时间:2022-04-19 19:35:35
绪论:在寻找写作灵感吗?爱发表网为您精选了8篇婚假申请书,愿这些内容能够启迪您的思维,激发您的创作热情,欢迎您的阅读与分享!
范文一:
尊敬的公司领导:
本人出生年月为____年____月____日,于____年____月____日登记结婚,现年____岁。按照国家及地方有关婚假的规定,属于____(晚、非晚、)婚 ,可享受____天婚假(包括双休日)。现特向领导请求休婚假,假期自____年____月____日至____年____月____日共计____天。目前的工作已安排交接完毕 ,请领导予以审批。
特此申请
申请人:
X年X月X日
范文二:
尊敬的领导:
由于婚期已近,我和未婚妻的结婚吉日择于20XX年X月X日(农历 正月初六),现特向领导请假,自20XX年X月X日至20XX年X月X日 期间需准备结婚事宜,望领导予以批准。
此致敬礼!
申请人:_________
时间:____年___月___日
范文三:
尊敬的领导:
本人定于2年月日结婚,依据国家有关规定可以享受天婚假,现申请于年月日,至年月日休婚假,特此申请,请予批准!
申请人:
X年X月X日
范文四:
尊敬的公司领导:
我于****年**月**日登记结婚,属于晚婚,根据国家及单位的相关规定,本人可申请**天婚假。现特向领导申请休婚假,自****年**月**日到****年**月**日共计**天,请予以审批。
申请人:
部门领导:
单位领导:
X年X月X日
范文五:
尊敬的公司领导:
本人于XXXX年X月X日登记结婚,并属于晚婚。根据国家有关婚假规定,本人可享受15天婚假。现特向领导请求休婚假,自X月X日到X月X日共计15天,请予以审批。
特此申请
申请人:
X年X月X日
范文六:
尊敬的局领导:
本人于____年____月____日结婚,根据国家有关婚假规定,可享受3天婚假。另外,由于我目前已27岁,属晚婚,可额外享受20天晚婚假。现申请于____年____月____日至____年____月____日(注:共23天)休婚假,特此申请,请予以批准!
申请人:
X年X月X日
附加:2019最新国家法定婚假规定
根据《婚姻法》以及《计划生育条例》的规定,符合法定结婚年龄的初婚公民可享受3天法定婚假;晚婚初婚者可享受15天晚婚假(包含3天法定婚假);二婚者只可享受3天的法定婚假,不能享受晚婚假。下面我们来了解一下2019最新国家法定婚假规定。
国家关于婚假的规定
1、按法定结婚年龄(女20周岁,男22周岁)结婚的,可享受3 天婚假。
2、符合晚婚年龄(女23周岁,男25周岁)的,可享受晚婚假15天(含3天法定婚假)。
3、结婚时男女双方不在一地工作的,可视路程远近,另给予路程假。
4、在探亲假(探父母)期间结婚的,不另给假期。
5、婚假包括公休假和法定假。
6、再婚的可享受法定婚假,不能享受晚婚假。
婚假和路程假期间的工资待遇
在婚假和路程假期间,工资照发,也就是说,带薪休假。如果是在国家机关、国有企业、事业单位工作的,除了享受规定的最多3天的婚假外,晚婚会额外得到7天假期的奖励。如果晚婚者在城镇里居住但是没有工作的,或者是私营企业的老板,一般由居委会或者镇政府给予相应的晚婚奖励。如果晚婚者是私营企业的雇员,老板也应当给他们婚假,假期时间和在国有企业一样。
二婚婚假规定
二婚婚假,符合晚婚年龄(女23周岁,男25周岁)的,可享受晚婚假15天(含3天法定婚假)。
再婚者与初婚者一样,均应享受婚假待遇。根据我国的相关规定,职工享受三天的婚假。对于再婚者的婚假问题,劳动和社会保障部门曾有明确答复,即根据《中华人民共和国婚姻法》和国家有关职工婚假的规定精神,再婚者与初婚者的法律地位相同,用人单位对再婚职工应当参照国家有关规定,给予同初婚职工一样的婚假待遇。
2019年二婚婚假规定如下:
一、享受二婚婚假期间工资待遇:在婚假和路程假期间,工资照发。
二:婚假天数规定:
1、按法定结婚年龄(女20周岁,男22周岁)结婚的,可享受3 天婚假。
2、符合晚婚年龄(女23周岁,男25周岁)的,可享受晚婚假15天(含3天法定婚假)。
3、结婚时男女双方不在一地工作的,可视路程远近,另给予路程假。
4、在探亲假(探父母)期间结婚的,不另给假期。
5、婚假包括公休假和法定假。
正常情况下,婚假最长三天,晚婚的具体婚假时间现在一般依据的是各省或者直辖市根据《中华人民共和国人口与计划生育法》自己规定的,全国各地的规定并不一致。
再婚者与初婚者一样,均应享受婚假待遇。根据我国的相关规定,职工享受三天的婚假。对于再婚者的婚假问题,劳动和社会保障部门曾有明确答复,即根据《中华人民共和国婚姻法》和国家有关职工婚假的规定精神,再婚者与初婚者的法律地位相同,用人单位对再婚职工应当参照国家有关规定,给予同初婚职工一样的婚假待遇。
晚婚晚育奖励
(一)晚婚奖励政策
1、符合晚婚年龄的初婚夫妻,增加婚假一周;双方达到双方享受,一方达到一方享受;晚婚假应当在婚假后连续使用。
2、增加假期期间的工资、奖金照发,其奖金额由享受者所在单位自行规定。但单位在自行规定时,其奖金额不得少于同时期同类人员的平均奖,并且不影响到其他奖金,如季度奖、半年奖、年终奖等。
(二)晚育奖励政策
1、符合晚育年龄的夫妻,女方增加产假15天,男方给予假期3天;享受3天假期的男方必须是初婚者或未生育过孩子的再婚者,必须有女方所在单位出具晚育的证明。
2、女方15天假期应当在规定的产假后连续使用。男方3天假期应当在女方产假期间使用。
3、增加假期期间的工资、奖金照发,其奖金额由享受者所在单位自行规定。但单位在自行规定时,其奖金额不得少于同时期同类人员的平均奖,并且不影响到其他奖金,如季度奖、半年奖、年终奖等。
婚假工资如何计算
不少单位对婚假的时间和婚假的工资支付有自己的土政策,因此不少网民询问,国家和上海市对此是否有统一的规定?
根据法律规定,用人但可以制定本单位的规章制度,但是各个单位的规章制度必须符合国家或地区的法律法规和规章。如果单位的土政策违反现有的法律法规和规章,这个规章制度就是违法的无效的,对职工并没有约束作用。如果单位硬要按土政策办事,由此侵犯了职工的合法权益,职工可以向劳动监察部门投诉举报,并要求单位赔偿损失。
在婚假的问题上,虽然国家对职工的休息、休假有规定,《关于国营企业职工请婚丧假和路程假问题的通知》确定了:职工本人结婚,可以根据具体情况,由本单位行政领导批准,酌情给予一至三天的婚丧假。假期在三个工作日以内的,工资照发。在批准的婚丧假和路程假期间职工的工资照发。途中的车船费等,全部由职工自理。但并未明确规定工资计发的标准。因此在婚假的工资发放标准上,目前还没有适用于全国的统一规定。但是上海市从去年7月1日开始实施的《上海市企业工资支付办法 》对这个问题有一定的规定。
根据《上海市企业工资支付办法》的规定,婚假期间的工资应当按这样的原则确定:
(一)劳动合同有约定的,按不低于劳动合同约定的劳动者本人所在岗位(职位)相对应的工资标准确定。集体合同(工资集体协议)确定的标准高于劳动合同约定标准的,按集体合同(工资集体协议)标准确定。
(二)劳动合同、集体合同均未约定的,可由用人单位与职工代表通过工资集体协商确定,协商结果应签订工资集体协议。
我国现行计划生育政策规定,迟于法定婚龄三年以上结婚的是晚婚,即男性25周岁,女性23周岁即是晚婚。下面小编给大家带来晚婚婚假申请书简易版,更多婚假申请书请点击“婚假申请”查看。
晚婚婚假申请书简易版尊敬的领导:
我于______年______月______日结婚,结婚时年龄______岁,属于晚婚。根据________年______最新婚假规定,本人可享受______天假期。现向领导请求休婚假,自____________年______月______日—______日,恳请领导批准。
特此申请。
此致
敬礼!
申请人:申请书模板
__年__月__日
合同工护士有没有婚假有的,根据《民法典》以及《计划生育条例》的规定,职工结婚可享受以下待遇:
(一)婚假:
1、按法定结婚年龄(女20周岁,男22周岁)结婚的,可享受3天婚假。
2、结婚时男女双方不在一地工作的,可视路程远近,另给予路程假。
3、在探亲假(探父母)期间结婚的,不另给假期。
4、婚假包括公休假和法定假。
5、再婚的可享受法定婚假,不能享受晚婚假。
(二)婚假期间工资待遇:在婚假和路程假期间,工资照发。
根据原国家劳动总局、财政部《关于国营企业职工请婚丧假和路程假问题的规定》的规定,国有企业职工本人结婚时,企业应该根据具体情况,酌情给予1—3天的婚假。如果夫妻双方不在同一地方工作,一方需要去对方所在地点结婚,企业还应该根据实际需要,另外给予职工路程假。在职工休婚假和路程假期间,企业应该照发工资。职工在路途中的车船费等,全部由职工自理。目前国家还没有对非国有企业职工婚假作出具体规定。
婚假包括法定假日吗如果婚假的时间较长,可能会包含法定节假日,但是不会因为法定节假日延长婚假,在法定节假日结婚的,用人单位应当依法支付工资。
根据《劳动法》第五十一条规定,劳动者在法定休假日和婚丧假期间以及依法参加社会活动期间,用人单位应当依法支付工资。
《关于国营企业职工请婚丧假和路程假问题的通知》一、职工本人结婚或职工的直系亲属(父母、配偶和子女)死亡时,可以根据具体情况,由本单位行政领导批准,酌情给予一至三天的婚丧假。
广东婚假国家规定[1980]劳总薪字29号规定:婚丧假1-3天,结婚双方不在一地的另外给予路程假,此文件当时只针对国营企业。通常我们都按最长3天计算。
此外,根据2015年12月30日修订的《广东省人口与计划生育条例》的最新规定,职工结婚不再享受晚婚晚育的奖励。
相关解读:
婚育假期也在《条例》中得到明确。根据《条例》,13天的晚婚假取消。至于产假,原来的15天晚育假取消;原来35天的独生子女母亲产假调整为奖励假30天。也就是说,对于一部分女性来说,产假其实是缩短了的。
具体来说,过去,广东女性的产假一般为《女职工劳动保护特别规定》中确定的98天基本产假,加上35天独生子女假,再加上15天晚育假,总数在148 天。调整后,总数为98天基本产假加上30天奖励假,总数为128天。但是对于此前不享受独生子女假和晚育假的妈妈,产假则增加了30天。
我们知道,结婚是人生大事,我们应该有足够的时间享受、迎接婚姻的到来,因此国家规定了婚假。下面小编给大家带来职员休婚假的申请书,更多婚假申请书请点击“婚假申请”查看。
职员休婚假的申请书婚假申请书
尊敬的领导:
男大当婚,女大当嫁,不婚不嫁,会有笑话。我和某某小姐终于成婚了,希望你能按国家法律和公司规定准许我们休婚假。我们准备旅行结婚到港澳一游,如您老高抬贵手能批准我们休一年的带薪长假,我们将长途跋涉周游世界和宇宙。当回来时我们将是三个人,因为我们的小宝宝也诞生了。
不过到时麻烦你替我们向市外事办公室报一下,因为我们的宝宝是个小老外。如能如愿本人的感激之情真是难以用语言表达,千言万语汇成一句话“谢谢啦”
特此报告。
此致
敬礼!
申请人:申请书模板
__年__月__日
附:结婚证明(复印件)
吉林婚假国家规定2022婚假、产假、陪产假
第四十条各级人民政府按照国家和省有关规定,对在开展人口与计划生育工作中做出显著成绩的单位和个人给予表彰奖励。
第四十一条符合法律、法规规定结婚、生育的夫妻,按照下列规定给予奖励或者福利待遇:
(一)依法办理结婚登记的职工,享受婚假十五天;
(二)女职工凭生育情况证明增加产假六十天,同时给予男方护理假十五天;
(三)子女十六周岁以前入托(园)、入学、就医等,其费用由父母所在单位根据情况给予适当补助;
(四)职工在享受婚假、产假、护理假期间,按其正常工作对待,工资、奖金照发,其他福利待遇不变。
女职工经本人申请,单位同意,可延长产假至一年,产假延长期间工资按原额的百分之七十五发放,不影响调整工资、晋升级别、计算工龄。
婚假多少天婚假是职工的法定假期,也是社会福利的一项重要内容。每个地方可能因为婚嫁习惯、经济水平等不同,其婚假的天数由长有短,而2022年的婚假安排具体如下:
1、按法定结婚年龄(女20周岁,男22周岁)结婚的,可享受3天婚假。
在婚假和路程假期间,三天之内工资照发,也就是说,带薪休假。
2、符合晚婚年龄(女23周岁,男25周岁)的,不再享受晚婚假奖励,只有3天法定婚假。
在以往的婚假安排中,如果是在国家机关、国有企业、事业单位工作的,除了享受规定的最多3天的婚假外,晚婚会额外得到 7天假期的奖励。如果晚婚者在城镇里居住但是没有工作的,或者是私营企业的老板,一般由居委会或者镇政府给予相应的晚婚奖励。如果晚婚者是私营企业的雇员,老板也应当给他们婚假,假期时间和在国有企业一样。
目前,国家对计划生育不再限制,因此取消晚婚假。符合法律、法规规定生育子女的夫妻,可以获得延长生育假的奖励或者其他福利待遇。”
3、结婚时男女双方不在一地工作的,可视路程远近,另给予路程假。
根据职工嫁娶情况路程复杂,可以由用工单位行政领导批准,酌情给予一至三天的婚丧假。假期在三个工作日以内的,工资照发。在批准的婚丧假和路程假期间职工的工资照发。途中的车船费等,全部由职工自理。
4、在探亲假(探父母)期间结婚的,不另给假期。
5、婚假包括公休假和法定假。
6、再婚的可享受法定婚假。
再婚者与初婚者一样法律地位,均应享受婚假待遇。根据我国的相关规定,职工享受三天的婚假。对于再婚者的婚假问题
我已和未婚夫商定于xx月xx日结婚,需从xx月x日起请假xx天,请予批准。
请假人:xxx
婚假申请书范文
尊敬的公司领导:
本人于xxxx年x月x日登记结婚,并属于晚婚。根据国家有关婚假规定,本人可享受15天婚假。现特向领导请求休婚假,自x月x日到x月x日共计15天,请予以审批。
特此申请
申请人: xxx
xxxx年x月x日
附:结婚证明(复印件)
婚假申请书格式
婚假申请书
本人xxx定于2xxx年x月x日结婚,依据国家有关规定可以享受xx天婚假,现申请于xxxx年x月x日,至xxxx年x月x日休婚假,特此申请,请予批准!
婚假请假条范文
×单位领导:
我与××定于×月×日结婚,需请假×天,恳请领导批准为盼。
(右下角)请假人:×××
(右下角)×月×日
一般公司随便就行了,因为公司有专用的婚假,事假表单的
婚假申请书范文
尊敬的公司领导:
本人于xxxx年x月x日登记结婚,并属于晚婚。根据国家有关婚假规定,本人可享受15天婚假。现特向领导请求休婚假,自x月x日到x月x日共计15天,请予以审批。
特此申请
申请人:xxx
xxxx年x月x日
附:结婚证明(复印件)
婚假申请书常识
婚假到底是写婚假申请还是请假条?
名头是婚假申请:
开头是尊称:
主题:本人自我介绍形式如xxx出生日期符合国家婚姻法规定现与xxx配偶决定于年月日办理结婚手续/或结婚手续办理完毕.恳请上级领导准许本人享受国家法定完婚待遇.
特此申请
申请人:哪个部门的xxx
申请日期:
如果你与单位签合同,那就好因为你享受国家劳动合同法保护,单位没理由拒绝如果拒绝你可以到劳动部门告他包赢。做个懂法的人不会吃亏的
1、按法定结婚年龄(女20周岁,男22周岁)结婚的,可享受3天婚假。
2、符合晚婚年龄(女23周岁,男25周岁)的,可享受晚婚假15天(含3天法定婚假)。
3、结婚时男女双方不在一地工作的,可视路程远近,另给予路程假。
4、在探亲假(探父母)期间结婚的,不另给假期。
5、婚假包括公休假和法定假。
6、再婚的可享受法定婚假,不能享受晚婚假。
婚假期间工资待遇:在婚假和路程假期间,工资照发。
附一:婚假申请书格式
婚假申请书
本人×××定于2×××年×月×日结婚,依据国家有关规定可以享受××天婚假,现申请于××××年×月×日,至××××年×月×日休婚假,特此申请,请予批准!
×××
2×××年10月8日
附二:婚假天数
在法律层面没有规定,只在行政法规和规范性文件层面。[1980]劳总薪字29号规定:婚丧假1-3天,结婚双方不在一地的另外给予路程假,此文件当时针对国营企业。通常我们都按最长3天计算。
1.居中写标题 “请假条”,这是所有应用文的通用要求,用来表明此文是用来请假的条子!
2.请假对象的称呼,要请假必须得到批准,这个地方往往是老师、领导等,这个地方要尊称喔!
3.请假原由。此处注意,如果是晚婚要特殊标明。
4.请假起止时间,这个非常重要,必须重点提出,明确。
5.祝颂语。祝福对方,这个是所有公文里表示对对方的友好。
6.请假人签名。 你自己的签名,一般不用按手印,只需要签字即可。
7.请假时间。 当前你写请假条的时间。
二、婚假请假条范文
范例一、
请假条
公司领导:
我已和未婚夫商定于**月**日结婚,需从**月*日起请假**天,请予批准。
请假人:***
2×××年10月8日
范例二、
婚假申请书
尊敬的公司领导?
本人于xxxx年x月x日登记结婚?并属于晚婚。根据国家有关婚假规定?本人可享受15天婚假。现特向领导请求休婚假,自x月x日到x月x日共计15天?请予以审批。
特此申请
申请人? xxx
2×××年10月8日
范例三、
婚假申请书
本人×××定于2×××年×月×日结婚,依据国家有关规定可以享受××天婚,现申请于××××年×月×日?至××××年×月×
日休婚假?特此申请?请予批准!
为了贯彻落实《广西壮族自治区就业进行管理办法》(桂人社发[2017])进一步加强对离校未就业高校毕业生就业进行管理,帮助尚未就业的高校毕业生提升就业能力,促进供需,进一步实现就业,现本企业申请继续建立高校毕业生就业见习基地。
公司致力于为各中小型企业解决全生命周期财税服务,主要提供专业的记账、税务代办、专业解决企业的各种记账报税及疑难财务问题。公司注重用户体验,客户可通过线下与线上的无缝隙对接。截至目前,我们服务的客户数量累计已超5000家,行业分别覆盖于各高新企业、进出口贸易业、建筑建材业、物流和运输业、批发和零售业、住宿和餐饮业、旅游业等多个行业。
公司的各类福利待遇:
1、公司各种福利与补助都在不断增加,享受各类带薪假(法定假日、年假、婚假、产假、陪产假、带薪病假等)及健全的社保体系。
2、针对某些岗位公司有交通补贴,高温补贴、各岗位都有话费补贴,提供专业的岗前培训、专业知识培训、工作技能培训、外部培训、管理领导培训等,全方位助成长
3、提供丰厚的奖金,如:月TOP奖、月度销售团队奖、进步新人奖、员工奖等。
4、公司不定期举办各种员工活动,如:聚餐、郊游、员工生日会、传统节活动、年底员工评优、年会等;
2019年1月申请见习基地,为各大高校提供实习生和应届毕业生的就业岗位。
随着公司规模的不断扩大,未来几年内公司打算在各区各县设立多个门店,因而目前公司在大量招聘和培养人才,针对实习生,应届毕业生都设有专门的岗位,公司对尚未就业的高校毕业生也一直实行的是一带一的模式,实习期后,公司会正式录用。
我们承诺:
一、积极做好见习基地的建设工作。建立高校毕业生就业见习基地是疏通高校毕业生面向基层就业的渠道,从实际出发,积极创造条件,逐步建立和完善高校毕业生就业见习制度。
二、有计划地组织未就业高校毕业生参加就业见习。为其选择见习岗位提供便利,帮助未就业高校毕业生通过就业见习扩展就业机会。
三、认真做好见习期间的各项管理工作。要加强对见习高校毕业生的指导,加强宏观管理和检查,保证见习活动的顺利进行。
四、见习期限一般不超过六个月。在见习期间被见习单位正式录(聘)用的,见习期可以作为工龄计算。并为实习生购买商业意外险,以保障双方的合法权益。及时协调解决见习工作中遇到的困难和问题。见习活动结束后,由见习单位对高校毕业生进行考核鉴定,出具见习证明,作为用人单位招聘和选用见习高校毕业生的依据之一。
五、切实稳妥的解决未就业高校毕业生见习的岗位,高校毕业生在见习期间由见习单位发给实习生基本生活补助。
公司在高速发展的同时,不忘回馈社会,积极的参与社会公益事业,我公司高度重视高校毕业生就业,想为社会做一些力所能及的贡献,因而公司想继续申请大学生见习基地。特请批复!
关键词:甲基对硫磷;氯氰菊酯;神经发育;Morris水迷宫;空间学习和记忆
文章编号:1006-3617(2007)01-0046-04
中图分类号:R114
文献标识码:A
有机磷农药和拟除虫菊酯类农药都具有神经毒性,有资料表明大鼠发育的关键时期,较低剂量的滴滴涕(DDT)、拟除虫菊酯、有机磷类、百草枯等农药的暴露,就可导致成年后大鼠脑功能的不可逆改变,如引起学习障碍[1];SD大鼠孕期暴露于七氯杀虫剂,雌性仔鼠在平面翻正实验暴露组落后于对照组[2]。本研究于大鼠妊娠期暴露于甲基对硫磷和氯氰菊酯混配农药,观察其对仔鼠神经行为发育的影响。
1 材料和方法
1.1 受试物
氯氰菊酯原油(cypermethrin),纯度87%,甲基对硫磷原油(methylparathion),纯度80%,均由昆明市农药厂提供,溶剂为市售色拉油。
1.2 动物分组及染毒
健康3月龄清洁级Wistar大鼠由上海科学院动物研究所提供,合格证号:SCXK(沪)2003-0008。雌鼠70只,体重120~200 g,雄鼠30只,体重150~220 g。雌雄以1∶1于每晚6:00时合笼,次日晨进行阴道涂片检查,凡查出者确定为已,当日定为受孕“0”天。将孕鼠48只随机分为4组,每组12只,于妊娠第1~15天用农药甲基对硫磷与氯氰菊酯混配进行连续灌胃染毒,对照组采用等容量溶剂灌胃。剂量设定:根据本研究前期实验结果[3],按对数递增(高剂量为中剂量的3.16倍,中剂量为低剂量的3.16倍)设计3个剂量组,具体见表1。
1.3 仔鼠早期神经行为发育指标
对出生的349只仔鼠分别测试断崖回避、平面翻正、前肢悬挂、空中翻正、听觉惊愕、视觉定位指标。上述6项指标开始测试的时间分别为仔鼠出生后第2、2、14、12、7、16天,连续观察记录,计算各剂量组仔鼠达标率即达标仔鼠的数量与测试仔鼠数量之比。
1.4 Morris水迷宫测试
从各剂量组50天龄的仔鼠中随机抽取16只(雌雄各半)共64只放入由一个直径为180 cm圆柱形水池中。水池中加入27 cm深的清水,水温控制在26~28 ℃。一个直径为10 cm可移动玻璃平台,按顺序在池边标注东、南、西、北。
1.4.1 隐蔽平台实验(Hidden platform) 实验平台置于西南象限,距盆边25 cm,在水面下2 cm,水下平台实验共测试5 d,每天测试1次,每次测试仔鼠从4个方向入水,投放的方向由随机数字表确定,将仔鼠面对盆壁放入水中,实验人员在放入仔鼠后迅速离开迷宫室,同时启动电脑轨迹记录开关,记录仔鼠寻找平台的时间(逃避潜伏期,escape latency),仔鼠找到实验平台后,让仔鼠在实验平台上停留30 s后,本次实验确定的最大潜伏期定位为120 s。
1.4.2 可视平台实验(Visible platform test) 隐蔽平台实验结束后的第2天开始,将实验平台升高4 cm,用白色胶布贴附在平台边缘上,使其标志成白色,此实验共测试2 d,每天测试1次,每次测试仔鼠从4个方向入水,记录仔鼠找到平台的时间。
1.4.3 空间探索实验(Spatial probe) 实验共测试1 d,在仔鼠做完可视平台实验的当天,撤除实验平台,把仔鼠从东和北两个方向分别入水,记录仔鼠1 min内在各个象限的停留时间。
1.5 统计分析
实验数据采用SPSS 11.5统计软件包进行处理,根据资料分布情况分别采用:重复测量方差分析、χ2检验、秩和检验、两因素方差分析。
2 结果
2.1 仔鼠早期神经行为发育
表2表明,断崖回避达标率在出生第5和第6天,高、中剂量组的达标率低于对照组(χ2检验,P < 0.05)。
表3显示,视觉定位达标率在出生的第16天下午,高、低剂量组的达标率均低于对照组,差异有显著性(χ2检验,P < 0.05)。其余神经行为发育指标平面翻正、空中翻正、听觉惊愕各剂量组间差异无显著性(χ2检验,P > 0.05);前肢悬挂在统计学上差异无显著性(秩和检验,P > 0.05)。
表3 仔鼠视觉定
2.2 仔鼠空间学习记忆测试(表4)
2.2.1 隐蔽平台实验 仔鼠测试5 d的逃避潜伏期,雌雄比较无显著性差异(P > 0.05),故将雌雄合并进行分析,经重复测量方差分析各剂量组在统计学上差异无显著性(P > 0.05)。
2.2.2 可视平台实验 实验共测试2 d,取2 d仔鼠寻找实验平台的逃避潜伏期的平均值进行统计分析,仔鼠各剂量组寻找平台逃避潜伏期经两因素方差分析,雌雄在统计学上差别无显著性(P > 0.05),故把雌雄合并进行分析,经单因素方差分析各剂量组差异没有显著性(P > 0.05)。
2.2.3 空间探索实验 各剂量组的仔鼠在各象限的停留时间,两因素方差分析雌雄之间以及各剂量组之间在各象限的停留时间,在统计学上无显著性差别(P > 0.05)。
3 讨论
对农药毒性的研究,国内学者大部分集中在免疫毒性、生殖毒性以及胚胎毒性方面,相对于农药对神经行为功能的影响研究较少,而神经行为毒理学的研究方法具有敏感、可定量及可测定环境危害因素导致的亚临床表现等优点,因此现已成为对外源化学物进行毒理学评价的内容之一[4]。
甲基对硫磷和氯氰菊酯农药都具有神经毒性,妊娠期暴露于相关农药可以对仔鼠的早期神经行为发育产生一定的影响。有资料表明大鼠发育的关键时期,即妊娠第6~15天暴露于敌敌畏,和对照组相比,暴露组仔鼠在出生21 d时,雄性仔鼠的活动度下降,成年仔鼠的旷场实验的活动频率比对照组减少[5]。有研究表明Wistar孕鼠暴露于溴氰菊酯,仔鼠平面翻正反射阳性出现时间、空中翻正反射阳性出现时间以及被动逃避反应阳性率,均明显低于对照组[6]。
为了解甲基对硫磷和氯氰菊酯混配对仔鼠感觉功能、反射发育、运动协调功能的影响,本实验选取了能够反应仔鼠的感觉和反射功能的断崖回避、平面翻正、空中翻正、听觉惊愕、视觉定位以及反应运动协调功能的前肢悬挂和共6个早期神经行为发育指标。实验结果表明,Wistar大鼠在妊娠期1~15天暴露于甲基对硫磷和氯氰菊酯混配农药,虽然仔鼠大部分指标未观察到统计学差异,但断崖回避在出生后的第4、5天,以及视觉定位在出生后的第16天下午均观察到合格率降低,断崖回避和视觉定位分别反映了实验动物的躯体感觉运动和视觉的发育,这说明在仔鼠的发育早期,混配农药对实验动物的神经感觉和视觉已产生一定的影响,但随着神经功能发育和代偿过程,神经行为发育指标在测试的后期未观察到差别。
Morris水迷宫是英国心理学家Richard GM、Morris于1981年发明并使用在学习记忆的研究中,目前Morris水迷宫已经成为神经毒理学领域较为常用的评价神经毒性的方法之一,在现代毒理学中有着非常重要的地位[7]。与其他的水迷宫测试及跳台、避暗等检测工具相比,其主要优点包括:能够提供较多的实验参数,系统全面地考察实验动物空间认知加工的过程,客观地反映其认知水平,操作简便,数据误差较小[6]。关于Morris水迷宫水池内放入的液体国内外有多种,包括:纯水、牛奶、合成的无毒的白色液体等,也有的在圆形水池中的水面均匀覆盖一层大小相似的泡沫颗粒,以增加水下实验平台的隐蔽性[8]。然而也有报道在水迷宫内加入牛奶和清水对于实验动物的实验成绩没有影响[9],故本次实验在水迷宫内加入的是清水。有报道Sprague-Dawley大鼠可以利用“气味”线索来寻找平台位置[10],故本次实验在每天实验结束后,清洗整个水迷宫水池。
Morris水迷宫主要用于研究实验动物的空间学习记忆能力,有研究表明Wistar大鼠连续暴露于浓度为0.002 4 ~0.055 mg/kg体重对硫磷13 w,运用Morris水迷宫对Wistar大鼠空间学习记忆能力进行测试,暴露组和对照组空间学习记忆能力没有差异[11]。本次Morris水迷宫实验选取了隐蔽平台、可视平台和空间探索3个测试指标,隐蔽平台实验主要测试实验动物空间学习记忆能力,纵观隐蔽平台实验5 d的训练情况,随着测试时间的增加,各剂量组的仔鼠寻找水下隐蔽平台的潜伏期逐渐缩短,空间学习记忆能力均有提高。可视平台实验主要目的为排除动物模型制作过程中导致的仔鼠运动和感觉功能的障碍,增加了对仔鼠视觉功能的测试。空间探索实验主要反映仔鼠的参考记忆和空间记忆保持能力[12],主要测试仔鼠在4个象限停留的时间,一般来说实验动物在原实验平台所在象限即目标象限(target quadrant)内停留的时间越长,反映实验动物的空间记忆保持能力越好,反之如果实验动物在目标平台以外象限停留时间越长,则反映空间记忆能力越差。从测试结果看,各剂量组在4个象限和目标象限停留的时间均高于其他象限,表明仔鼠均有较好空间记忆能力。
大鼠出生前暴露本实验剂量的甲基对硫磷与氯氰菊酯,在发育的早期对仔鼠的神经感觉和视觉有一定的影响,但在发育的晚期进行Morris水迷宫测试未观察到对仔鼠的空间学习记忆产生影响,这可能由于本次实验的混配农药剂量较低,或者是随着仔鼠神经功能发育和机体的代偿机制使这种差异减少。