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绪论:在寻找写作灵感吗?爱发表网为您精选了8篇科研汇报材料,愿这些内容能够启迪您的思维,激发您的创作热情,欢迎您的阅读与分享!
科学发展观是发展中国特色社会主义必须坚持和贯彻的重大战略思想,也是人民法院工作特别是解决人民法院一系列重要问题的指导方针。深入开展好学习实践科学发展观活动,关键是要坚持“党的事业至上”、“人民的利益至上”、“宪法法律至上”, 把促进社会和谐作为审判工作的最大政绩,使人民法院队伍建设和审判工作更加符合科学发展观的要求。作为审监庭庭长,我要努力在对科学发展观的认识上取得新的突破,在解决群众反映强烈、影响和制约科学发展的突出问题上取得新的进展,在改进司法工作作风上取得新成效。因此在今后工作中,我将从以下几方面做起:
一、加强学习,提高自身素质。深入贯彻学习党的十七大精神,认真深入学习实践科学发展观活动和“大学习、大讨论”活动,提高学习积极性,做到真学、真信、真用。通过学习,澄清模糊认识,确立正确观念,增强大局意识,责任意识和服务意识。同时认真学习最新法律法规和司法理论,及时更新知识和理念,掌握司法改革最新动态,争当知识型、学习型法官,使自己尽快成为工作上的好助手,业务上的好骨干。
二、强化监督,依法履行职责。面对新形势下的机遇与挑战,要进一步强化科学理念,以全新的姿态,全新的面貌,认真履行好岗位职责,形成整体合力,共同推进审监庭各项工作迈上新的台阶。依法审理审监庭的再审案件,进一步强化精品铁案意识,提高办案质量和效率。严格案件的质量监督检查,抓细、抓实。每月对全院收结案情况,审判人员办案数、调撤率、服判率、实际执行率等指标进行动态分析,对卷宗评查、裁判文书考评和庭审情况进行通报,并将监督检查的情况记入法官质量档案及书记员技能档案。通过月评查、月通报、月考核,兑现奖惩,确保案件审理的公开、公平、公正。主动接受人大及其常委会的法律监督和工作监督,主动接受舆论监督和群众监督,切实提高依法办案的水平。
三、以人为本,践行司法为民。坚持“以人为本”,用发展的眼光、从和谐的高度依法审理审判监督案件,积极运用“调解、和解、协调”方式,创新化解矛盾纠纷的方法,不断提高自身审判艺术和驾驭庭审能力及化解矛盾纠纷的能力,为人民群众提供公正、文明、高效、优质的全方位法律服务。首先,要继续贯彻“公正司法,一心为民”的指导方针,始终把维护人民群众合法权益作为促进社会和谐的出发点和落脚点,自觉摆正法官同人民群众和当事人的关系,切实解决人民群众最关心、最直接、最现实的诉讼问题。其次,要牢固树立社会主义法治理念,围绕“公正与效率”主题,以积极向上、奋发有为的精神状态,扎扎实实并富有创造性地做好审判工作,妥善审理涉及民生问题的案件,维护和谐的社会关系。第三,要树立平等保护意识,依法保护当事人的合法权益,促进我县经济的又好又快发展。第四,落实各项便民诉讼措施,建立、完善便民诉讼机制,公开诉讼事项,加强诉讼调解,做好工作,努力提高审判效率及质量。
四、以身作则,发挥表率作用。作为庭长,我要在以下几方面做庭室干警的表率:一是做学习的表率;二是做廉洁的表率;三是做勤政的表率;四是做遵章守纪的表率;五是做团结的表率。使自己成为带头学习的模范,勤奋工作的模范,奉公守法的模范,廉洁自律的模范,端正党风和司法作风的模范。
一、科技政策
县委、县政府先后出台了《关于科技兴县的决定》、《县党政领导科技进步目标责任制实施意见》、《关于增强自主创新能力,加快我县创新体系建设的决定》、《县关于科技创新“六个一”工程的实施意见》、《关于进一步加强人才队伍建设的若干意见》、《县“十二·五”科技发展规划》和《县重点产业科技专项资金管理暂行办法》等一系列科技政策文件。
二、科技投入
2011、2012年县本级科学技术投入分别为4543万元和6558万元,分别占当年县本级财政决算支出的1.2%和1.34%,其中科技型中小企业技术创新基金18项,经费300万元;专利资助资金50.25万元,资助专利项目81个。两年共有119个项目列入国家、省、市级科技计划项目,争取项目资金达3030万元。
三、科技创新
两年来,全县新增高新技术企业6家,经重新认定的高新技术企业共15家;科技企业孵化器和创业园3家。全县申请专利677件,其中发明专利232件;专利授权数448件,其中发明专利79件。同时,科技进步示范县规划建设、国家农业科技园区规划建设、国家粮食丰产工程、科技富民强县专项行动计划续建项目和科技特派员工作也在有序实施和推进。
四、科技平台
到2012年,全县独立科研技术开发机构有5家;省级以上工程技术(研究)中心达9家,其中:国家级3家,省级6家;省级科技创新团队1家;经济技术开发区成功晋级为国家级经济技术开发区,园区内省级特色产业基地达3个,分别为汽车及零部件产业、食品饮料产业和生物医药产业,此外,全省首个千亿建筑科技产业园也在紧张有序的建设。
五、科技机构
在2010年机构改革中,县科学技术局仍保留为独立的科技管理机构,正科级建制,是县政府主管全县科学技术工作的组成部门,挂县知识产权局牌子。2012年县科技局有在职人员14名,其中局长1名,副局长3名,副科级调研员2人,办公室主任1人,科长3人,科员4人,本科以上学历人数占57%。另有市科技(金融)入园工作站、县生产力促进中心、县科技入园工作站等科技服务机构。
一、景东大道工程建设。目前我们正在积极推动土地挂牌出让,筹措资金,为连通陶阳北路支线,使之与朝阳路(东二路)形成循环道路,以拉开城市路网框架,项目部正在积极强抓梨树园(跨皖赣铁路线立交桥口)至小铁路1.5千米道路的建设工作,目前道路下水道等三通一平工作已完成,路面铺设施工正在进行之中。
二、白鹭大桥建设工程。已全面完成,并已经完成各项审计工作。
三、中华北路延伸工程。积极运作资金,推动项目步入良性发展轨道,下大力气做好拆迁工作,坚决按时完成工程建设任务。
四、*洲城市污水处理工程。*洲城市污水处理厂一期项目已经完成,日处理能力4万吨;并抓紧实施二期工程,完成后日处理达8万吨。并采取切实可行措施,加大力度征收污水处理费。
五、人民公园周边改造工程。全面推进公园周边拆迁和安置房的建设工作;茶山安置地三通一平已经完成。并积极配合香港威时集团,打造具有瓷都特色居住小区。
六、景德镇国际陶瓷销售中心建设工程。目前,土地征用工作基本完成;建设工程立项已完成;高压线走廊220、110、35KV线路改造方案初步确定,待政府审批后实施;已完成土石方工程招投标;正在同三闾庙村协商拆迁事宜,力争尽快完成;并着手施工临时排水设施。
七、推进城区路网建设。一是正进一步有计划有步骤的做好对全市各项目部道路交接养护;二是全面完成对中山路、中华路全线改造,总长6409.47米;三是已经完成湖田大桥主体工程建设,现已通车;四是加快对全市240多条里弄的改造,现已完成约总工程量的70%,同时打造2条精品里弄;五是为缓解广场周边车辆拥堵状况,已开工建设广场周边钢架立交桥建设。
八、加强环卫基础设施建设。已基本完成29座旱厕改造工程,并从明年起实施公厕免费开放;添置900个果壳箱,正抓紧筹建方家山垃圾处理场。
我参与的课题是《农村留守儿童教育现状及对策研究》,下面我从研究的过程、取得的成效、存在的困惑等方面做简要汇报。
一、课题研究的过程
本课题研究是分三个阶段进行。
第一阶段(2017年4月~2017年8月),准备阶段。
首先,我们在4月2日组织全体教师认真学习了国家、省市等有关关于做好农村留守儿童工作的文件,强化教师责任。提高认识,更新观念,统一思想,形成共识。
4月11日,我们选取了6名有志于做课题研究的老师成立课题组,明确分工和职责,并着手对全校留守儿童进行调查登记,建立了各班级共63名留守儿童个人档案。并对他们进行深入了解。
5月16日,我们召开了课题组成员会议,各人汇报所了解的各班级留守儿童行为品性、学习能力、生活习惯、心理健康等教育现状,确立实验内容,制定实验研究方案。
5月23日,我们根据研究方案,进一步制定了学习制度、帮扶制度、考核与奖惩制度等相应的保障制度。
第二阶段(2017年9月—2017年8月),研究阶段。
收到立项通知书后,我们立刻与9月19日进行了传达,并集体学习了有关问题学生教育的理论。
为进一步了解留守儿童的行为品性、学习能力、生活习惯、心理健康等现状及影响的主要因素,课题组参考了有关资料于10月19日编制了问卷。问卷分为四个大部分,分别是,留守儿童的生活状况、心理状况、学习状况、教育状况。每项都设计了很多问题。问卷设计好后又请学校其他教师对问卷内容进行补充和完善。
10月24日,课题组成员对各班级留守儿童进行问卷调查,并利用期中考试后,学校开家长会的时机与留守儿童学生家长或者监护人进行座谈,进行随机抽样调查。
11月7日,我们对调查结果进行了统计分析,深入了解留守儿童行为品性(包括思想状态、行为习惯、言行举止)、学习能力(包括学习态度、学习方法、学习习惯、学习目的等)、生活习惯(包括饮食健康、自理能力、卫生习惯、安全保障等)、心理健康(包括性格情感、自我认识、社会适应性等),经过认真分析,写出了调查报告,初步总结出留守儿童教育现状及转变的方法。
接着又拟定测试卷,对留守儿童进行品学综合测试,各班抽取2~3名得分较低的学生(智力正常)作为问题学生个案,并建立个案档案,收集他们的评价材料(班主任、科任教师、家长、监护人、同学的评价)、实物材料、档案材料。找出问题留守儿童的教育问题,分析导致这种现状的各种因素:主观因素(学生自己的智力、行为、习惯因素等)、客观因素(家长因素、监护人因素、社会因素、教师因素、学生之间影响等)。然后我们讨论商量对策:
主要有1.建好留守儿童之家,(一方面在学校中,我们还联系有条件的村委会,例如西平村建立了留守儿童之家)开通亲情电话、亲情QQ,使留守儿童在课余有一个文化娱乐、交流感情的休闲场所。
2.开展主题班会、走进留守儿童之家等活动,全面了解留守儿童现状,不断发现新的情况,贴近学生,走近学生。边实验边研究,让留守儿童学得安心,生活开心,家长放心。
3.根据留守儿童现状,分类指导,区别对待,在活动中受启发,在交流中受教育,在相处中求愉悦,从个性中找共同点,从共性中找差异。探索出留守儿童教育的新方法,新措施。
经过一段时间的活动开展,我们总结出要搞好留守儿童的教育,重点做好了以下四个方面的工作
一是,构建了对留守儿童做到“四掌握”“四管理”,“当好五员”的教师管理办法。
二是,搭建起了对留守儿童“三多”“三沟通”班级管理平台。
三是,建成了对留守儿童学生“五个一”活动的学校管理机制。
四是,筑起对留守儿童学生“十个一项目”的系统管理工程。
第三阶段(2018年9月—2018年4月),总结阶段。
1.收集汇编研究资料;对课题研究的整体情况做细致的分析、总结,整理有关调查数据及材料,总结活动中的经验、教训,撰写研究报告,总结出留守儿童的教育方案。
2.积极组织论文投稿;
3.完成结题报告;
4.课题结题鉴定。
下面说说课题研究成效:
1.学校办学层次得到提升。促进了教师走向专业化,构建了平等合作、互相尊重的师生关系,促进了学生的全面发展。在课题研究过程中我校有1人次被评为市级教学能手,5人次被评为县级教学能手,1人次获得市级教学工作先进个人,3人次获得县级教学工作先进个人,1人次获得市级优秀教师,2人次获得县级优秀教师,2人次在市级以上刊物,12人次学生作品在市级以上交流或获奖。
2.学生成长得到了保障。挽救一些心灵受到伤害、扭曲的留守儿童,促进了留守儿童的健康成长。性格孤僻的变得开朗了;成绩平平的变得优秀了;脾气浮躁的变得稳重了。
3.家庭和谐得到维护。拯救了几个濒临破碎的家庭,促进了社会的稳定,有助于建设平安校园,和谐社会。
4.社会稳定得到加强。对减少青少年犯罪、社会安定有积极的意义。同时也积累一些“留守儿童”的教育的经验,为未成年人的研究提供一些素材、案例。
下面说说困惑或者希望
[关键词]羟基磷灰石;壳聚糖;细胞相容性;人骨髓间充质干细胞
[中图分类号]Q813.1[文献标识码]A[文章编号]1008-6455(2008)06-0855-04
Cellular biocompatibility of nature hydroxyaptite/chitosan composite
TANG Xiao-jun1,GUI Lai1,LV Xiao-ying2
(1.Department of Cranio-maxillofacial Surgery, Plastic Surgery Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College,Beijing 100144,China. 2. State Key Laboratory of Bioelectronics, School of Biological Science and Medical Engineering, Southeast University, Nanjing 210096,Jiangsu, China)
Abstract: Objective To investigate the cellular biocompatibility of nature Hydroxyaptite/ Chitosan composite(NHC).MethodsThe composite was cocultured with osteoblasts derived from human bone marrow stem cells. The cellular biocompatibility was studied by means of the evaluation of proliferation capacity, alkaline phosphatase staining and scanning electron microscope observation.ResultsExcellent adherence and growth of osteoblasts were observed on the composite surface. There were no significant differences in both cell proliferation capacity and alkaline phosphatase staining between the experiment and control groups. SEM observation showed normal growth of osteoblasts and extracellular matrix generation in 24 hours. ConclusionNHC had good biocompatibility with the osteoblasts in vitro.
Key words:hydroxyaptite;chitosan;cellular biocompatibility;human bone marrow stem cells
天然羟基磷灰石/壳聚糖复合材料是由猪骨提取的羟基磷灰石和壳聚糖交联法获得的(该材料合成方法已获得国家专利)[1]。其抗压强度达到人椎骨水平。理论上本复合材料拥有羟基磷灰石良好生物相容性,引导骨形成,骨融合特性和壳聚糖的体内降解吸收,抗菌抗癌和良好的骨整合等特殊的医用生物学特性[2]。作为一种新复合成的材料,我们需要对其进行生物相容性评定。该材料骨内植入的扫描电镜情况已经发表[3]。本文主要是评价该材料在体外的细胞相容性。
1材料和方法
1.1实验试剂和仪器:1∶50肝素抗凝的正常成人骨髓采自整形医院临床患者,经患者知情同意。患者无感染、血液系统、免疫系统疾病等系统性疾患。Percoll(Amershan-Pharmacia公司),低糖型DMEM培养基(Gibco BRL公司),胎 牛 血 清(天津川叶生物公司),青、链 霉 素(华北制药股份有限公司),胰酶(Amershan-Pharmacia公司),二氧化碳培养箱(FORMA 3111型美国),离心机(KUBOTA2100日本),倒置相差显微镜(LEICA DM IRB 德国),JSM-T300扫描电镜,超净工作台YJ-875型(北京昌平净化设备厂 国产),碱性磷酸酶试剂盒(北京中山生物公司产品),骨钙素RT-PCR引物(赛百盛公司),AMV反转录试剂盒(promega),酶联仪(TECAN SUNRISE日本)。
1.2人骨髓间充质干细胞的分离及培养:正常人1∶50肝素抗凝骨髓5ml,用含10%FBS的L-DMEM 1∶5稀释离心1200 rpm 5min,去掉脂肪层,重悬细胞。用1.073g/mlPercoll分离,将密度为1.073g/ml Percoll先置于试管的底部,然后按照1∶1的比例缓慢滴加稀释后的骨髓,离心 2500 rpm 30min,收集位于界面层的单个核细胞。用L-DMEM洗涤两次,重新悬浮于含10% FBS的L-DMEM培养基中,接种于25cm2培养瓶内,密度为2.0×105/cm2,置于37℃,含 5%CO2的培养箱内孵育。48h后除去非贴壁细胞,更换新鲜培养液。之后每3至4天换一次液。待贴壁细胞生长至90%汇合时,用0.25%胰蛋白酶消化,按1∶1比例传代,第2代以后的细胞按1∶2或1∶3的比例传代培养。
1.3人骨髓间充质干细胞的鉴定
1.3.1 MTT比色实验测定细胞生长曲线:用0.25%胰蛋白酶消化单层培养细胞,用含10% FBS的L-DMEM配制成细胞悬液,以每孔1.5×104个的细胞密度接种于96孔板中,每孔体积200μl。将培养板移入CO2培养箱中,在37℃、5% CO2和饱和湿度条件下培养。分别于1、2、4、6、8、10和12天各取出三孔,每孔加入MTT 20μl,37℃孵育4h,中止培养,弃上清,每孔加150μl二甲基亚砜(DMSO),震荡10min,使结晶物充分溶解,选择490nm波长,在酶联仪上测定各孔光吸收值(optical density value OD)。
1.3.2人骨髓间充质干细胞向成骨细胞的诱导分化能力的鉴定。
1.3.2.1 MSC向成骨诱导:取体外扩增的第3代MSCs,以3.0×103/cm2的浓度接种于放置有无菌处理的盖玻片的六孔板中,每孔内加2ml含10% FBS的L-DMEM培养液。当细胞贴壁生长达到60%~70%汇合时,加入骨诱导剂100nM Dex、0.25mM AsA和 10mMβ-GP,进行诱导培养。对照组只加培养基。在第4、8、12和16天分别观察各孔中细胞的形态学和组织化学变化情况。
1.3.2.2 碱性磷酸酶活性测定:按碱性磷酸酶试剂盒说明进行操作。取进行诱导后的MSCs的上清液进行测定,分别取4、8、12和16天 4个时间点测定。
1.3.2.3 RT-PCR分析骨钙素mRNA:人MSC在对照组和含诱导剂培养基中分别培养7天和14天。消化后收集细胞,采用QIAGEN公司的RNeasy mini column 试剂盒提取总RNA。提取后的RNA标本经测定OD 260/280 测定比值为2.0~2.1。取1μg总RNA采用mRNA Selective PCR试剂盒进行RT-PCR反应,方法按使用说明书进行。45℃ 30min反转录,各取10μl的cDNA作为模板进行PCR反应,反应条件为:94℃30s,58℃30s,72℃1min,35个循环,72℃延伸10min。产物在1%琼脂糖凝胶上电泳。
1.3.3 人骨髓间充质干细胞向脂肪细胞的诱导分化能力的鉴定:将hMSC接种于24孔板中,每孔细胞数为4×104个。24h后添加脂肪细胞诱导液,为高糖DMEM,内含10%FBS、0.5mmol/L异丁基-甲基黄嘌呤、0.2mmol/L吲哚美辛、10-3mmol/L地塞米松、10mg/ml胰岛素。诱导2周,每周换液2次。2周后弃去培养基,PBS洗涤3次,10%福尔马林固定,油红O染色。
1.4 天然羟基磷灰石/壳聚糖复合材料复合细胞培养:将支架材料制成厚0.2cm,直径1cm的圆片状,双蒸水清洗,室温下自然干燥24h,纸塑包装密封,环氧乙烷消毒。
1.4.1人骨髓间充质干细胞(hMSCs)在天然羟基磷灰石/壳聚糖复合支架材料上的贴附实验:无菌条件下在超净台上将消毒的材料圆片放入24孔板,将体外扩增的hMSC经过消化离心,得到细胞悬液,按细胞密度2×l06/cm2均匀接种在材料上。加入含有10%胎牛血清的低糖DMEM培养基,置入细胞培养箱内培养4~6h。
1.4.2 MTT法分析hMSCs与天然羟基磷灰石/壳聚糖复合支架材料复合培养的成活率和增殖能力:将传至第3代的细胞以1×104/ml接种于96孔培养板, 每孔加入培养基200μl,37℃, 5%CO2培养箱中培养, 分别于第2、4、6及8天,每孔加入MTT20μl,继续培养4h,吸出培养液后,加入DMSO液(150μl/孔),室温下于微孔板振荡嚣上振荡10min,使结晶物溶解,在酶标仪上检测各孔的A值(选择波长570nm)。统计学方法对所测数据进行方差统计分析。
1.4.3碱性磷酸酶(ALP)活性测定:将支架材料3块置于六孔培养板,并设3孔为不加材料的空白对照组。将hMSCs以1×105/孔接种于预湿材料上,在条件培养基下(含抗坏血酸、地塞米松和甘油磷酸钠)培养3周后,收集细胞,采用磷酸苯二钠法测定样品ALP活性。
1.4.4扫描电镜观察:hMSCs-支架材料复合体标本取出后用2%戊二醛固定,系列丙酮中脱水,乙酸异戊酯置换,临界点干燥,表面喷金,用JSM-T300扫描电镜观察细胞与材料贴附和基质分泌及生长情况。
2结果
2.1采用密度梯度离心法成功分离获得了MSCs。用密度为1.073g/ml的Percoll对骨髓进行密度梯度离心,经过2,500rpm 30min离心后,分离得到了富含MSC的单个核细胞,将其接种于含10%经过筛选的FBS的培养基中,细胞于48h后贴壁,72h后出现纺锤状细胞(图1),6~12天细胞生长迅速,贴壁的MSCs平均约12天后形成克隆(图2),两周左右细胞近80%~90%汇合,出现致密的贴壁层(图3)。
2.2 MSC的生长曲线(图4)
2.3 MSCs向成骨细胞诱导分化
2.3.1 MSCs向成骨细胞诱导分化过程中的形态学变化:本实验采用包含有100nM Dex、0.25mM AsA和10mMβ-GP的骨诱导液进行MSCs向成骨细胞定向分化的实验研究。应用Von Kossa 染色和X光衍射等方法对诱导后的细胞表型进行检测和鉴定。在16天的诱导过程中,细胞形态发生明显的变化,与对照组有显著差别。在进行骨诱导第2天时,细胞形态发生改变,第4天更为明显,大约30%~40%的MSCs由纺锤状变为立方型;第8天时,实验组大约80%以上的MSCs成为立方形或多角形,细胞基质中出现钙化斑;第12天时,实验组培养皿中广泛均一地形成骨样物质,矿化物形成明显,并且开始形成多层小结结构;第16天时,成骨诱导组细胞基质形成广泛的矿化,并形成钙化结节(图5)。而对照组细胞形态仍然是纺锤状。
2.3.2 RT-PCR分析骨钙素mRNA:RT-PCR分析,在7天、14天时诱导组中骨钙素的表达明显增高(图6)。
2.4 MSCs向脂肪细胞诱导分化:原代培养的MSC呈集落样增殖,细胞呈长梭形或长三角形,类似成纤维细胞。传代细胞第3~5代形态逐渐趋于均一的长梭形,核位于中央,细胞分布均匀。诱导36~48h后,光镜下可见部分细胞沿胞膜下出现环形细颗粒层,折光性较强,细胞核仍位于中央,以后颗粒逐渐增多,并向细胞中央、核周围逼近,颗粒逐渐变大;细胞仍呈长梭形,但胞体变大和变宽,细胞两极变短(图7),油红O染色证实这些颗粒为中性脂肪颗粒。2~6天后,颗粒细胞明显增多,分化较早的细胞,在细颗粒增多的同时,颗粒逐渐融合成光镜下可见的小圆形脂滴,晶莹透亮,整个细胞内从胞膜到细胞核之间充满大小较均一的脂滴,呈葡萄串状(图8),胞体明显变大,并趋于椭圆形。
2.5统计测定
2.5.1 hMSC增殖度测定:随着培养时间的延长,各组细胞数量都有所增加,各组细胞增殖度差异无显著性(P>0.05)。见表1。
2.5.2碱性磷酸酶(ALP)活性:材料组ALP活性为(2.1259±0.1094),空白对照组为(2.1337±0.1101),材料组与对照组之间无显著性差异(P>0.105),说明材料对hMSCs进行成骨细胞诱导未见不利的影响,且对诱导的成骨细胞的ALP活性没有影响。
2.5.3扫描电镜:材料表面在扫描电镜下为微粒状,具有微孔(图9)。培养4h,细胞附着于材料表面,形态多样,呈有多个突起的梭形或多角形,细胞间连接松散,细胞跨越微孔表面或向孔内长入(图10)。培养8h后细胞连接成片,可见细胞表层有丝状纤维形成(图11)。培养24h后细胞形成单层结构,细胞紧密,可见到细胞外基质(图12)。
3讨论
细胞相容性是组织工程对支架材料的最基本的要求之一。细胞培养法检测材料细胞相容性是一种快速、简便、重复性好又价廉的方法,在材料生物相容性评价中起着越来越重要的作用。体外材料复合细胞培养进行细胞相容性试验可以排除体内试验的各种复杂因素之间的相互干扰。可以从细胞水平直接观察某一单一因素所致的细胞与生物材料复合生长的情况,可以直接观察细胞对材料的趋化、粘附和细胞在材料表面及内部的生长、增殖和分化。结果较敏感和客观。
3.1细胞相容性试验中的细胞选择:1948年Rosen Bluth等首次报道利用鼠成纤维细胞培养来筛选聚合物,进行细胞毒性试验评价生物材料的生物相容性的研究。目前一般多选用成纤维细胞株(如L-929)作为实验细胞[4]。越来越多学者认为不同组织来源的细胞对材料的敏感性是有差异的[5],应该根据材料植入体内的不同部位及使用目的选择人体不部位或/和组织来源的细胞实验细胞,使体外细胞培养对机体内环境的模拟更趋真实,其结果更为准确与客观。由于我们研究的材料为骨替代材料最终是要被种植到骨组织内,需要长期和骨组织进行生物学接触。因此骨替代材料应选择骨组织来源的细胞才能准确反映材料最终在生物体内的真实状况。比如:成骨细胞,或前体成骨细胞等[6]。
3.2复合材料细胞相容性:材料和细胞相容性有很多的影响因素,比如:金属材料基质能,表面自由能,界面自由能,材料表面的粗糙程度[7],材料表面基团种类和结构, 表面电荷, 材料表面的改性和修饰情况等等因素。Baier[8]等认为材料表面的特性和自由能决定其细胞生物粘附性,他们通过在新西兰白免体内移植几种不同表面能的金属材料发现,低表面能材料粘附的细胞呈现球形或近球形,粘附作用极弱。高表面能材料的表面可以被活体细胞完全覆盖,表面粘附的细胞呈现出扁平、拉长的形态,粘附作用很强。因此高表面能材料的表面更有利于细胞的粘附与铺展。生物材料表面的化学结构,表面基团或改性修饰对细胞的粘附和生长是另一个重要因素。Lee[9]等认为材料表面不同功能基团具有不同的细胞特性,比如羧基、羟基、磺酸基、胺基、亚胺基及酰胺基等基团可促进细胞的粘附和生长。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)肽表面修饰对HA材料的细胞相容性有明显的优化作用[10]。并且在生理状态下,一切脊椎动物细胞表面都带有分布不均匀的负电荷。因此我们认为带正电荷的材料表面与带负电荷的细胞之间的静电吸引作用有利于细胞的粘附。
在本实验中,将复合材料和成骨细胞在体外进行复合培养,通过电镜形态学对材料和细胞复合检查发现细胞在材料表面生长活跃,培养早期细胞散在于材料表面,呈有多个突起的梭形或多角形,细胞间连接松散。随培养时间延长,细胞增殖,连接成单层或生长附着于较大孔隙表面,细胞排列紧密,部分区域有细胞外基质形成。即4h细胞贴附生长,8h连成片状,24h细胞在材料表面形成单层或长入孔隙内,同时有细胞外基质分泌。这说明骨髓基质细胞可以在材料表面贴附生长,并伸入材料之中,可在材料表面及内部伸展和繁殖,保持细胞的梭形形态,并能分泌胶原纤维和钙离子颗粒等细胞外基质。本实验也同时应用MTT法对细胞增殖进行检测,发现与天然羟基磷灰石/壳聚糖复合材料复合培养的骨髓基质细胞其增殖不受影响,表明该材料对骨髓基质细胞的生长分裂无明显的干扰作用。通过ALP测定进一步检测该材料对细胞功能状态的影响,ALP是成骨细胞分化成熟的重要标志,被认为与成骨细胞的分化有密切关系。本实验显示,实验组和对照组ALP活性均有增高,同期比较差异无显著性。说明这种生物材料不仅对骨髓基质细胞的增殖无明显阻滞作用,同时对细胞的功能尤其是对于骨髓基质细胞向成骨细胞转化无明显影响。由上述实验结果可得出该材料具有良好的细胞相容性,无细胞毒性。可以作为骨组织工程研究中种子细胞的生物支架。但是这仅仅是在体外短期试验的结果,该材料在生物体内具体反映如何仍需要进一步的试验论证。
根据前述的影响生物材料细胞相容性的因素分析,考虑本实验材料细胞良好相容性与以下因素有关。天然羟基磷灰石具有较高的结合钙离子的能力,而局部钙离子浓度的增加,可在材料表面形成高密度的正电荷层,有利于成骨细胞的粘附、生长和增殖。壳聚糖是可降解和可吸收的高分子材料,它表面具有较多的化学基团,可通过调节表面的亲水性和本身的生理活性促进细胞的粘附和生长。壳聚糖也是自然界唯一的带正电荷的多糖,可以和带负电荷的细胞相互吸引,有利于细胞粘附。该材料的降解性有利于材料与机体之间的物质交换,材料表面壳聚糖成份的降解更为细胞的伸入提供了位置,对形成早期的骨性结合比较有利。从理论上我们推测本材料可能随着壳聚糖的吸收,成骨细胞长入,骨组织形成逐渐长入、连接并和羟基磷灰石形成骨性愈合,最终实现完全的骨整合。
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[8]Baier RE, Meyer AE, Natiella JR, et al. Surface properties determine bioadhesive outcomes: Methods and results[J]. J Biom Mater Res,1984,18 ( 4):337-355.
[9]Lee JH, Jung HW, Kang IK, et al. Cell behaviour on polymer surfaces with different functional groups[J]. Biomaterials, 1994, 15 (9):705-711.
一、完善科研制度,健全网络,分工负责,责任到人:
本学期学校教科研组进一步完善和落实教科研管理制度:重新学习了教科研例会制度、课题实施定期汇报制度、课题成果总结推广制度、教科研成果评比奖励制度等,真正落实科研兴校,使教育科研向更自觉的理性水平提升。根据学校实际情况建立了四个子课题小组,教科室责任到人,具体负责四个子课题组,并设立了新的课题组长,负责子课题的日常研究工作。
二、注重学习,加强课题的研究力度,完成中期汇报:
各课题组认真学习有关科研工作的学习材料,学习先进的教育理念,继续做好教育科研的常规管理工作,加强课题的研究力度,抓实研究过程,在深入实施过程中做好阶段性成果的汇总工作和资料积累工作。使课题的管理、实施、操作更规范、科学、有效。教师的研究更加主动、自觉、扎实。本学期在各教科组活动的基础上,汇编出《八一小学教科研成果集》,结合教研组团队活动,组织青年教师开展了中期课堂教学汇报课,受到了区教科室领导的肯定。教科室还完成了08年度课题汇报。评选校教科研组及先进个人。
笔者在十余年的科研活动中,陆续指导了近20名高职学生进行科研专题实习,深刻体会到科研专题实习模式有利于学生专业知识的巩固与扩展,有利于学生实践技能的应用与提升,有利于学生独立思考习惯的养成,有利于学生创新思维的培养,有利于学生文字与表达能力的锻炼,有利于学生团队协作能力的提高。因此,笔者更加坚定地认为,科研专题实习模式是药学高职实践教学多元化模式中不可缺少的组成部分。
2高职药学教育实施科研专题实习模式的可行性
当前,在一些高职院校中仍存在着“高职生不同于本科生,无需进行科研活动训练”的观点。表面上看,科研与高职生未来的就业方向与岗位工作不符,实际上是忽略了科研过程对高职生综合能力的培养及对高职生今后职业发展的重要支撑作用。高职生的科研应侧重于“应用型”而不是“学术型”,应注重应用技术或产品的开发而不是理论基础研究。一方面,随着高职教育的深入发展,对“双师型”教师的要求不可能仅停留在拥有几本证书的层面上,而是要求教师能深度融入企业的产品生产、研发等实践活动中,能服务于周边地区社会经济发展。事实上,高职院校中部分教师已经在与企业进行校企合作的实践活动中提高了实践技能,也积累了丰富的科研经验,具有指导学生从事科研活动的能力。此外,高职院校聘请了大批行业、企业中的技术骨干作为兼职教师,其中亦不乏可作为科研专题指导教师的人选。因此,在高职院校中正在不断形成一支具备科研专题实习指导能力的师资队伍。另一方面,无论哪种类型或层次的教育都不能批量地复制或制造人才,而要因人而异、因材施教,科研专题实习模式正是满足这一条件的有效人才培养途径。现实中存在一批迫切想继续深造的高职生,也存在部分对科研具有浓厚兴趣与好奇心的高职生。对于这部分学生,科研专题实习模式将比顶岗实习更具有吸引力,也具有更强的现实意义。
3科研专题实习模式的实施
开展科研专题实习模式的基本出发点是基于对高职生的实践、应用、创新等能力与综合素质的培养。因此,应针对高职生基础相对薄弱、就业岗位偏重实践应用、独立思维能力不足等特点,在专题内容、指导方式、组织实施等方面开展有异于本科院校的专题实习。
3.1师生筛选
师生筛选即对指导教师及学生的筛选。对于指导教师,应由具有中级以上职称或具有研究生及以上学历,并且有在研项目的教师担任;对于学生,则采用自愿报名的原则,以欲参加专升本考试的学生为主,或选择对科研感兴趣、想在该方面有所提高的学生。另外,为了保证高职生科研专题实习的质量,应根据教师科研水平的高低来控制指导学生的数量,如可根据指导教师在研课题数及课题级别高低确定具体的学生数量,原则上一项课题安排一名学生,对研发资金规模较大的课题,允许安排多名学生。
3.2开题
为帮助学生明确研究目标、理清研究思路、预见可能碰到的问题,要求学生在教师的指导下,通过查阅相关文献资料,形成文本材料并在课题组内以PPT的形式汇报。在报告会上,带教教师应针对汇报细节,包括实验设计思路、方法、仪器与试剂的准备以及实验中应注意的操作问题等逐一进行点评。在此过程中,帮助学生发现问题,完善实验设计,使其对即将开始的科研活动更有信心。
3.3指导方式
高职学生第一次进行设计性的实践活动,由于理论知识不够扎实,且缺乏实践经验与技巧,在好奇与兴奋的同时常会遇到各种各样无法预料的问题和困难,挫折感也随之而来。对此,首先应加强指导的频度,切不可“放羊式”带教。笔者的课题组每天第一件事就是由每位学生汇报前一天的实验情况,包括检查实验记录、实验结果的分析、发现实验存在的问题并提出解决方案、安排当天的研究工作内容等。笔者坚持每天现场指导1~2次,晚上及周末则通过电话或QQ的方式与学生联系与沟通,适时解决学生遇到的难题,这样既保证了研究工作的效率,又使学生在与带教教师高频率的接触中不断学习科研思维与技巧,从而提高了科研专题实习的带教质量。其次,要注重开展阶段性的小结汇报,不可“埋头苦干式”带教。笔者将课题组学生分为若干研究小组,要求每间隔两个月左右,各研究小组的学生均应对前一阶段的科研工作进行小结汇报。通过PPT形式进行口头汇报、互相提问、教师点评,同时展示Word文档形式的研究内容小结,师生共同从文字、标点符号、图表、文本排版等方面找出不足。这样既能促进学生及时回顾研究内容和理清研究思路、把握科研进度,同时也增加了师生、生生之间相互交流的机会,互相了解不同课题的研究情况,还能锻炼学生的逻辑思维、语言表述、概括总结能力。最后,应尽可能增加科研训练的途径,如带领学生深入生产一线,使其进一步融入生产企业氛围;利用到外单位进行委托测试或合作研究的机会,将学生派往其他科研机构,使其进一步了解先进的设备,学习先进的技术。
3.4成果汇报
为评价学生进入科研专题实习阶段以来的学习成效,在实习结束时,要求每位学生在带教教师的指导下撰写出完整的科研论文,并由各教研室进行考核与评价。考核优秀的学生参加系部论文答辩,要求学生在10分钟内就课题研究的目的、内容、方法与结果等方面进行阐述。由校内外同行专家组成的答辩委员会对学生的课题意义、研究结果、论文写作、幻灯片制作、表述能力、回答问题的思维等进行综合评判,并按照考核评分标准给出学生相应的评分和评语。
4结语
为进一步加强我校教科研工作的管理,使教科研工作逐步迈向制度化、规范化、科学化的轨道,形成良好的教科研氛围,培养教师教科研意识,激励教师参与科研的兴趣与热情,不断提高教师的专业素养,达到“科研兴教、科研兴校”的目的,同时便于将教师参与教科研工作情况纳入全面工作考核中,依据上级主管部门及学校有关管理制度制订本细则。
一、考核对象:全校正式在岗教职工,
二、考核部门:考核工作由教导处、科研办和教研组具体负责实施。
三、考核总分:考核积分加奖励分。
四、考核内容及办法:
(一)各项材料上交。(10分)
教师按要求及时上交研究材料(教学随笔、业务学习笔记和各种培训笔记心得)等计10分,每缺交一次扣1分,迟交一次0.5分。
(二)业务学习及培训。(20分)
1.业务学习:加强自我研修,丰厚自我积淀。(10分)
(1)学专著:每期至少阅读一本教育教学书籍(包括杂志),摘抄学习笔记不少于3000字并撰写400字以上的学习体会。完成学习笔记和学习体会各得4分、对学习不负责任按1.5、1、0.5扣分;阅读多本教育书籍并完成学习笔记和学习体会者按2、1、0.5加分。
(2)学业务:坚持日常业务学习,摘录理论知识或学科知识,每周不少于300字。完成笔记整洁并无相互抄袭,每次得3分否则不得分,每学期检查2次共6分。
2.业务培训:(10分)
(1)培训的考核主要包括:远程教育培训、外出学习培训和各种校本培训等各级各类学习培训活动。
(2)考核内容主要包括:
考勤(2分):无故缺席一次扣1分,迟到、早退一次各扣0.5分,扣完为止。
培训记录(5分):(包括理论摘记、内容摘要或心得体会等)按要求完成得5分,未完成或明显与培训内容、要求不符每项次扣1分。
培训效果(3分):包括有关测试(如远程教育培训、各种校本培训等)、学习汇报和经验介绍(如外出学习汇报)等,每项次测试不合格扣1分,每缺一次学习汇报扣1分,扣完为止。
(三)常规教研活动(40分)
教师应积极参加本组的常规教研活动,在活动中发表见解,展示自我,提高水平。并作好听、评课记录。各教研组根据常规教研出勤情况、教师听、评课记录和上公开课情况予以考核。
1、教研活动满勤15分,无故缺席一次扣3分,迟到一次扣2分,请事假一次扣1分,病假一次扣0.5分,公假不扣分。
2、教师应积极认真地参与各教研组组织的听课、评课、学习等活动,活动中积极发言,认真笔记。
(1)听课(15分):教师每期听课不得低于15节,听课笔记应该有批注,差听一节扣1分,无批注每节扣0.3分。
(2)教师评课(5分):评课时教师应积极发言,教研组有发言记录。每差一次扣0.3分。