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上市公司是指所发行的股票经过国务院或者国务院授权的证券管理部门批准在证券交易所上市交易的股份有限公司。所谓非上市公司是指其股票没有上市和没有在证券交易所交易的股份有限公司。
上市公司是股份有限公司的一种,这种公司到证券交易所上市交易,除了必须经过批准外,还必须符合一定的条件。例如股份有限公司要成为上市公司的先决条件是公司股票已向社会公众公开发行,属募集设立的股份有限公司;公司股本总额不少于人民币5000万元;开业时间在3年以上及最近3年连续盈利;持有股票面值达人民币1000元以上的股东人数不少于1000人;公司在最近3年内无重大违法行为,财务会计报告无虚假记载等等。所以上市公司应是具有极高信誉的企业,其生产经营依法进行,公司规模大,盈利能力强,是拉动当地经济发展的主力军。
二、陕西省上市公司现状
陕西省第一家上市公司开元控股于2007年8月在深证证券交易所成功上市,目前(2014年12月)陕西共有43家上市公司。各家公司所属行业及根据2014年12月年报统计得出的基本数据如下表:
据表1,陕西省43家上市公司,主要分布于16个行业,其中3家属于信息服务;2家属于建筑材料;14家属于机械设备;3家属于餐饮旅游;1家属于电子光学;3家属于国防军工;1家医药生物;3家有色金属;1家轻工制造;1家食品加工;2家公用事业;2家金融服务;2家采掘;2家商业贸易;1家综合;化工2家。重工业企业居多,第三产业偏少,结构不够合理。
三、盈利能力分析
(一)对上市公司进行盈利能力分析的意义
盈利能力通常是指企业在一定时期内利用各种经济资源赚取利润的能力,是各部门生产经营效果的综合表现,既能反映出企业在一定时期的销售水平,又能反映资产的营运效益,获得报酬、回避风险的水平及未来增长潜能。公司维持好盈利能力水平是实现财务管理根本目标股东财富最大化,企业价值最大化的基本途径和保证。
(二)陕西省上市公司盈利能力
从表1中可以看出,43家上市公司,有7家是亏损的,其中业绩最好的是中航动力,其次为西部证券;每股收益超过0.5元的公司有4家,分别为中航动力、西部证券、天和防务、蓝晓科技。净利润同比增长24家为负,整体成长性较差。
综合来看,陕西上市公司净利润最好的是国防军工板块,其风险相对低一点,亏损严重的是彩虹股份,净利润同比增长中隆基股份表现比较优秀。其中创业板高科技股蓝晓科技以及天和防务基本面表现优秀,但可能由于科研项目投入造成净利润同比下降;基本面较好且能增长的依旧是金融行业―西部证券。
关键词 基层医院功能科 急诊 夜诊
我院属县市级医院,是国家三级医疗网中的骨干龙头医院,肩负着对乡镇、社区医院人员进行教学和培训,同时肩负着筛查疑难杂症,并及时向上级医院转诊的目的。本科室工作人员6人,平均年龄为43.5岁,从事本专业时间为20.5年,参加执夜班的人员均应掌握超声及心电图学的诊断技术。对2010年7~9月份847例患者进行系统回顾性分析,以求对基层医院医生有所帮助。
资料与方法
研究对象:2010年7月~9月在我院晚间急诊、夜诊的患者,男297例,女550例;年龄2~75岁,平均36.5±9.0岁。其中心电图540例,腹部超声307例,夜诊心电图6人次/夜,超声3.3人次/夜。
仪器:采用MAC-1200ST心电图仪及PHLIPS-ENWISOR,百胜570FDMK超声诊断仪,探头频率3.0~5.0Hz。
方法:采用黄宛心电图学所示导联位置,超声采用仰卧位,侧卧位及相互结合的标准方法。
结 果
心电图组:急性心肌梗死27例,房颤19例,心肌缺血30例,室性心动过速5例,心动过速42例,房早、室早15例,左右心室腔肥大17例,正常285例,阳性率约占28.7%。
超声组:142例晚妊,胎儿畸形6例,宫外孕17例,急性阑尾炎15例,胆囊结石7例,肠梗阻9例,外伤至腹腔内脏器破裂8例,尿潴留2例,泌尿系统结石18例,胰腺炎7例,正常68例,阳性率达80.6%,手术127例,转院8例,随访病历通过临床手术病理验证。
讨 论
急诊医学科(室)或急诊医学中心是医院中重症病人最集中、病种最多、抢救和管理任务最重的科室,是所有急诊病人入院治疗的必经之路。因此,急诊科的工作可以说是医院总体工作的缩影,直接反映了医院的急救医疗、护理工作质量和人员素质水平。20世纪90年代的急诊科突出了科室的特色和融入了重症监护的优势,因而在现代急救医疗体系中占有重要地位。21世纪现代急诊医学科已发展为集急诊、急救与重症监护三位一体的大型的急救医疗技术中心和急诊医学科学研究中心,可以对急、危、重病人实行一站式无中转急救医疗服务,被喻为现代医学的标志和人类生命健康的守护神。
在县级基层医院中,心电图仪、中高档彩色超声仪都已全部覆盖,心电图仪及超声仪因其简便实用安全而广泛使用,并且能够及时为许多种疾病提供有价值的诊断依据,而受到临床科室医生的信赖,在本时间段内我院收治的病例中不乏出现诸如急性急肌梗死、房颤、室性心动过速、宫外孕、胆总管结石、肠梗阻、腹腔脏器破裂、胰腺炎等危急病例,如不能及时准确做出诊断,延误病情,将危及到生命,在超声医学中所示的急腹症,在本章节超声组中占总病例数阳性率达62.5%之多,在心电图组,急性心肌梗死27例,室性心功过速5例等也占有不少比例。因此可以这么讲,及时准确客观地为临床医生提供有价值的诊断报告,对拯救病人的生命至关重要。本文所指急腹疾病是指腹腔内、盆腔内、心血管及表浅器官或器官发生了急剧的病理变化,所产生的一系列的症状、体征为主生理变化,同时伴有全身反应的临床表现,可分为器质性、穿孔性、梗阻性、脏器破裂、出血性、缺血性等类型,涉及到内、外、妇、儿等诸多科室。如何做好此项工作是关系到患者生命得以延续的一项重大课题,从实际工作中总结如下几点。
要有扎实的基础理论知识,掌握人体器官病理、生理、解剖学、电生理学,还应熟悉心血管不同器官,组织血液供应的动态变化。基础理论知识的扎实与否直接影响到对急性疾病特征的认识和正确思维的培养,进而影响诊断水平。
要具有正规的超声仪器的操作技能,要尽可能多地掌握各类超声诊断仪的性能、特点及操作方法,调节方法以及计算机技术,并要了解超声声像产生的物理基础,善于识别声像图中伪像的种种表现,增强对于某些结构及病变的识别能力,有助于提高诊断水平。
重视正确的临床思维,急诊因图像及心电图的复杂性及多样性、缓急等,决定了应对所获图像资料进行系统、全面、客观地分析。
超声检查如何恰当地做出诊断,是下临床诊断、病理解剖诊断,还是病理诊断?这是超声医师多年来极为关心且分歧较大的问题,对于超声具有确诊价值的疾病,如积液、结石、血管栓塞等可以直接做出明确的临床诊断、病理解剖诊断甚至病理诊断,而对于超声检查只具有参考价值的疾病,则应尽可能做出符合客观实际的影像学诊断,供临床医师参考。需要特别引起注意的是一种疾病可以有几种不同的超声征象和声像同类型,它们皆可以成为声像图诊断的依据,然而不同的疾病又可能具有某些共同的超声征象,使声像图的诊断变得难以肯定。如腹腔大量积液,明确的解剖部位诊断和物理性质诊断,当进一步判断这一现象属于哪一种疾病时,则面临诸多的选择,诸如宫外孕、外伤、腹水等,所以,因有的放矢地做出正确恰当的结论或提示;对某些急诊要动态观察,必要时进行系统地追查或复核比较,检查者应提出复查的日期和要求内容。
注意反馈与随访。应自觉地建立一套完整的反馈与随访体系,时常下病房,积极参与相关的病例讨论,多到病案室查阅病人疾病最终诊疗意见,特别是临床医师的反馈更是有针对性和指导意义,以上做法均是丰富知识,避免错误,提高诊断水平的有效方法。
县市级医院承担着承上启下的作用,夜间发生的急诊及乡镇、中心社区送至我院的患者,很大一部分患者都是有急腹症的特点、体征,作为基层功能科医生,同时要掌握多项诊断技能,要不间断地学习,从实战中认真总结经验,才能做到游刃有余。
参考文献
1 刘兰芬,张来阁,等.急诊超声诊断.北京:人民军医出版社,2007.
反映色素代谢方面的肝功能(1)黄疸指数。(2)血清胆红质定性定量试验。
反映蛋白代谢方面的肝功能 (1)总蛋白,白蛋白、白蛋白与球蛋白之比。(2)麝香草酚浊度试验即(TTT)。(3)硫酸锌浊度试验(ZnTT)。(4)血清蛋白电泳。
反映酶代谢方面的肝功能谷丙转氨酶(SGPT)
肝功能检查方法虽然很多,目前却还没有哪一种检查,能对所有的肝病及其病变程度作出准确的判断;也没有哪种肝功能检查能不受肝病以外因素的影响。所以,必须由医生根据病情来选择必要的检查项目;而且要了解,要弄清得的什么肝病,单凭一张化验单是不准确的。
当然,肝脏有病的时候,在肝功能化验报告单上,是有可能反映出问题来的。对于这种报告应该怎样分析呢?下面就以常见的病毒性肝炎(包括甲型肝炎、乙型肝炎、非甲非乙型肝炎)为例,作一介绍;
肝功能正常:黄疸指数为4~6单位;血清胆红质定性试验为间接反应弱阳性,定量为0.1~0.8毫克/100毫升血清;TTT 0~6单位。ZnTT小于12单位,总蛋白6~8克/100毫升血清,白蛋白4~5克/100毫升血清,球蛋白2~3克/100毫升血清,白、球蛋白之比为1.5~2.5:1,血清蛋白电泳中,v-球蛋白在20%以下,SGPT小于40单位。
如果以往身体健康,近来感到发热、全身不适,疲乏无力、食欲减退,甚至有恶心呕吐,厌油等,此时检查肝功能,SGPT增高,则应考虑为急性病毒性肝炎。如同时黄疽指数正常,则为无黄疸型肝炎,黄疸指数超过15单位,病人皮肤和眼白也发黄,则为黄疸型肝炎。不论黄疸或无黄疽型肝炎,SGPT都应该增高,TTT、ZnTT可以正常。如果急性黄疸型肝炎病人的TTT、ZnTT也增高,那就意味着肝脏的色素、蛋白质和酶的代谢功能都发生障碍,提示病情较重。假若这样的急性病人,起病后1~3周内,黄疸指数迅速上升超过100单位以上,胆红质定量超过10毫克/100毫升血清,或者黄疸指数虽然没有超过100单位,但黄疸上升速度很快,黄疽指数每天增高10单位以上或者胆红质定量每天增加l毫克/100毫升血清,而且随着黄疸的急剧上升,SGPT反而下降,造成所谓疸(黄疸)酶(转氨酶)分离现象,病人高度疲乏无力,而且消化道症状(食欲减退、恶心呕吐)突出,则提示病情更重,有向重型肝炎发展的趋势,必须立即住院治疗。
值得指出的是,肝功能检查中,如果只有SGPT增高,其他各项都正常,病人乏力和消化道症状也不明显,则除了可能是病毒性肝炎外,还应考虑是否是其他问题。因为SGPT虽然是诊断病毒性肝炎的一项重要指标,但不是特异的。只要某种原因能引起肝细胞损害,SGPT就可能增高。例如胆囊炎、胆结石的病人,肥胖、胆固醇较高的病人,因其他疾病长期服用异烟肼、阿斯匹林、巴比妥类药物的病人,他们的SGPT均可增高,甚至健康人在几百米快速长跑之后,SGPT也会增高。所以,对于单纯SGPT增高而自觉症状不明显的病人,不能马上给下“病毒性肝炎”的诊断,应定期复查,动态观察,在排除其他疾病或因素后,才能考虑确定。必要时还可作乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的检查,对诊断可能有帮助。
资料与方法
2007~2011年收治阴道脱落细胞检查结果为ASC-H妇女68例,均接受阴道镜下宫颈活检,获得组织病理学检查结果,对这68例患者进行回顾性分析。患者年龄20~76岁,平均38岁。临床资料,见表1。
研究方法:①宫颈细胞学诊断:采用2001年的TBS系统对宫颈人工涂片进行分析。宫颈细胞学诊断分为:高度鳞状上皮内瘤变(HSLL),低度鳞状上皮内瘤变(LSIL),未能明确意义的不典型鳞状细胞(ASC-US),未能除外高度上皮内瘤变的不典型鳞状细胞(ASC-H),正常范围(WNL)。②阴道镜检查:全部病例均在阴道镜下取活检。检查前24小时不行任何阴道操作,阴道镜下在可疑部位即白色上皮、镶嵌、点状血管、异性血管、真性糜烂、葡萄状血管、白斑,腺口周围白环及明显突起的部位取活检。12例阴道镜检查不满意者常规从12点、3点、6点、9点及颈管取活检送病理检查。
讨论
宫颈癌是女性常见恶性肿瘤之一,发病原因目前尚不清楚,早婚、早育、多产及性生活紊乱的妇女有较高的患病率。宫颈癌最早初期没有任何症状,也无特殊体征,往往出现最早的症状是阴道出血,开始常为少量的接触性出血,绝经后间断性出血或白带量的增多,呈血性或脓性气味腥臭,晚期可出现大出血、恶病质、消瘦、发热、贫血,以及癌肿侵犯所造成的周围压迫症状,如下腹痛、腰痛、尿频、尿急、坠胀感、里急后重、下肢肿痛,坐骨神经痛等,严重时可导致尿毒症,出现全身衰竭,危及生命。目前治疗方案以手术和放射治疗为主,亦可采用中西医综合治疗,但中晚期患者治愈率很低。作为女性要洁身自爱,加强卫生保健,注意按时妇科普查,发现症状苗头,及时就医。宫颈癌是由人类瘤病毒(HPV)引起的,HPV病毒可直接通过皮肤接触传播,有十几年的潜伏期,故初期没有任何症状,宫颈癌可防可测,按时进行宫颈癌筛查就能有效避免不幸发生。宫颈癌与性生活没有直接联系,女性需要对其有正确的认识,由于对宫颈癌致病概念的错误理解,给女性带来很大危害,以至于不愿意正视这个问题导致不幸的发生。
宫颈刮片是筛查早期宫颈癌的重要方法。故又称“防癌涂片”。报告形式主要为分级诊断及描述性诊断两种。目前中国多数医院仍采用分级诊断,临床常用巴氏分级分类法:①巴氏Ⅰ级:正常。②巴氏Ⅱ级:炎症,指个别细胞核异质明显,但不支持恶性,余均为ⅡA。③巴氏Ⅲ级:可疑癌。④巴氏Ⅳ级:重度可疑癌。⑤巴氏Ⅴ级:癌。由于巴氏5级分类法,主观因素较多,各级之间无严格的客观标准,故目前正逐渐为TBS分类法替代,而后者需专业医师方可读懂。故目前国内许多医院常利用电子阴道镜局部放大10~40倍的功能,进行宫颈可疑部位的染色,从而重点取材,以提高病变的检出率。
在宫颈癌的防治中,宫颈、阴道细胞病理学检查是常规的检查手段,为了更接近临床和诊断,2001年TBS系统更新,将ASC进一步分为ASCUS和ASC-H两个亚型[1]。ASC-H的细胞学特征,包括非典型未成熟化生细胞、非典型成熟化生细胞、非典型小细胞和非典型修复细胞[2]。根据文献报道ASC-H在细胞学诊断中0.25%~0.6%。研究发现,50%~70% ASC-H在随访中升级为高度病变[3~5]。本组资料中,ASC-H的组织活检病理学阳性率达67.6%。CIN Ⅱ、CIN Ⅲ及宫颈癌36.8%。可见ASC-H宫颈病变检出率高,且往往提示存在CIN Ⅱ及以上病变的风险。对ASC-H患者应立即行阴道镜下活检。利于及早发现宫颈高度病变和早期宫颈癌。
本组资料中,3例患者宫颈光滑,因此宫颈光滑的妇女也应定期进行宫颈涂片检查。
一、职业院校校园文化建设的必要性
校园文化是指学校这个特殊场所所具有的特定的精神环境和文化氛围,是各类学校教育不可缺少的重要组成部分,是学校师生在学习、工作和生活过程中所形成并共同拥有的价值观、信仰、态度、作风和行为准则。具体而言,校园文化可分为物质、制度、观念三个层面。从内涵上体现为显性课程和潜在课程两方面,显性课程指学校规定学生必须掌握的知识、技能、思想、观点、行为规范等;潜在课程包括校园建筑,文化设施和环境布置等有形环境和校风、教风、学风、人际关系、集体、舆论、心理气氛以及校园群体观点、信念等,而校园精神和校园价值观等观念形态的东西是校园文化的深层结构和核心内容,对校园的生存和发展都具有指导意义,是与办学质量连接在一起的。事实证明:健康和谐的校园文化能给师生创造一个有形而庄重的“磁场”,能在无形中统摄全体师生的灵魂,起到“润物细无声”的教育魅力。它具有陶冶性情、规范行为,培养健全的人格,促进健康的心理、养成良好的习惯;还有利于培养学生正确人生观、价值观、世界观;还可以增强学生集体意识、竞争意识、创新意识;因而,校园文化在学生思想品德教育和良好行为习惯中发挥着独特的作用,校园文化建设是社会主义精神文明的需要,也是学校素质教育的需要,它在学校育人过程中发挥着不可低估的作用。
职业教育是我国教育体系中一个重要的组成部分,是我国国民经济和社会发展的重要基础。职业院校是与当今社会经济发展相适应而存在的,其校园文化建设有其自身的特点。
首先,从职业院校的性质来看,它不同于普通中小学,也不同于普通高校,它主要培养生产、经营、管理、服务一线的高素质技术人才。它以“以服务为宗旨,就业为导向,以能力为核心,以学生为本位”。它要将教、学、做贯彻于教学始终,培养社会职业人,因而,职业院校的这些特质决定了其校园文化的特殊性。
其次,从学生主体来看,有其独特的“个性”。这些学生有理想,有报负,有上进心,有求知欲,有为目标的实现不懈努力的精神。但由于他们基本上都经历了升学的挫折,在求学过程中有特殊的经历,与其他同龄人相比,更加敏感,自尊心更强,在遇到困难时易放弃,学习、生活中常常表现出更多的困惑、自卑,行为习惯不佳,因此他们需要更多的关注、爱护。他们渴望尊重、赏识,渴望立业、成功。那么,要把这些特殊的培养主体培养成合格的职业人才,加强职业院校校园文化建设势在必行。
二、职业院校语文课程的特殊性
语文课作为各类学校教育开设的一门公共基础课,它在人才培养过程中发挥了其他课程无法替代的作用,彰显了自身独特的魅力,在整个课程体系中具有独特的价值,而职业院校的语文课程更具有特殊性。
第一,它不同于中小学基础教育阶段,主要是夯实学生语言文字的基础,培养学生阅读、理解、表达、写作的能力,为今后高层次的教育打下坚实的基础;也不同于普通高校的语文课,主要是培养学生的文学素养,提高人文精神和综合素质;在职业院校,语文课主要为专业课服务,突出人文性、工具性,将人文素质教育浸透于语文教学的始终,并以此提升职业能力和职业素养。同时培养学生思维的开放性、创造性及解决问题的主动性、自觉性,为学生可持续发展奠定良好的基础。
第二,在职业教育的过程中,语文课与其他学科相比,它是通过形象生动的经典美文的教学,语文实践活动的开展,来净化学生的心灵,陶冶学生的性情,使之养成良好的习惯,形成健康人格,同时还培养了学生分析问题、解决问题的能力及交际沟通能力,从而全方位地提高学生的综合能力。
第三,从教育对象需求来看,更需要校园文化的熏陶和感染。这些教育群体,在学习理念上,注重专业课,轻视公共课;注重眼前利益,忽略长远发展的潜能;往往把人的职业性和社会性割裂开来。同时,学生的文化基础较差,学习习惯、行为缺失严重,面对这一特殊的对象,只有通过寓教于乐的方式,采取学生乐于接受的方式,激发学生的主动性、积极性,鼓励他们参与课堂,参与实践,从而培养学生的团队协作精神和竞争意识,培养学生的语文素质和能力。职业院校语文课的特殊性决定了它在职业院校校园文化建设中独特的地位和作用。
三、职业院校校园文化建设中语文课程功能研究的可行性
(一)以校园环境为阵地,发挥语文课程在校园文化建设中的作用
学校无闲处,处处熏陶人。陶行知先生说:“一草一木皆是情。”苏霍姆林斯基说过:让校园的每一块墙壁都会“说话”。环境不仅是学生生活的空间,也是培养学生文明素质的载体。整个校园,就是思想品德教育的大课堂,要让学生视线所到的地方都赋予生命。在这一特定的校园环境中,语文课程在校园文化育人中发挥着独特的作用。因为不论是有形环境还是无形环境中都是以语言文字为载体彰显思想,交流情感,滋润心田。如校园宣传栏、警示标语、教学大楼的布置、教室内外的名人名言、学生的学习园地、校园题词、校训、教学仪器使用的注意事项等等都承载着校园文化的内涵。这些感人肺腑的语录,鼓舞人心的题词,鞭策言行的语言都凝聚着前辈们或广大教育工作者的思想,其目的是让学生在浓郁的文化环境中得以感染、陶冶、净化,从而明事理、懂礼仪、知廉耻、辩是非、晓丑恶,最终形成正确的人生观、价值观、审美观。因而,在校园环境建设中,语文课有其得天独厚的优势。
(二)以课堂教学为阵地,发挥语文课在校园文化中的建设作用
语文课不同于其他课程,它是以生动的形象影响着学生,以思想情感感染学生的。不论是指导学生学习弘扬传统文化的经典作品还是现当代时尚美文,在学习过程中,作品深刻的思想情感总能触动学生的情思,震撼着学生的心田,洗礼着学生的灵魂,不知不觉,学生会用榜样人物鼓励自己,用成功的事实鞭策自己,用正确的人生道理指导自己。因而,语文课教学过程就是心灵净化,境界提升、性情陶冶的过程,是接受真善美,拒绝假恶丑的过程,是完成自我成长的过程,是激发学生创造力和生命力的过程。也许只是一次感动就改变了学生的世界,也许只是一次启发就成就了学生的将来,也许只是一次鼓舞就让学生抛弃了自卑。总之,语文课独特的人文性是其他课程不可比拟的,也是校园文化建设中主要的内容。
(三)以丰富多彩的校园活动为阵地,发挥语文课在校园文化建设中的作用
活动是学校生命力所在,是对学生进行思想教育的有效载体。而校园活动又是语文课最好的实践活动。也是加强校园文化建设中的一种行之有效的形式。如在传统节日,法定节日开展丰富多彩、形式多样的诗文朗诵、演讲、辩论、主题班会、讲故事等,既丰富了校园文化,又对学生进行了爱国主义、集体主义、社会主义、中华民族精神的教育。如在“学雷锋活动”、运动会、教师节等活动中,鼓励学生撰写倡仪书,通讯稿件等,既增强校园文化的氛围,又加强学生的思想道德教育。也可以在课余生活中,要求学生创办主题鲜明的黑板报、校刊、校报,撰写广播稿,这既锻炼了学生主动创作的能力,又使学生获得心灵上的满足。因而,充分发挥语文课在校园文化建设中的作用不仅必要,而且可行。
(四)从学生自身发展、成长的历程中渴求一种沁入心脾的校园文化的滋养,而语文课更具有利的条件
作为职业院校的学生,个性鲜明,有理想、有活力、有上进心,但由于社会阅历所限,升学诸多挫折,加之成长中的种种困惑,感悟能力等诸因素的影响,他们对美好人生的追求有很多不解,对美的事物理解仅停留在表面。为此,语文课可以结合职业院校学生的实际,举办形式多样的美学、礼仪、职业生涯规划,交际等讲座。同时,采用学生参与互动的形式,用优秀社会价值观念、道德标准、行为模式感染学生使其树立信心和远大的目标,用知识、礼仪、修养武装他们,让他们真正明白:只有作为,人生才是美好的,虚度年华,碌碌无为,实在是对生命的浪费,对父母的不孝,对社会的不恭。因此,以学生心理情感需求为出发点,发挥语文课在校园文化建设中的作用也是可行的。
(五)以加强师德建设为阵地,发挥语文课程在校园文化建设中的作用
前苏联教育家乌申斯基说:“在教育中,一切都应以教育者的人格为基础……,只有人格才能影响人格的发展和形成。”在学生面前,教师就是一本无字德育书,学生时刻都在阅读。教师是立校之本,而师德师风则是教育之魂。要使学生成为品格高尚的人,就必须加强师德建设。因此,通过举办教师学习班、组织教师参加各种活动,树立良好的师德,规范教师的言行举止,感染学生的行为,养成良好的教风。而这些加强师德的活动,也是以语言文字为载体而具体实施的。因而,语文课在教师师德师风促校园文化建设中发挥着独特的作用。试想一下,一个知识浅陋,语言粗俗,举止不雅,品行不端的教师怎么能培养出德才兼备的学生。因而,以加强师德建设为阵地,也可以发挥语文课程在校园文化建设中的作用。
(六)从学校培养人才的目标出发,发挥语文课在校园文化建设中的作用
学校的天职是为社会培养大量合格的人才。而学校不论是制度文化还是精神文化都以语言文字来承载。著名的教育家乌申斯基说过:一个民族把自己全部的精神生活的痕迹都珍藏在民族的语言里。语文是民族文化的载体,文化的抽象与概括,外延与传递,都必须借助语文这个工具和载体。因而,对学校而言,其校园文化都是以语文为工具,承载着思想、情惑、价值趋向,发挥着独特的育人的效力。不论是校报、校刊、校园宣传栏布置,校园设计,还是校园规章制度,学校各项文件,都传达出校园文化的精华,竭尽全力地为培养职业人才服务,而校园的这一切活动和文化熏陶都离不开语言文字的承载。因而,语文课程在学校育人的整个过程中,渗透着校园文化的内涵,发挥着应有的作用。
(七)从社会对人才需求的角度,发挥语文课程在校园文化建设中的作用
职业教育是我国教育的一种类型,它主要是培养一大批面向生产、经营、管理、服务第一线的高素质技能型人才。社会对这些学生的要求不仅包括应具有综合素质,还包括要具备综合能力,因此,良好的职业素质和职业能力是学生在今后职场的激烈竞争中立于不败之地的关键,他们必须具有社会人和职业人的属性,这也是职业院校校园文化建设中必须明确的因素,在今后的职场上除了拥有精湛的专业技能,还应具备沟通、交际、读写,应变等相关能力,而这些能力绝大多数依赖于语文课程的训练才能实现。考虑学生的就业和将来的发展,就必须在校内根据社会对人才的需要来对其进行培养,而其中语文课程较之于其他课程更有先天性的优势。
总之,校园文化建设是各类学校高度关注的一项内容,它关系整个校园的生存和发展,与学校的办学质量联系在一起,是学校重要的可持续发展要素之一,它以形象直观的表达方式,把思想教育寓于各种具体可感的情境中,而语文课程以其独特的性质和形式在校园文化建设中发挥着重要作用。只有充分挖掘这一资源,利用这一资源,才会使职业院校校园文化的内容更丰富,形式更多样,效果更显著。
(本文系陕西省教育科学“十二五”规划2012年度课题 编号:SGH12568)
参考文献:
[1]杨文钦.高职语文与校园文化建设探讨[J].漯河职业技术学院学报,2009,(06).
[关键词]新疆有色金属上市公司;营运能力;财务分析
[DOI]10.13939/ki.zgsc.2016.42.076
1 新疆有色金属行业简介
近1年来,新疆有色金属和黄金地质矿工作有了重大进展,涉及开发的矿产资源有锂、钹、钽、铌、铜、镍、金、银、钨。已投产的有色金属企业有40多个,绝大多数是小型企业,并以采选为主,中型以上规模的企业有6个。有色金属产量已突破4万吨,黄金产量超过2万吨,年销售总额突破5亿元,初步形成以锂、铜、镍和黄金为重点的资源开发体系。新疆有色金属制造业正在迅猛的发展之中,但是市场上存在着一些不容忽视的问题,比如市场无序竞争、产品质量下降、创新乏力等。而近几年来有色金属的发展步伐已逐渐放缓,有萎缩的趋势。
2 本文研究对象的范围
本文的研究对象是上市公司中有色金属制造业上市公司,新疆以有色金属为经营业务的上市公司为新疆众和、八一钢铁、新鑫矿业、光正钢构、新中基。根据前人对“营运能力”的定义,本文选取了有色金属上市公司营运能力中的五个主要的指标,分别是总资产周转率、流动资产周转率、固定资产周转率、应收账款周转率、存货周转率。
3 营运能力相关指标的计算分析
3.1 总资产周转率
在新疆有色金属上市公司这个总样本中,总资产周转率平均值在2010年至2013年大致走向为上升趋势,而2013年呈明显下降趋势,由0.938次/年至0.611次/年,下降百分比为34.82%。从表中看出新疆有色金属行业的总资产周转率并没有达到国内同行业总资产周转率各年的平均水平,说明新疆有色金属企业较国内同行业比,总资产周转不够及时,资产利用效率不高。
单就每个公司看,与国内行业平均水平对比,在2010―2013年新疆众和、新中基、新鑫矿业的总资产周转率在国内行业平均值以下,光正钢构只有2010年时总资产周转率在行业平均值以上,其余几年均未达到国内行业平均水平,八一钢铁公司的总资产周转率一直在国内行业平均水平之上。
就每个公司各年的总资产周转率变化趋势来看,光正钢构与新中基的总资产周转率走势较为平稳,而八一钢铁、新疆众和属于总资产周转率波动较大的公司,其中八一钢铁属于呈先上升后下降的波动趋势,比之2011年有明显下降,因此整体来说,八一钢铁运用资产的情况有待改善,营运能力还需要进一步提高。
3.2 流动资产周转率
从表中可看出,疆内流动资产周转率平均值在2010年至2013年大致走向为先呈上升趋势,后呈下降趋势,从 2010年到2011年间呈明显增高趋势,由0.73次/年至2.176次/年,疆内流动资产周转率平均值在图中与国内同行业平均水平差值不大,说明疆内上市公司的流动资产的综合使用效率达到了国内同行水平。
从每个公司与国内同行业平均水平对比来看,除了八一钢铁外的四个有色金属上市公司都没有达到行业此指标的平均数值,说明这四个公司的流动资产周转速度慢。此外这四个公司的流动资产周转率变化幅度较为稳定,而八一钢铁的此指标一直高于国内同行业平均水平,且2012年此指标数值有一个骤降,溯其根源,应该是2012 年受国内经济增长放缓、 钢铁行业产能过剩等不利因素影响,钢铁市场需求明显减弱,此企业销量减少导致银行存款应收账款周转不利所致。
3.3 固定资产周转率
在新疆有色金属上市公司这个总样本中,固定资产周转率平均值在2010年至2013年大致走向为先呈上升趋势,后呈下降趋势,在2010―2011年呈明显增高趋势,由1.3次/年至2.67次/年,而在2010―2011年呈明显下降趋势,由2.346次/年至1.159次/年。除新疆有色金属上市公司固定资产周转率平均值波动较大以外,从表中还能看出新疆此指标平均水平略低于国内同行业平均数值。则说明疆内有色金属上市企业对固定资产的利用率较低,利用程度不够。
在各个公司与国内同行业大环境平均水平的对比中,新疆众和、新中基、新鑫矿业均未达到固定资产周转率国内同行业平均值,此指标将受到折旧方法和折旧年限的影响。由于这三个公司的固定资产没有过于陈旧且折旧方法一样,排除此影响,说明这三个企业没有在生产中充分利用固定资产。与此同时,在表中可看出光正钢构与八一钢铁此指标数值大于国内同行业平均水平。
在新疆有色金属上市公司中,各个公司此指标的数值变化波动都比较大,尤其是光正钢构,它由2010年的3.56次/年,下降为2013年的1.25次/年。
3.4 应收账款周转率
在新疆有色金属上市公司这个总样本中,应收账款周转率平均值在2010年至2013年大致走向为先呈上升趋势,后呈下降趋势。2010―2011年呈明显增高趋势,由7.765次/年至945.56次/年,而在2012―2013年呈下降趋势。就新疆与全国同行业比较来看,新疆的应收账款周转率平均水平高于国内同行业水平,但经仔细观察可发现新疆有色金属上市公司中除了八一钢铁外的四家上市公司的指标数值都小于国内同行业平均值,而八一钢铁的应收账款周转率远高于国内同行业水平,说明新疆有色金属上市公司的应收账款收账能力依然有待提高。
3.5 存货周转率
在新疆有色金属上市公司这个总样本中,存货周转率平均值在2010年至2011年呈下降趋势,除此之外从表中还能看出新疆有色金属上市公司的存货周转率状况与全国同行业相比还有一定差距,说明新疆有色金属上市公司存货资产变现能力较弱,存货及占用在存货上的资金周转速度较慢。
从下表中可以看出新中基、新疆众和、新鑫矿业这三家疆内有色金属上市公司的存货周转率达不到国内同行业此指标的平均值,说明这三家公司的存货占用水平较高,存货周转期较长,而光正钢构与八一钢铁的存货周转率高于国内行业平均水平。
从新疆上市公司各年的存货周转率变化幅度来看,新疆众和、新中基的各年水平较为稳定,而光正钢构与八一钢铁的此指标变化波动较大。
综上研究,由新疆与全国对比来看,新疆有色金属上市公司的总资产周转率、固定资产周转率、存货周转率、应收账款周转率都没有达到全国各指标的平均水平,说明新疆有色金属上市公司营运能力与全国相比较弱,而在新疆有色金属上市公司中。光正钢构、八一钢铁的营运能力较强,而新中基、新疆众和、新鑫矿业的营运能力较弱。
4 解决新疆有色金属上市公司营运问题的建议
4.1 建立专门的信用管理机构
企业要想减少坏账损失的发生,就要从源头上找到一条合适的解决途径。企业应该建立专门的信用管理机构,在对客户进行赊销钱时,要有专门人员对客户的信用情况进行调查,对赊销的管理需要大量的专业人员进行调查、分析以及进行专业化的管理和控制,这对于企业的生存发展是十分必要的。企业在信用管理系统中要对客户情况进行详细的记录,建立客户资源管理系统,这样更加便于对客户的风险信用情况进行评价,而且信用管理部门要及时了解客户的情况,及时更新目前的客户状况,对客户的信用以及当前的风险做出合理的评价,这样企业才能收集更多的资料,如果客户出现延迟交款的情况,企业有足够的资料可以保护自身的利益。
4.2 完善企业内部控制,加强监督
减少企业坏账的发生额或者客户拖延付款的情况,企业就要严格控制应收账款,加强企业内部控制,财务部门和信用管理部门要加强对应收账款的管理,并不仅仅局限于销售部门销售的情况,这样才能严格控制应收账款的发生。
4.3 对于逾期应收账款应该加大追款力度或者债务重组
对于逾期应收账款,企业可以派专门管理应收账款的人员加大追款力度,或者同客户进行沟通,在成本效益原则的基础上催收应收账款,不能加大催收费用,当然也不能不积极对账款进行催收,保证企业损失降到最低。另外,企业可以将逾期应收账款让售给金融机构,当然是逾期时间不长的情况下,因为逾期过长,金融机构不会收购应收账款。此外,在客户无力归还货款时,可以采取债务转股权的方式,采取债务重组的方式对客户进行入股,这样可以降低企业的损失,保证企业稳定发展。
参考文献:
[1]汪平.财务理[M].北京:经济管理出版社,2003.
[2]中国注册会计师协会.财务成本管理[M].北京:经济科学出版社,2004.
作者:葛玉霞,段云友,阮骊韬,曹铁生,袁丽君,吕发勤,刘禧
【关键词】 过氧化物酶
【Abstract】 AIM: To investigate the effects of hyperhomocysteinemia HHCY on the function of endothelium by observing the changes of NO, ET and the activity of GSHPX and vascular cell adhesion molecule1 (VCAM1) in plasma of HHCY rabbits. METHODS: Eighteen New Zealand rabbits were randomized into methionine group(group B, n=9)and control group (group A, n=9). Methionine group was fed with methioninerich diet of Lmethioine (0.8 g/kg per day) and normal control group was fed with normal diet. The levels of NO, GSHPX in plasma and the serum concentration of VCAM1 were measured at 20, 40, 60 and 80 d, and endothelium dependent dilation (EDD) and endothelium independent dilation (EID) were examined by high resolution ultrasound. RESULTS: In chronic hyperhomocysteinemia, the EDD of external iliac artery in methioine group was reduced significantly than that in control: 0 d, (15.3±2.6)%, 20 d, (5.1±1.7)%; 40 d, (2.7±1.0)%, 60 d, (-4.1±1.3)% and 80 d, (-5.5±1.3)% (P
【Keywords】 hyperhomocysteinemia/ultrasonography; nitric oxide; glutathione; peroxidase; vascular cell adhesion molecule1
【摘要】 目的: 通过观察高同型半胱氨酸血症(HHCY)时兔血浆一氧化氮(NO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)和血管细胞黏附分子(VCAM1)的变化,探讨HHCY对内皮功能的影响作用. 方法: 新西兰白兔18只,随机分为L蛋氨酸M组(n=9)和对照N组(n=9). 分别喂予添加3%的L蛋氨酸饲料和普通饲料,于0, 20, 40, 60和80 d检测其血浆中的NO, GSHPX及VCAM1的水平,同时利用高分辨力超声检测其髂外动脉的内皮依赖性舒张功能(EDD)、内皮非依赖性舒张功能(EID). 结果: HHCY时,M组兔髂外动脉的EDD较对照组显著降低, 0 d (15.3±2.6)%;20 d(5.1±1.7)%;40 d (2.7±1.0)%;60 d(-4.1±1.3)%;80 d(-5.5±1.3)%;(P
【关键词】 高同种半胱氨酸血症/超声检查; 一氧化氮; 谷胱甘肽;过氧化物酶; 血管细胞黏附分子1
0引言
高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia, HHCY)被公认是一种导致动脉粥样硬化的独立危险因素,大量的研究发现蛋氨酸负荷后HHCY血管内皮依赖性舒张功能下降[1], 同型半胱氨酸可通过氧化应激在动脉粥样硬化过程中发挥作用. 血管细胞黏附分子(VCAM1)能促进白细胞与血管内皮细胞的黏附及相互作用,是动脉粥样硬化早期的促发因素. 国内关于同型半胱氨酸与黏附分子的在体研究尚未见报道,我们旨在通过观察HHCY时兔血浆一氧化氮(NO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)和VCAM1的变化,探讨HHCY导致内皮功能损伤的机制.
1材料和方法
1.1材料
新西兰白兔18只,雌雄不限,体质量2.0~2.5 kg. 兔龄4~5 mo,单笼饲养,由第四军医大学实验动物中心提供. L蛋氨酸购自味の素株式会社,(日本)NO和GSHPX试剂盒购自南京建成生物工程研究所,VCAM1试剂盒购自上海森雄科技实业有限公司. 实验器材: 美国Acuson公司Sequoia512型彩色电脑声像仪,酶标仪为华东电子管厂产品.
1.2方法
1.2.1高同型半胱氨酸动物模型制备将新西兰白兔18只随机分为L蛋氨酸M组和对照N组2组,每组9只,N组动物给予进食等量普通饲料. M组动物给予等量普通饲料中每日添加3 g/L的L蛋氨酸. 分别于0, 20, 40, 60和80 d兔耳缘静脉取血2 mL,室温下3000 r/min离心15 min,取血浆-20℃冰箱冻存,用于检测血浆NO, GSHPX活力和VCAM1浓度.
1.2.2血浆NO浓度检测按试剂盒要求操作,设空白管(不加标本和亚硝酸钠),标准管(加20 μmol/L亚硝酸钠)和测定管内加0.3 mL待测血清,各管混匀放置10 min,3500~4000 r/min离心10 min,取上清液0.8 mL,加入显色剂0.4 mL混匀,15 min后测其吸光度值,在标准曲线(提前制成亚硝酸钠系列溶液)上查找相应的NO浓度.
1.2.3血浆GSHPX活力检测血样的准备与NO测量相同,严格按试剂盒步骤操作,按下列公式计算GSHPX活力. GSHPX活力单位=非酶管A值-酶管A值/标准管A值-空白管A值×标准液浓度(20 μmol/L)×稀释倍数(4.75).
1.2.4血浆VCAM1浓度检测采用双抗体夹心ABCELISA法,用抗兔VCAM1 mAb包被于酶标板上,标准品和样品中的VCAM1与mAb结合,加入生物素化的抗兔VCAM1,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的streptavidin与生物素结合,加入酶底物OPD出现黄色,加终止液硫酸,颜色变深,测A492 nm值,VCAM1浓度与A492 nm值成正比,可通过绘制标准曲线,求出标本中VCAM1浓度.
1.2.5高分辨力超声检测兔髂外动脉内皮舒张功能[2]选用7.0 MHz线阵探头,检测条件选“外周动脉”设置θ角为50°. 兔麻醉后仰面躺于兔台上,四肢外展,接心电图,记录心率,在心率稳定20 min后进行检测. 探头置于兔右侧腹股沟韧带中点内上方,首先二维显示髂外动脉(可上下移动探头,找到髂总动脉分叉后往下即为髂外动脉,若显示困难,可加用彩色寻找). 至少获得2.0 cm以上的长轴切面,以心电图R波为准,测量髂外动脉管腔内膜面间的垂直距离,是为基态内径 (Fig 1),然后用袖套式充气止血带,置于兔右下肢充气加压39.9 kPa,持续6 min,突然放松,在15~30 s内重复内径的测量是为加压后内径(Fig 2). 在兔休息至少15 min,然后舌下滴服硝酸甘油(500 μg)3 min,重复其内径的测量,是为含服硝酸甘油后内径.
内皮依赖性舒张功能(EDD)通过下面的公式计算:EDD%=[(加压后内径-基态内径)/基态内径]×100%
内皮非依赖性舒张功能(EID)通过下面的公式计算:EID%=[(含服硝酸甘油后内径-基态内径)/基态内径]×100%
统计学处理: 所有计量资料均用x±s表示,利用SPSS软件采用重复测量设计的方差分析,P
2结果
2.1慢性HHCY兔骼外动脉EDD的变化M组EDD在各测量时间点均较对照组明显降低(P
2.2慢性HHCY兔血浆中NO, GSHP X活性及s VCAM1定量检测M组兔血浆NO和GSHPX活性较对照组均明显降低(P
3讨论
正常的内皮细胞在各种化学物质和切应力作用下,通过一氧化氮合成酶(NOS)将L精氨酸转化为L胍氨酸,同时释放NO导致血管平滑肌细胞的扩张[3,4]. 本实验结果显示,给兔以高蛋氨酸饮食后,随着时间的推移,血浆NO明显降低,相应超声检测的内皮功能也明显受损,与以往的实验结果基本一致. 此外,血浆NO明显降低的同时,血浆GSHPX活性也明显下降. GSHPX是体内重要的抗氧化酶之一,能有效地清除超氧阴离子、自由基等,而起到保护细胞膜的作用. 因此我们认为HHCY不仅通过氧化应激导致NO的减少,而且还直接破坏抗氧化酶GSHPX的活性,降低机体对NO的保护,最终导致内皮功能的损伤.
VCAM1属免疫球蛋白超家族成员,在血管内皮细胞受损后表达增加,是促进内皮白细胞黏附的主要蛋白. 本研究显示,与对照组相比,HHCY时兔血浆NO水平明显降低(P
综上所述,本研究结果提示在HCY治疗中补充外源性的NO或使用抗氧化剂能够通过干预黏附分子途径来逆转和修复损伤的血管内皮功能,从而可预防或延缓动脉粥样硬化的发生、发展过程.
参考文献
[1] Stuhlinger MC, Oka RK, Graf EE, et al. Endothelial dysfunction induced by hyperhomocysteinemia: Role of asymmetric dimethylarginine [J].Circulation, 2003;108(8): 933-938.
[2] Celemajer DS, Sorensen KE, Gooch VM, et al. Noninvasive detection of endothelial dysfunction in children and adults at risk of atherosclerosis [J]. Lancet, 1992;340(3):1111-1119.
[3] Morita H, Kurihara H, Yoshida S, et al. Dietinduced hyperhomocysteinemia exacerbates neointima formation in rat carotid arteries after balloon injury [J]. Circulation, 2001;103 (1) :133-139.
[4] 阮骊韬,曹铁生,段云友, 等. 不同浓度的HCY对培养的人脐静脉内皮细胞NO及eNOS转录水平的影响[J]. 第四军医大学学报,2003;24(18):1697-1700.
Ruan LT, Cao TS, Duan YY, et al. Effects of HCY at different concentrations on NO and eNOS RTPCR in cultured HUVEC[J]. J Fourth Mil Med Univ, 2003;24(18):1697-1700.
[5] Shimpo M, lkeda U, Maeda Y, et al. Effects of asprinlike drugs on nitric oxide synthesis in rat vascular smooth muscle cells[J]. Hypertension, 2000;35(5):1085-1091.
摘 要:目的:观察肺瘤平膏及其拆方干预体外培养体系中Dc抗原递呈功能的作用并探讨其分子机制。方法:建立体外人血PBMc诱导分化成熟Dc的诱导培养体系,从健康人外周血中分离获得PBMC,采用多种细胞因子(TNFα、IL-4、GM-CSF)联合诱导,获得了分化与功能相对成熟的DC,并采用流式细胞仪检测技术,对肺瘤平膏及其拆方含药血清干预成熟DC与抗原递呈功能相关表面分子表达,及其对DC分泌IL-12水平影响进行初步研究。结果:肺瘤平膏可上调DC与抗原递呈功能相关膜分子MHC-Ⅱ、CD80、CD83、CD86及CD40的表达,并促进Dc分泌IL-12水平,其芳中扶正部分的作用不容忽视。结论:在扶正培本治则指导下的肺瘤平膏能够调节DC抗原递呈功能,提高机体的抗肿瘤免疫监视功能。
关键词:树突状细胞:肺瘤平膏:抗原递呈
树突状细胞(Dc)是目前体内已知功能最为强大的抗原递呈细胞(antigen presenting cells,APC),其最显著的特征是能摄取、加工及递呈抗原,刺激初始型T细胞(naive Tcells)的活化和增殖,从而启动机体早期特异性抗肿瘤免疫应答。由于DC对细胞毒T细胞(CTL)识别并杀伤肿瘤细胞,以及正常机体免疫监视功能有着十分重要的意义。本研究通过对肺瘤平膏及其拆方干预健康人外周血经多种细胞西子(TNFα,IL-4、GM-CSF)联合诱导分化成熟DC膜分子表达,揭示该药调节早期抗肿瘤免疫作用机制。
1 材料和方法
1.1 材料
正常人新鲜浓缩白细胞:由北京市红十字会中心血站提供。
1.2试剂及仪器
Ficoll,Biosciences公司提供;Foetal calf 8erlLrn,Sigma公司提供;MHC-Ⅱ(FITC)F-Mab、CD40(FITC)F-Mab、CD80(FITC)F-Mab、CD83(PE)F-Mab、CD86(PE)F-Mab由Biolegend公司提供;rhTNF-α、rhIL-4、rhGM-CSF由TBDSCIENCE公司提供;IL-12兔抗人ELISA试剂盒,由武汉博士德生物工程有限公司提供。
FACSort流式细胞仪,美国Becton Dickinson公司生产;LP400型全自动酶标仪,为法国巴斯德公司产品。
1.3 方法
1.3.1 肺瘤平膏及其拆方含药血清的制备分别制备肺瘤平膏全方、益气方(黄芪、党参)、解毒方(白花蛇舌草、草河车、败酱草)、益气解毒方(白花蛇舌草、草河车、败酱草、黄芪、党参)中药的含药血清,具体方法如下。
①药物:肺瘤平膏,由中国中医科学院广安门医院制剂中心统一制备,批准文号:(98)京卫药研字[058]DF-1657号;经生理盐水稀释为终浓度为1.71g/mL后备用。其余各拆方草药均购自广安门医院中药房,剂量以原方为准,制成浸膏后备用,其终浓度为分别为含生药2.32、3.62、2.77g/mL。②动物:大白兔。③血清采集方法:大白兔随机分为5组,分别于空腹时灌服生理盐水和各组中药汤剂10mL,中药用药剂量均按照动物体表面积折算成等效剂量,连续给药4天,共计7次,末次给药后2h从兔耳缘静脉采血8-10mL,离心取上清夜,将同组兔血清混合,56℃水浴灭活30min,0.22μm微孔滤膜除菌,分装,置于-20℃冰箱中保存。
1.3.2 DC的培养与鉴定①DC培养:采集正常人外周血浓缩白细胞,Ficoll―Hypaque密度离心分离PBMC,将经分离得到的PBMC,置入37℃5%CO2培养箱中培养2h。采用贴壁法,去除巨噬细胞,加入含有细胞因子完全PMI一1640液(含IL-4 IOOU/mL、GM-CSFIS0ng/mL、TNK-αS00U/mL)。置入37℃,5%C02培养箱中培养,隔日半换液。在倒置显微镜下每日连续观察细胞的生长状态及形态变化。待成熟后,1%胎盘兰染色,光镜下细胞计数后,根据需要,将细胞数调整到1×106/mL备用。分别用MHC-Ⅱ(F1TC)、CD80(F1TC)、CD83(PE)、CD86(PE)、CD40(F1TC)标记后,常温下静置30min,加入PBS,1500r/min,10离心洗脱,流式细胞仪检测其纯度及表达。
②DC形态学特征及组化鉴定:光镜下形态学特征观察:于倒置显微镜下,每日观察细胞的生长状态及形态学变化,并拍照记录。扫描电镜观察:将培养第10天收获得到的DC滴于多聚赖氨酸包被的玻片,37℃温育4h后,用2.5%戊二醛固定1h,0.01M PBS冲洗3次后,1%锇酸固定90min,梯度30%、50%、70%、90%、100%乙醇脱水,扫描电镜观察细胞形态,摄片。
S-100蛋白免疫组化染色:吸取培养第10天的DC。均匀涂片,I抗用鼠抗人S-100单克隆抗体,按SABC-AP常规免疫组化方法,进行染色。对照组用PBS代替I抗。中性树酯封片。光镜下观察200个细胞并计算阳性细胞的百分率,摄片。
1.3.3 DC表面分子流式细胞仪检测成熟DC分为6组:全方组、益气方组、解毒方组、益气解毒方组、DC对照组及单核细胞组。于DC培养第4天,细胞中加入相应的中药含药血清1mL,空白血清组加入不含药血清lmL,终浓度约为17%;DC对照组及单核细胞组中加入不完全1640液1mL;隔日半换液。每日倒置显微镜下观察其生长状态及形态的变化。
采用双标法,将培养第10天PBMC及IX:分别采用MHC一Ⅱ(FITC)、CD80(FITC)、CD83(PE)、CD86(PE)、CIMO(FITC)FITC威PE标记的荧光探针,常温避光,反应30min。洗脱未结合探针,流式细胞仪测定。FITC―IgG1、PE-IgGl阴性参照抗体(购自Biolegend公司)。同样实验重复3次,取均值,记录结果。
1.3.4 DC培养上清分泌IL-12水平的检测于培养第10天收集各组DC,离心后吸取上清,按照人血清IL-12ELISA试剂盒说明书,常规操作;室温下,用酶标仪于530nm波长处,检测OD值;根据标准曲线,换算成IL-12含量(pg/mL)。
1.4 统计学方法
采用t检验和方差分析。
2 结果
2.1 DC鉴定
2.1.1 人外周血来源DC的形态学特征观测 倒置显微镜观察:在培养初期细胞贴壁生长,有的呈簇状聚集,第3日细胞逐渐散开,并从壁上脱离,细胞形态各异,有的呈梭状,以悬浮生长为主。培养5天后,胞体明显增大,大小约
为单核细胞的2-3倍,形态不规则,异型性较大,细胞表面伸出伪足或呈毛刺状,呈现典型的树突状细胞形态特征。扶正方组细胞体积及核仁增大明显,有的细胞伸出较长的树枝样突起;而未经对照组的DC,仅个别细胞有突起,胞体也较前为小解毒方组细胞贴壁较多,生长状态欠佳;其他各组细胞在数量和形态上与对照组无显著差异。
2.1.2 DC扫描电镜形态学特征扫描电镜下可见,成熟DC细胞形状不规则,细胞表面可见大量的折叠结构,可见球茎状,泡状,薄片状,丝棒状等突起,长短粗细不一。
2.1.3 DC表面分子S-100蛋白免疫组化染色光镜下观察,阳性细胞浆着色较深呈紫红色,胞核为淡橙红色,胞体不规则,边缘有突起。细胞阳性率>99%。
2.1.4 体外单核细胞与成熟DC膜表面分子表达的变化在富含GM-CSF、TNFα、IL-4的诱导体系中培养10天,与非诱导培养的PBMC比较,成熟DC表达MHC-Ⅱ+99.5%、CD80+99.2%、CD83+99.42%、CD86+93%、CD40+96.96%。而体外培养的单核细胞低表达MHC-Ⅱ41.1%、CD80 27%、CD40 28%,不表达或极低表达CD83、CD86及分子等成熟DC的膜表面标志。
2.1.5 肺瘤平膏及其拆方对DC膜表面分子表达的影响经诱导培养第10天,对照组DC与PBMC比较,膜表面高表达MHC-Ⅱ及CD80、CD83、CD86、CIM0等共刺激分子,与成熟DC抗原递呈功能相关各膜分子的荧光强度显著升高。其中以MHC-Ⅱ、CD86、CIMO于DC表面荧光强度最高。益气组对上述DC膜分子表达的影响优于其他拆方组,而解毒组则呈现抑制DC表面分子表达的趋势,但益气解毒组则上调DC膜表面分子的表达。结果表明,肺瘤平膏可明显上调DC膜表面与抗原递呈相关的膜分子的表达水平,方中益气组的作用最为明显。
2.1.6 肺瘤平膏及其拆方对体外培养DC分泌IL-12功能的影响经诱导培养第10天,DC。与PBMC比较,IL-12表达量明显升高(P<0.05)。中药含药血清可明显促进体外培养DC的IL-12分泌水平(P<0.05或0.01),其中益气组优于对照组。结果表明,扶正中药(益气为主)可促进DC体外IL-12的分泌。
3 讨论
3.1 人外周血DC培养体系的建立
笔者采用密度梯度离心及贴壁法收集并分离人外周血单核细胞(PBMC),采用粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL=4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)联合刺激培养体系,诱导DC的增殖与分化。体外培养第9-14天,S-100蛋白免疫组化染色,倒置显微镜、扫描电镜、激光共聚焦显微镜成像观察,表现为典型的成熟DC的形态学特征。ELISA检测DC的IL-12分泌水平,流式细胞仪表面标志分析结果均证实,经该法诱导成熟的DC高表达与抗原递呈功能相关的IL-12,表面分子MHC-Ⅱ、CD80、CD83、CD86、CD40。其中CD40分子的表达率(96.96%)明显高于国内报道(44%),可能与细胞因子的比例不同有关。以上研究结果表明采用本方法建立的体外培养体系是稳定和成功的。
3.2 拆方研究的必要性
拆方研究是近年来研究中药复方药理学的常用方法,已有许多关于中药复方拆方研究实验药理学研究的报道。多数研究是通过拆方比较药理作用的差异,阐述方中药味对全方药理作用的贡献和地位。拆方研究不仅有助于解释中药复方的配伍、组方的科学意义,还有助于揭示中药复方的作用机制。一般认为,中药复方的药理作用是方中药物所含多种成分作用的综合效应,其中多种成分的相互作用与其药效的最终表现具有密切关系。拆方研究为全方药理作用和作用机制的研究提供了一个视角,可获得许多信息,因此拆方研究不仅对于阐述中药复方的配伍原理有所帮助,也是中药复方药理作用机制研究的一个重要手段。本次研究依照肺瘤平膏的立法原则,将原方拆解为益气方、解毒方、益气解毒方,通过观察肺瘤平膏及其拆方对树突状细胞抗原递呈功能的影响,探究扶正培本治则在肿瘤治疗中的地位,以期更好地指导临床实践。
3.3 肺瘤平膏及其拆方对DC抗原递呈功能的影响
在DC刺激T细胞活化中,需要由MHC-Ⅱ及TCR/CD3介导的特异性抗原刺激,以及T细胞与抗原递呈细胞(APC)膜表面共刺激分子对的结合,即双信号的刺激。成熟DC组成性高表达MHCⅡ分子,高表达黏附分子和共刺激分子CDS0(B7-1),CD86(B7-2),CD40,CD54(ICAM-1),CD44等是其递呈特异性抗原并有效活化T细胞的分子基础。其表面分子的表达水平也是衡量DC成熟与抗原递呈功能的重要标志。为中西医结合调节DC抗原递呈功能的应用与研究提供了重要的切入点。
通过对中药复方含药血清干预体外培养人外周血DC表面分子表达的研究,初步证实扶正中药(益气为主)可明显上调DC膜表面分子MHC-Ⅱ、CD80、CD83、CD86及CD40的表达水平,从而促进DC的成熟与分化;而祛邪中药(解毒为主)对DC膜表面分子CD83、CD86的表达有下调趋势,不利于DC的进一步成熟,但当此两组中药合用的时候,CD83、CD86的表达又得到上调;全方的DC膜表面分子表达水平最高。本研究显示,以益气为主的扶正中药可明显促进体外培养DC的IL-12分泌水平,说明该复方发挥抗肿瘤免疫调节机能的作用机制之一可能与益气药物促进DC分泌IL-12的水平有关。