导体纳米材料，由第二副族和第六主族元素组成的QDs,具有比传统染料更为优越的磷光性质，如磷光强而且稳定，激发光谱宽且连续分布，发射光谱窄，且几乎对称等。
微囊藻毒素是藻类分泌的一种次级代谢产物，具有水溶性和耐热性，易于溶于水，甲醇或丙酮等特性，而其中最常见，毒性最高的为MC-LR。水体中MC-LR的检测问题日益受到人们关注。
利用量子点的优点，研发一种更简单快捷的新型检测藻毒素的方法，使现有的标记检测技术在环境中适应更广，也将进一步扩大量子点在分析化学和分析领域的应用范围。
本课题制备的QDs-MC-LR抗体，利用其作磷光特异性识别微囊藻毒素。提供一种操作简单、检测速度快、高选择性、检出限低的检测方法，提高了对水体中藻毒素的检测技术研究。本研究结果可被广泛应用于检测方面。
2、已了解的本课题国内外研究现状
近年来，国际权威刊物如《Science》.《Nature》等均在不断报道QDs在生物医药领域中应用的重大研究成果。然而QDs在环境分析中应用报道较少。而且目前对水体中藻毒素的检测技术研究还比较落后，大多数藻毒素使用价格昂贵，体积庞大的HPLC-MC或GC-MS检测，样品制备过程负责，耗时长，需要专业技术人员操作，检测费用很高，因此限制了常规检测次数。
3.本课题的研究内容
本课题以利用相界面热辅助法成功的合成了水溶性的ZnSe:Mn/ZnS核壳式磷光量子点，并通过TEM,THEM等检测手段对ZnSe:Mn/ZnS核壳式量子点进行表征。并将水溶性的QDs与MC-LR抗体在EDC的活化下共价连接，获得QDs-MC-LR抗体
本论文的研究思路主要包括以下六个方面：
（1）测得ZnSe:Mn/ZnS量子点的磷光光谱，采用345nm激发波长，进行试验。
（2）测定ZnS壳层数对量子点磷光强度的影响。
（3）测定量子点浓度，反应时间，加入抗体的量等条件对QDs-MC-LR抗体磷光强度的影响。
（4）通过制得的探针对MC-LR进行检测，探究检测范围及磷光强度与MC-LR浓度的关系。
（5）对实际样品进行测试，探究实际运用的效果。
（6）与不同检测方法进行对比，比较本实验方法的优缺点。
4.本课题研究的实施方案、进度安排
实施方案：
1、QDs-MC-LR抗体的制备
2、表征手段
（1）磷光光谱仪
（2）TEM和HTEM
3、测定QDs-MC-LR抗体检测MC-LR的灵敏度
(1)优化QDs-MC-LR抗体制备条件
(2)实验环境检测MC-LR
4、实际样品的检测
进度安排：
(1) 2017年10月-2017年11月 查阅相关文献资料。
(2) 2017年11月-2018年1月 按照实验方案进行探针制备试验。
(3) 2018年2月-2018年3月 对实际检测进行相关测试。
(4) 2018年4月-2018年5月 整理数据，编写毕业论文。
5.已查阅的主要参考文献
[1] Alivisatos A.P,Gu W.W.,Larabell C .J.,Annu Rev Biomed Eng,2005,7(1):8
[2] Goldman E.R.,Clapp A.R.,Anderson G.P.,et al.,J.Anal. Chem,2004,76(3):684.
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关键词：食品安全；检测技术；研究现状；发展前景
前言
食品是人类生存发展的根本，食品的安全关系甚大。对于食品的解释就是把食品按照其用途和特性进行制作保证食用不会损害到食用者的健康。但是现在食品安全已经成为人们的隐患了，越来越多的不健康食品在侵害人们的身体健康。
食品检测技术在人民生活中应用的范围越来越广泛，而且也是现状科技研究中的热点。食品检测技术既包括食品材料的检测也有各种食品添加剂的检测。食品的种类非常的多，这也为食品安全检测提高了难度。
一、关于食品安全检测技术的研究现状
1.检测食品的设备不够先进，不能够完全满足食品检测的需求
食品的复杂多样性对于食品的安全检测室个难题，而食品安全检测设备需要有更高的技术才可以。也是因为资金的问题，不能对检测食品安全的设备做到经常更新，这就导致了在检测食品安全上的不到位，在经济与技术都飞速发展的时代，既为人民生活带来了便利，也留下了许多弊端，在利益的驱使下，一些不法食品商违背国家关于食品的规定而制造不健康食品，最常见的方式就是加入不被法律所允许的食品调味剂，一些调味剂的成分需要先进的设备才能够检测出来。而检测设备的落后造成无法有效的检测出食品中的不健康成分，这也是我国食品安全检测方面的主要弊端。
2.食品安全检测技术不够全面
现在的科学技术发展的很快，虽然对于食品安全的检测有很大程度的提高，但是一些不法食品商也利用先进技术来制造不健康的食品，这就需要检测技术比造假技术更高一筹才可以。我国的食品安全检测机构在检测食品安全上使用的技术还比较落后，在自身落后的情况下没有及时的从外引进先进技术，专业导致我国的食品安全检测方面比较薄弱。虽然食品检测室现在社会普遍关注的热点，但是国家还不是足够重视，对于技术没有积极引进。现在的检测技术只能进行简单的食品检测，对于需要新技术；才能检测出来不健康成分的食品很难检测出食品的危害性。现在的食品现状令人堪忧，国民的食品健康没有保障。
2.对于检测技术掌握的不熟练，用法不正确
专业人士的缺少是我国现在企业机构普遍面临的现状，而在食品安全检测上因为专业人员的专业素质不够导致食品检测结果不准确也是常用的事情。导致专业人才缺失的原因一个是国家对食品安全检测不够重视在人才选拔与培养上没有加大力度，在一个就是检测环境的制约导致对技术掌握的不熟练。一些检测人员对于设备的使用不是很明确就轻易造作很容易早晨检测结果的不真实，也会造成很大的影响。在工作中需要的不仅是专业知识更需要认真对待工作的态度，在食品安全检测中要足够灵活，根据食品的特点而进行相应的技术检测。
二、常用的食品安全检测技术
在食品安全检测中根据食品的特性、种类的不同，需要专门的技术进行检测。下文分析了一些常用的食品安全检测技术：
1.色谱技术
色谱技术是在食品安全检测中比较常用的一种技术。色谱技术对食品安全进行检测室利用的是物理化学分离的方法，利用一些外在条件把不同物质进行分离开来。不同物质的分配系数不同，利用一些物理手段溶解、挥发、吸收等处理不同物质组成的混合体，从而把物质进行分离。现在色谱技术已经发展的非常成熟了，拥有检测灵敏度高、操作简单、样品用量少等优点，被广泛的应用在食品安全检测上。
1.1气相色谱法
气相色谱法对于检测食品中含有的农药残留成分有很好的作用，对于一些未知的成分也能够分析出未知成分的相对分子含量，对于计算未知成分的化学式了解其化学结构和物理特性有很大的帮助。
1.2液相色谱法
液相色谱法与气相色谱法相比在于对检测成分的处理上一个呈现气态一个呈现液态。液相色谱法一般被用于测量高沸点、热稳定性差的化合物，而且也适用于多组分析，对于成分复杂的物质多用这种方法进行检测。
2.免疫学技术
免疫学是研究抗原和抗体的一门学科，利用免疫学技术检测食品不用对食品的细菌进行分离直接就可以与需要检测的细菌产生反应，很是方便。但是因为抗原与抗体会产生不同的反应，这也导致免疫学方法的多样性，但是在食品安全检测中最常用的免疫学技术是免疫磁珠分离法。
免疫法检测食品安全精确度很高，可以轻易的分析出食品中含有的某种细菌，而抗原与抗体反应时间短，检测过程就比较短。利用免疫法检测出来的细菌可以进行分离并采集，对采集后的细菌进行特性分析，可以有效的防止细菌危害人们的身体健康。
3.对于残留农药的检测技术
用于制作食品的原材料在农业种植中很多都是喷洒了过量的农药，这些农药残留在农作物上，农作物被加工成食品，食品被人食用就会影响人的人身安全。有很多的技术是专为了检测食品的残留农药而科研出来的，例如电子俘获检测器、火焰光度检测器、荧光检测器等。
4.生物检测技术
生物检测技术今年来在食品安全检测中应用很广泛，是一种新兴的技术。食品的制作原材料大多都来自于自然界属于生物的范畴，所以可以利用生物本身的特性而进行区分。
食品中含有的化学物质会与它相关的生物材料产生反应，这是生物检测技术的原理。利用生物监测技术可以快速的精确的判定结果，有很强的特异性识别功能。现在在食品安全检测所应用的生物检测技术有生物传感器、PCR技术等。三、食品安全检测的发展前景
食品现在已经不仅仅是民生问题，不仅关乎着人们的身体健康，也涉及到国家的政治与经济当中，食品安全现在是全球关注的问题，不健康食品的频繁曝光让人们对食品安全的关注越来越高，如果不能及时解决食品问题，民众可能会对政府失望，采取一些激烈手段来抗议政府的不作为。现在国家政府已经把食品安全上升到与国家安全同样的高度，加大对食品安全检测的深度与打击不法食品商的力度。
科学技术的高速发展为食品安全检测带来了更多先进的技术和检测仪器，但也因为技术的发展而造成现在食品造假更加的隐秘难以被查出。经济全球化的发展也带来了科学技术的引进与流出，食品安全技术也不再是单一模式，现在更加多元化，对食品中的危害成分的辨别更加容易，对于未知物质的鉴定可以分析出其成分和特性。
现在分子生物学领域发展的非常好，这也为食品安全检测提供了很好的技术支持，分子生物学技术的特点是速测化、高技术化和便携化等。生活水平的提高，人们也更加关注食品的质量，所以快速、高校的检测方法是现在食品安全检测技术所需要研究的方向。传统的食品安全检测技术已经不能满足现在社会发展的需要，一些生物学技术也越来越多的应用在食品安全检测上。
总结：
从现在的食品安全检测技术来看，快速检测技术是未来科研的方向，也更能满足民众的需要。生物检测技术在食品安全检测中越来越重视，目前关于生物检测技术也在向多元化方向发展，其中生物芯片技术是生物检测技术中应用在食品安全检测中最常用的一种检测方式。
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关键词：现代食品检测技术；食品质量与安全专业；教学改革
作者简介：李巧玲（1973-），女，河北石家庄人，河北科技大学生物科学与工程学院，副教授；李朝阳（1973-），男，河北石家庄人，河北科技大学理学院，副教授。（河北 石家庄 050018）
基金项目：本文系教育部、财政部第六批高等学校特色专业建设项目（项目编号：TS1Z277）的研究成果。
中图分类号：G642.0 文献标识码：A 文章编号：1007-0079（2012）05-0064-02
食品质量与安全专业于2002年正式被教育部批准为高校本科专业，是一个比较新的专业。“现代食品检测技术”是食品质量与安全专业一门技术性和应用性很强的专业必修课程。它主要由食品分析和仪器分析两大部分组成。它最突出的特点是依靠高新技术和设备，按照国家标准、行业标准、地方标准等技术标准，对食品原料、辅助材料、半成品以及成品的质量进行检验，以保证生产质量优良的产品；同时，帮助生产部门开发新的食品资源，试制新的优质产品，改革生产工艺，改进产品包装和贮运技术等。因此，对于这门课程除了要求学生掌握食品检测中的化学分析与仪器分析的基本原理外，还要求学生在实验课中学会一些大型仪器设备的基本操作技能。鉴于该课程涉及的科学理论体系较多，实践性较强，因此，在整个教学过程中我们注重理论联系实际，对本课程理论和实验教学两方面做了一些探索性的改革，以强化学生的基本能力培养和基本技能训练。
一、理论教学的改革
基础理论知识是学好现代食品检测技术的基础，是毕业生持续发展的基础，也是做好食品检测工作的前提。[1]该课程理论教学信息量相对较大，教学时数（64学时）相对较少。在教学中我们科学安排教学内容，扩充应用知识，充分采用现代化教学手段（主要是用动画和多媒体等教学来增加动感和形象思维）活跃课堂气氛，增大教学信息量，以便于学生在有限的时间内获取更多的知识。
1.针对专业特点选择教学内容
食品质量与安全专业主要是从化学、食品科学、生物学等三方面对学生的知识和基本实践技能进行培养。[2]从河北科技大学该专业学生的就业方向看，毕业后主要从事食品分析、动植物检验检疫以及质量控制等方面的工作。这些工作中所涉及的检测设备以紫外分光光度计、气相色谱仪、高效液相色谱仪、原子吸收分光光度计等大型仪器设备为主。为此，结合专业特点，我们着重讲授了这些相关设备等的原理、基本结构和实验技术方法。对于那些在生产实践中很少应用，并应用昂贵仪器的方法（如现代生物检测技术、电子传感检测技术等），不作为授课的重点。[3]这样就可以使学生把有限的精力投入到重点内容的学习中，为学生今后的就业奠定基础。
2.课堂教学中不断引入新内容，并加强专业英语术语的课堂导入
“现代食品检测技术”是一门实用性很强的学科，其理论内容涉及到许多大型仪器设备的原理及应用等。由于分析技术及相应的仪器设备发展较快，教材内容难以做到及时更新，因此，我们在教学中不拘泥于现有教材，注重不断引入最新内容，将分析技术的最新发展和应用引入教学内容，使学生能及时掌握新的科研发展的动态，拓宽知识面，掌握最新科技信息。让学生更加了解“为什么要学，学了有何用？”这一关键问题，体现本课程的应用性特点，调动学生的学习积极性和学习兴趣。[4]
目前，我国很多大型仪器设备仍然依赖于进口，鉴于大多数设备的操作界面均为英语版，所以，掌握一定的英语术语是必须的。为了让学生掌握大型仪器设备分析和操作方法，我们在课堂教学中重视英语专业术语的自然导入，有意识地引导学生进行有关大型仪器分析设备英文文献的阅读训练，使学生在不知不觉中掌握该设备涉及的英语词汇、术语及相关的一些知识等，从而使教学形式、学生学习内容更多样化，[5]并为后面的实验教学奠定良好的基础。
3.与实际案例相结合，激发学生学习的积极性和主动性
在教学过程中，我们积极引导学生把课堂所学的基本理论知识与当前的社会热点事件有机结合起来，以提高学生的学习兴趣。例如，2005年的苏丹红事件、2008 年的三聚氰胺事件、2011年的“瘦肉精”事件、“毒豆芽”事件等食品安全事件，对我国整个食品行业产生了严重的冲击。我们在讲授“现代食品检测技术”课程时，围绕食品中苏丹红、三聚氰胺、瘦肉精等的危害及相应的检测方法进行相关知识的讲解，从而激发学生的学习兴趣，使他们更加明确学习本课程的目的。
4.丰富教学手段，增强理论教学的直观性和应用
现代食品检测技术涉及的分析仪器较多，并且大多数仪器价格昂贵，制作复杂，仅在少数高等学校和较大的科研单位才能见到。尽管近年来，科学技术的发展使一些仪器设备的体积越来越小型化，价格也越来越便宜，但高等学校中拥有的仪器设备仍然相对比较贫乏。[6]针对这种情况，为了配合教学，充分调动学生的积极性和创造性，我们开发了现代食品检测技术的计算机辅助教学（CAI）课件。对于基本概念、基本理论等用动态循环字幕的方式给出；对于难理解的抽象理论使用动画并加以辅助讲解，力求做到直观、具体，易于接受；对于仪器内部构造、工作原理及流程等采用实物影像资料或解剖图表示，并辅以动画和讲解，能够直观、具体地反映仪器的结构和性能；对于仪器的应用，采用实例分析，并对仪器的应用范围、样品的要求做详细的介绍。教师在课堂上可根据课程进度和内容，进入课件的相应部分，通过该课件中的多媒体信息，最大限度地展示教学内容，给学生耳目一新的感觉，使教学生动、有趣，激发学生学习的积极性和自觉性。另外，在实验教学过程中，由于实验设备不足、实验条件达不到等因素的限制，致使一些实验课开设不了。CAI课件的应用既弥补了这些方面的不足，又开阔了学生的视野。
二、实验教学的改革
“现代食品检测技术”是一门应用学科，它主要由理论教学和实验教学两大部分组成。学生通过基础理论的学习，结合一定数量的实验操作技能的训练和强化，最终能达到借助资料和已掌握的实验技能，从事食品分析检验工作的目的。在当今激烈的市场竞争环境中，大学生的动手能力、实验技能和现场工作能力的培养至关重要。因此，“现代食品检测技术实验”在整个课程中的地位举足轻重，这直接关系到学生能否在有限的时间内掌握更多、更扎实的实验“真功夫”，能否经受住社会这个大“熔炉”的考验等问题。经过近五年的教学实践，我们对实验教学亦进行了一些有益的改革和探索。
1.增加设计综合实验比重，鼓励创新
在以往的实验教学中，通常以“验证型”实验为主。实验操作步骤均由实验指导书给出，学生在实验课上经过一番“验证”后，交上一份实验报告就算完成任务。这种教学方式对学生主动思考问题和解决问题能力的培养非常不利。为有效提高学生的学习兴趣、自主研究能力，我们增加了许多“设计型”实验。在实验课开始前，我们先要全面动员，让学生了解以后实验的大体内容以及实验的整体安排情况，让他们知道哪些实验是“验证型”的，哪些实验是“设计型”的，他们应该在哪些方面提前做准备等。
学生在完成“设计型”实验方案设计时必须查阅资料，了解所测产品的性质，结合有关国家标准和法规等明确所测定的指标和使用的方法。对于运用大型仪器设备的项目，如果改变操作条件，学生应该充分论证并报告管理人员和实验指导教师，在确认无危险无损害的前提下可以探索。例如，在做“食品中酸度的测定”这个实验时，我们让学生自行设计。学生所选取的实验材料各不相同，有的学生要测定醋中的酸，有的学生要测定葡萄酒中的有机酸，还有的同学要测定饮料、乳品中的酸……所用的方法和设备也各不相同，有的学生要用酸度计，有的学生要用高效液相色谱仪，还有的学生想用酸碱滴定的方法等。为了保证实验的顺利进行，这要求实验员和指导老师在学生交上“设计型”实验方案后要立即着手准备。尽管“设计型”实验无形中会增加教师的很多负担，但是这种形式对培养学生的自主精神、创新意识及提高学生综合运用知识的能力有良好的促进作用，为学生综合能力的培养提供了空间和保证。甚至有的同学在完成了自己设计的实验后会有一种成就感，这大大提高了他们学习这门课的兴趣和信心。
2.抓好预习，改革实验报告的书写形式
预习是实验教学中的一个关键环节。[7]我们要求学生在实验前交上预习报告，由教师检查预习报告并计入到最后成绩之中。同时教师在讲解实验重点、关键步骤及注意事项时，通过提问等形式，检查学生对实验实际了解的情况，调动学生做预习报告的积极性，使他们在实验前做到心中有数。实验结束后，由教师检查学生原始数据并签名后，学生才能离开实验室。学生在上交实验报告时，必须附上有相关教师签名的原始记录数据。由于不同学生的原始记录数据不同，这样可有效地杜绝部分学生在课后抄袭他人实验报告的情况。
3.结合最新研究成果，不断更新实验内容
随着社会的发展，一些食品安全事件时有发生。我们在实验教学方面也积极把实验与社会热点事件有机结合起来，及时更新实验讲义。例如，结合“染色馒头”事件、苏丹红事件、三聚氰胺事件等，我们在“现代食品检测技术”的实验教学中安排了“食品中添加剂的测定”、“奶粉中假蛋白的测定”等实验内容。2011年3月，卫生部正式公告，自2011年5月1日起，禁止在面粉生产中添加过氧化苯甲酰、过氧化钙等增白剂。根据这种情况，我们根据国家颁布的检测方法亦及时更新了实验内容，并及时向学生做介绍，为他们零距离走向工作岗位做好充分准备。我们认为适当增加这类实验不仅能够使学生更好地适应食品检验技术发展的需要，而且能让他们更及时了解本学科发展前沿的信息和技术，满足社会的需求。
三、完善理论和实验教学考核
“现代食品检测技术”理论与实验的考核打破了原有的“平时成绩+考试成绩”的模式。理论教学考核主要采用“学习心得论文+平时成绩+笔试成绩”的方法。笔试考试中减少死记硬背的内容，重点考查学生对基本知识的理解和对已学内容的灵活应用能力，其成绩占总成绩的70％；平时成绩通过“考勤+课堂提问+作业完成情况”等进行评定，占总成绩的20％；学习心得论文占总成绩的10％。
实验考核采用“平时成绩+预习报告+实验报告+实验操作考核”相结合的方式。平时成绩占35％，主要从学生在实验过程中的表现等各个角度进行评价，同时加强教师在实验过程中的巡视，以便对学生能达到客观评价。预习报告占15％，主要看学生的预习报告是否完整，对实验中可能发生的问题是否进行了认真的思考。实验报告占20％，从侧面来评价学生分析问题和解决问题的能力。实验操作考核占30％，所考题目由学生抽纸条决定。尽管这部分所占比例不大，但如果学生操作不及格，则实验部分被判定不及格。通过全面考核学生，给他们较客观、公正的成绩，让他们真正掌握实验技能，达到教书育人、提高教学质量的目的。
四、结束语
当前食品安全问题越来越受到人们的关注，社会对食品检测工作的重视前所未有。“现代食品检测技术”在食品科学的研究中是不可缺少的手段。尤其在食品加工、食品安全性评价及新产品的开发等方面起着“眼睛”的作用。它对保证食品质量，监督各部门各企业在食品安全方面严格把关起了重大作用。为了能培养出更多能及时适应今后食品安全检测发展需要的高级专门人才，我们在教学过程中充分运用各种教学方法和手段，不断补充新知识，强化操作技能，不但提高了教学质量，而且提高了学生们学习的积极性和兴趣。
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关键词 酶法快速检测技术；蔬菜；农药残留；原理；问题；对策
中图分类号 TS207.7；TS207.5+3 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）14-0274-01
蔬菜是与人们日常生活密不可分的农产品之一，其质量安全直接关系到人民群众的生命安全和健康。我国政府和有关部门一直高度重视蔬菜安全问题。同时，农药在蔬菜、水果中的残留问题也引起了人们的普遍关注。据初步统计，全国每年发生农药中毒事件逾10万例，死亡3 200人。因此，为了确保广大人民群众的蔬菜食用安全，采取有效的手段对蔬菜质量安全进行监测显得尤为重要。
目前，农药残留检测方法大致q可分为三大类：第1类是生物测定法（bioassay），第2类是化学分析法（chemical analysis），第3类是兼生物及化学的免疫分析法和生化检测法。由于蔬菜、水果类鲜食农产品保存时间相对较短的特点，目前常用的方法是生化检测法中的快速检测技术——酶法。
1 酶法快速检测技术的作用原理以及优缺点
1.1 有机磷农药和氨基甲酸酯农药的作用机理
昆虫神经中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性被有机磷和氨基甲酸酯类农药抑制，使乙酰胆碱积累，影响正常传导，导致昆虫中毒而死。它能与昆虫或人体中的酶（酯酶、胆碱脂酶）分子中的丝氨酸上的羟基牢固地结合，从而强烈地抑制酯酶和胆碱脂酶的活性。以有机磷农药为例，有机磷农药与胆碱酯酶结合，阻碍胆碱酯酶分解乙酰胆碱，导致神经肌接头和体内其他部位乙酰胆碱的过量积聚，神经中毒症状继而发生。
1.2 酶法快速检测农药残留的作用原理与具体应用
从生物化学的角度看，一方面，有机磷农药和氨基甲酸酯农药与乙酰胆碱是竞争性作用于胆碱酯酶，即胆碱酯酶可以与乙酰胆碱结合，催化乙酰胆碱生成乙酰和胆碱；另一方面，若胆碱酯酶与有机磷农药结合，会阻断反应[1-4]。因此，利用胆碱酯酶的催化反应的抑制法，设计一种检测方法，即通过颜色的变化快速检测有机磷农药和氨基甲酸酯农药的残留[1，5]。因此，酶法是利用某种酶受影响的程度反映农产品中农药的残留量。如将乙酰胆碱脂酶（AchE）置于薄层色谱板、纸片或者，当乙酰胆碱脂酶（AchE）与样品混合并提供合适条件时，酶促使底物进行反应，产物本身具有颜色或通过显色剂显色；而若样品中有农药残留时，可抑制酶活性，导致底物不反应而无产物，故不显色。目前利用此原理已开发出相应的各种速测卡和速测仪，如速测仪法（酶抑制分光光度法）、农药速测卡法（酶抑制显色纸片法）[4，6]。
1.3 酶法快速检测技术的优缺点
1.3.1 优点。整个检测过程最多需20 min，简单方便，快捷。
1.3.2 缺点。酶试剂易失活，导致反应不稳定，重复性不好，检测结果误差较大，实际应用中的确认率为60%～70%[1，7-10]。需要对检测人员进行专门培训。
2 使用酶法快速检测技术的常见问题
2.1 空白值偏小
比色时记载的空白3 min前后吸光值差值在0.3～0.8为好，如果空白吸光值低于0.3，主要有2个原因：一是酶活性不够；二是温度太低。
2.2 检测结果中抑制率为负值
酶分解底物，分解物与显色剂结合的过程很快，检测员稍有耽搁或技术不熟练都会产生人为误差，导致抑制率为负值。究其原因主要如下：一是操作人员操作不熟练造成的系统误差；二是检查酶失去活性；三是样品无农药检出。
2.3 假阴性与假阳性
假阳性、假阴性可能会由于反应过程中化学、物理干扰而发生[5-8]。假阴性即表现出无农药残留的假象，而这种假象是由于某些农药对酶抑制作用很小或无作用而导致的。因为酶活性降低或失活，底物不与之反应，从而不能被水解，无法与显色剂结合显色，即为假阳性[1-7]。
2.4 样品吸光值偏高
主要是由于反应中化学、物理的干扰以及样品颜色深，使透过光被额外的吸收或被散色，透光率变小，吸光度表现为数值增大[5]。
3 对策
3.1 定期维护、校准仪器，加强检测人员的技术培训
每年或仪器维修后应进行计量校准，确保仪器稳定性；加强对检测人员的业务知识和检测技能培训，规范试验操作，如：提取液的量取、试剂的添加要准确，比色前后3 min的时间要卡准，以确保证检测结果的准确性[11]。
3.2 规范操作，科学使用、保存酶
该方法检测过程中，所用水建议使用蒸馏水。电子天平在使用前应注意检查水平仪中的水泡是否置于正中，所要称量的物品必须放在称量容器中或称量纸上，千万不能直接把物品放在称量盘上。不能用水冲洗所需检测的蔬菜样品的可食部分，若其沾有泥土或水时，可用干净毛巾擦，再切碎，用四分法称量。样品加入底物后应立即上仪器检测，尽量缩短操作时间，否则空白值变小。严格控制检测环境温、湿度，尤其是温度应控制在20～25 ℃，确保酶的活性。酶的种类、活性、纯度、贮存以及酶的浓度都会对测试结果造
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（上接第274页）
成很大影响[4-5]，应严格控制试剂保存条件。夏季，酶、底物、显色剂易变质失效，应对配制过的溶液分装，即取即用[1，10]。需在0～5 ℃下保存显色剂、底物、解冻后的酶。酶粉必须在冰箱的冷冻层保存，使用时再溶解。解冻后的酶最好在1周内用完，如果当时用不完还需重新冷冻，反复解冻不能超过2次[11-13]。
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