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关键词: 化学制药 基础化学实验 形成性评价
基础化学实验是化学制药技术专业的职业素质课程,内容涵盖无机化学实验、分析化学实验和有机化学实验。基础化学实验是化学制药技术专业学生步入大学后接触的第一门实验课程,基础化学实验课程的教学目标是习得基础实验知识,掌握基本实验技能,养成良好的实验态度与习惯,并为后续的药物分析、药物合成等后续课程打下坚实的基础。
一直以来,化学制药技术专业的基础化学实验的评价考核中都是作为相应的理论课程学业考评的一部分进行,考核的形式以试卷书面为主,考核的内容主要是实验的现象与数据的处理与运算。但基础化学实验作为实践课程,仅仅依靠对学生试卷完成情况进行评价并不能客观、准确地反映学生真实的学习水平。为此,笔者探索在化学制药技术专业的基础化学实验课程的学业评价体系进行改革,以使考核的结果更能真实地反映学生的实际学习情况,提高基础化学实验的教学质量。
1.引入形成性评价体系
在化学制药技术专业的基础化学实验考评中引入形成性评价体系代替传统的终结性评价。引入形成性评价的目的是通过师生共同监控、反思与调节教学的全过程,开发学生的潜力,改进学生的学习方法,提高教育教学质量[1]。形成性评价可以动态反映学生学习状态的评价体系,持续性地从知识、能力、素质等三个方面动态评价,既重视学生基础化学实验最基本知识和能力的掌握的情况,又体现以人为本,关注不同学生的接受程度,使学生的培养不拘泥于单一死板的考核指标,全面科学地对学生的学习情况进行评价,从而有助于提高学生的专业素质。
2.实验教学内容革新
基础化学实验考核革新作为化学制药技术专业课程改革的组成部分,其思路是知识、能力和素质并重,以考核的革新推动整个化学制药技术专业课程的全面革新。在基础化学实验课程中进一步加强对基本知识和基本技能的掌握程度考核,2009―2014年我系每年都组织全系性的大型实验基础技能大赛,以初赛、决赛和总决赛的形式进行层层选拔,对基本技能掌握优异的学生进行奖励和表彰,并将优胜者的成绩记入学业考评成绩,极大地提高学生对原本单调、枯燥、重复的基本技能训练的兴趣,学生间的相互比拼能让学生发现自身实验技能上存在的不足,更好地帮助学生提高操作技能。
在加强学生基础化学实验的基本技能培养的同时,增加综合型与设计型实验所占的考评比例,由于基础化学实验是大一阶段开设的课程,学生开展综合性和探究性实验的经验还比较欠缺,这个阶段一般可以采取PBL教学模式,由教师的设定需要解决的问题,学生以学习小组的模式开展探究,由小组设计初步的实验方案,师生共同对方案进行讨论完善,教师提供创新型实验活动的平台,在教师的辅导下学生小组配合共同完成实验的探究。教师根据学生实验方案的设计、团队协作和具体实验操作与数据处理分析情况进行评价,并将评价结果记入学业成绩,督促学生自觉参与到实验探究过程中,增强学生运用自身知识与技能解决问题的能力。
3.开放实验室改革
基础化学实验由于其内容局限于无机化学实验、有机化学实验和分析化学实验,各实验室所配置的仪器基本都是以玻璃仪器为主,辅以少量的检测、合成设备的,不能高精度的测定与大型的综合合成实验。一直以来基础化学实验室的开放仅限于相关课程的使用和少量的学生课外活动,实验室的开放率和设备的利用率都很低。在基础化学实验考核的改革中,要想真正取得实效必须坚持以人为本,灵活开放实验室,切实提高实验室的有效利用率,除保证正常实验课的使用要求外,合理设置实验室值班教师和学生助理,配合完成实验内容的革新的学生自主设计完成实验或者学生个人针对自身实验技能欠缺所进行的针对性训练。
4.改革基础化学实验的日常教学与教材
基础化学实验的考核革新要取得实效,不仅考核的内容与形式要革新,而且日常的实验教学也要革新。目前的基础化学实验教学由于实验涉及的科目与范围广,实验需要完成的内容繁重,实验指导教师在有限时间内要完成规定的教学任务,多采取实验室现场讲解与示范的教学形式。学生按照教师的示范完成实验,缺乏独立思考与反思,长此以往,学生对教师的讲解与示范产生依赖性,懒于预习实验,机械地模仿教师完成实验,看似规范的操作与合理的数据处理,实则缺乏独立自主的动手能力及思维能力,完全流于形式,更谈不上培养学生的创新意识,学生并没有真正掌握应该实验目的所要求的知识与技能。
为了改变这种学习状况,实现基础化学日常教学的革新,首先必须对实验教材进行革新,在实验教材作为实验进行时的指导教材的基础上,教师根据实验项目所涉及的基本操作和实验项目所必须掌握的相关理论知识编写讲义,在配合实验室开放的前提下,在实验开始前教师对于学生以学习小组的形式在实验室进行讲解与示范,学生利用课余时间自行在实验室操作练习和查阅相关资料学习相关理论知识,在实验正式开始前完成指定的预习任务。实验教师在实验正式开始前对学生以抽问的形式检查学生的预习情况,并进行记录作为评价成绩的组成部分,督促学生自觉完成相关预习任务。在实验项目正式开始时,实验教师将主要精力放在实验设备用法、解答学生在课前练习中出现问题的提问、监控学生独立完成实验结果的验收和评定上。这样的改变既能照顾学生对于技能掌握的个人差异,实现以人为本,为不同层次的学生提供充分的练习机会,又能有效利用课堂教学时间,实现基础化学实验课设定的教学目标,提高实验课堂教学效率。
5.形成性评价比例的构成
为确保基础化学实验的教学质量,体现化学制药技术专业应用型的特征,我们在设计基础化学实验的形成性评价分值构成按照2∶3∶2∶3的比例进行评价。其中20%为课前的预习情况评价,主要对学生对实验项目所必需的技能与知识的预习掌握情况进行评价;30%为实验项目的具体操作的评价,主要是学生实验项目的操作流程的规范性、科学性及实验相关的专业素养的评价;20%为实验报告的评价,主要是学生对实验现象的观察与记录,实验数据分析与计算能力,以及科研态度的评价;30%是学生完成综合性和设计性实验的评价,主要是学生运用已有知识与技能,开展科学探究与团队合作情况的评价。
6.新型考核评价的效果
通过化学制药专业的基础化学实验的形成性评价体系的革新,更突出了对学生的学习过程的评价,督促学生养成良好的实验态度与习惯,提高学生的专业素养,为后续的实践课程的学习打下坚实的基础。2010年基础化学实验作为重庆第二师范学院院级精品课程《基础化学》的实验部分接受有关部门的考核合格。2009―2014年化学制药专业学生的基础化学实验部分成绩稳步提升,在历年的学院教学年度评比中学生满意率保持在98%以上,相关教师参加学院各种比赛获得一、二等奖三次,取得了优异的成绩,有力地促进了化学制药专业的教学改革,提高了教学质量。
经过几年的不断探索与完善,在化学制药技术专业基础化学实验的考核评价体系取得初步成功的基础上,我们在该专业的其他职业素质课也逐步开始推广,并根据具体的课程特征对本考核评价方案进行调整,以适应现代社会对化学制药专业人才提出的新要求。
参考文献:
【关键词】化学植筋技术;建筑结构加固工程;技术应用;概况;注意事项
一、化学植筋技术的概况
植筋就是种植钢筋,为了加固建筑物或是续建,在原建筑上钻孔,插入钢筋,用特用胶水灌缝,使钢筋锚固在其中,钢筋和原建筑将成为一体。植筋技术是运用高强度的化学粘合剂,使钢筋、螺杆等与混凝土产生握裹力,从而达到预期效果。施工后产生高负荷承载力,不易产生移位、拔出,并且密实性能良好,无需做任何防水处理。由于其通过化学粘合固定不但对基材不会产生膨胀破坏,而且对结构有补强作用,施工简便迅速安全并符合环保要求,是建筑工程中钢筋混凝土结构变更,加固的最有效的方法。它可以应用在各类建筑结构增建、变更等预留钢筋锚定中,还可以用于横梁、柱头、楼板、剪力墙等加固预留钢筋锚定中,也可用于各类钢结构、机械设备等的螺杆锚定中。它主要的技术特点就是:(1)具有高的承载力(剪力、拉力)。(2)对固定的基材不产生膨胀力,适宜边距、间距小的部位。(3)施工简便,时间短。
二、化学植筋技术在建筑结构加固施工中的应用
1、弹线定位。根据设计图的配筋位置及数量,错开原结构钢筋位置,标注出植筋位置。请有关部门验线,合格后就可钻孔。
2、钻孔。用冲击钻钻孔,钻头直径应比钢筋直径大5mm左右,钢筋选用首钢生产的φ25钢筋,钻头选用φ30的合金钢钻头。孔深大小15d(375mm),实际钻深400mm.钻孔时,钻头始终与柱面保持垂直。
3、洗孔。洗孔是植筋中最重要的一个环节,因为孔钻完后内部会有很多灰粉、灰渣,直接影响植筋的质量,所以一定要把孔内杂物清理干净。方法是:用喜得利毛刷(这种毛刷不掉毛),套上加长棒,伸至孔底,来回反复抽动,把灰尘、碎渣带出,再用压缩空气,吹出孔内浮尘。吹完后再用脱脂棉沾酒精或丙酮擦洗孔内壁。但不能用水擦洗,因酒精和丙酮易挥发,水不易挥发。用水擦洗后孔内不会很快干燥。钻孔清洗完后要请设计等有关单位验收,合格后方可注胶。
4、注胶。取一组强力植筋胶,装进套筒内,安置到专用手动注射器上,慢慢扣动板机,排出铂包口处较稀的胶液废弃不用,然后将螺旋混合嘴伸入孔底,如长度不够可用塑料管加长,然后扣动板机,板机孔动一次注射器后退一下,这样能排出孔内空气。为了使钢筋植入后孔内胶液饱满,又不能使胶液外流,孔内注胶达到80%即可。孔内注满胶后应立即植筋。
5、植筋。在注胶前梁底模板就已支好,便于植筋后钢筋定位。植筋前要把钢筋植入部分用钢丝刷反复刷,清除锈污,再用酒精或丙酮清洗。钻孔内注完胶后,把经除锈处理过的钢筋立即放入孔口,然后慢慢单向旋入,不可中途逆向反转,直至钢筋伸入孔底。
6、固化养护。钢筋植入后,在梁底模板上定位,在强力植筋胶完全固化前不能振动钢筋。强力植筋胶在常温下就可完成固化,50h后便可进行下道工序施工。
7、检测试验。在植筋施工前,要对所用钢筋及植筋胶进行现场拉拔试验,以确定钢筋及植筋胶是否符合设计要求。
方法:制作与要植筋部位混凝土构件相同强度等级的混凝土试件,按植筋步骤,植入3组钢筋,待植筋胶完全固化后,进行拉拔实验。实验用专用的钢筋测力计,当加力达到Ⅱ级钢筋屈服强度(450N/mm2)时,出现颈缩现象,继而拉断。测试时测力计施加于卡具的力应符合FC≥FYK(FC:测力计施加的力,N/mm2;FYK:钢筋的屈服强度,N/mm2)
试验证明:植筋用的植筋胶强度大于钢筋的屈服强度,植筋的破坏是钢筋的屈服破坏,不是胶的粘结破坏,这表明钢筋和植筋胶都是合格的。植筋后进行非破损性拉拔试验,用来检测工作状态下的植筋质量,检测的数量是植筋总数的10%。
检测中,测力计施加的力要小于钢筋的屈服强度、大于由设计部门提供的植筋设计锚固力值。公式为:FM
8、绑筋、支模、浇注混凝土。钢筋在抗拉拔试验合格后就可按施工图开始绑筋、支模、浇注混凝土。
三、化学植筋技术应用的注意事项
1、清孔一般可按以下方法进行:对孔内的积水与异物等进行清除时,可将风机加上导管伸入孔内进行吹干、吹净,也可以采用高压水进行冲洗;根据孔内的干燥程度适当地选用加热杆烘干或自然风干,以不向外排放热气为准;用棉丝来擦拭孔内粉尘,再用丙酮来清洗孔壁。清孔一定干净、彻底。当采用高压水清孔造成孔内较湿时,必须在植筋前采取有效措施来使孔内保持干燥。清孔完毕后要立即植筋,间隔时间如果过长,要用棉花球把孔堵塞,防止掉落物进入孔内。
2、如果钢筋局部锈蚀,可以用人工钢丝刷或电动钢丝刷,来对钢筋表面的锈蚀部分进行清除,直到有金属光泽露出为止,当达到一定批量后进行验收,验收合格后方可使用。钢筋的选用需注意钢筋锚固部位是否遭到油污污染,如存在污染可用沾有丙酮的棉花球进行擦洗,如果钢筋遭到的油污污染比较严重或受到较为严重的锈蚀则不能作为植筋使用。
3、植好的钢筋必须要采取合理有效的措施加以保护与固定,在24小时之内要防止钢筋受到施工人员的扰动。若发现钢筋受到十分大的扰动,必须将受扰动的钢筋马上拔出,重新植筋。如果发现施工场所的平均温度比锚固胶的固化温度低,必须停止施工,或采用电炉、碘钨灯、 水浴等增温方式对胶使用前进行预热至30℃~50℃左右,建议对锚固部位也采取一定的加温措施,并维持在24小时以上。
四、结束语
综上所述,目前我国建筑业经历了蓬勃发展的数十年,随着人们生活水平的进一步提高,人们对建筑功能的要求越来越高,越来越感到已有建筑的规模和功能不能满足新的使用求,而且原有建筑的低标准、建筑的老龄化和长期使用后结构功能的逐渐减弱等引起的结构安全问题已开始引起人们的关注。随着人们环保意识的加强,将走持续发展道路作为21世纪人类社会发展的主体,已在全世界范围内形成共识。建筑化学植筋技术现已在加固改造工程中广泛使用,其优点很多。为了保证施工质量,在进行植筋时必须要按照规范要求进行合理设计,同时严格控制施工过程中的钢筋处理、固定养护与清孔等环节,实现建筑加固施工的目的。
参考文献:
[1]刘迪.宋晓胜.化学植筋技术应用中应注意的几个问题[J].四川建材,2009,(01).
[2]郭俊雄.浅谈植筋技术加固原理及施工质量的控制[J].内江科技,2009,(10).
[3] 吕如楠,沈中标,程跃建. 浅谈加固改造工程中植筋质量控制[J]. 江苏建筑. 2010(01)
关键词:B/S架构 无纸化考试
中图分类号: TN927.22 文献标识码:A 文章编号:1007-9416(2015)12-0000-00
1 系统设计分析
传统考试流程复杂,一直困扰着广大教育工作者。从命题出卷、组织人员考试到批阅试卷等多个环节,都导致考试的耗时长、效率低,而且一旦受人为因素影响,还会干扰考试秩序。本系统经过需求分析、可行性分析,系统设计等环节, 验证了无纸化考试系统的存在价值,克服了传统考试的弊端,从而减轻劳动力强度、提高工作效率、提高经济效益。
1.1操作简易性
系统操作简单,基于Microsoft平台开发,用户操作遵循Microsoft软件的设计准则,采用 B/S架构,不需要安装客户端,只需要通过浏览器就可以考试,使操作者灵活运用程序,既要兼顾教师更要方便学生,同时要对容易操作出错的地方给予温馨提示,并提供相应的返回或更改操作。
1.2 功能强大、拥有丰富的题型支持
适用于SQL Server 2005以上版本、4.0框架和B/S架构。题型设有单选题、多选题、判断题、填空题、操作题。其中,客观题系统完全自动评分,主观题中操作题型的评分规则可以设置人工批改和自动批改两个部分,系统设计预警技术、网络安全技术、网络摄影技术等。
1.3系统具有安全保护机制
针对考试安全保护机制,设置生成试卷的方式,分人工组卷、随机组卷,采用随机取题技术、随机打乱选择题候选项、随机打乱试题排列顺序,确保系统自动抽取的任何一套试题是完整的,每一位考生之间的试卷都是不同的。还支持断电、死机及在线监考等处理方案,防止考生舞弊,提高考试的权威性和公正性。
2 系统结构设计
2.1基于B/S构架的三层体系设计
本系统采用基于Web的三层B/S(Browser/Server)架构,只需要安装维护一个服务器(Server),客户端则采用浏览器(Browser)运行软件。它是随着Internet技术的兴起,对两层C/S(Client/Server)结构的一种变化和改进,三层分为表示层、业务逻辑层和数据层。分层是为了实现“高内聚、低耦合”,采用“分而治之”的思想,把问题划分开来各自解决,易于控制,易于延展,易于分配资源,并有利于系统的开发、维护、部署及扩展, 是一种全新的软件系统构造技术。
(1)表示层。用户利用浏览器直接访问操作系统,即系统的用户界面,向上对应用层服务,向下接受来自会话层的服务。用于数据录入,数据显示等工作,只做与外观显示相关的工作。
(2)业务逻辑层。在体系架构中处于十分关键的位置,位于表示层与数据访问层中间,起到了数据交换中承上启下的作用。主要处理一些有效性验证的工作,以更好地保证程序运行的健壮性。诸如:对数据进行Select,Insert,Update,Delete等业务;不允许指定的文本框中输入空字符串,数据格式是否正确及数据类型验证;通过以上的诸多判断以决定是否将操作继续向后传递,保证程序的正常运行。
(3)数据层。数据访问层又称持久层,其功能主要是负责数据库的访问,可以访问数据库系统、二进制文件、文本文档或是XML文档。实现对数据表的Select,Insert,Update,Delete等操作。需要强调的是,所有的数据对象仅在这一层被引用,如:System.Data.SqlClient等。
2.2无纸化考试系统的功能模块
无纸化系统从开发角度和应用角度来看,三层架构比二层架构优势更多,诸如:处理能力强、性能高、系统安全可靠等特点,同时适合团队开发,只需要少数的人对系统全面了解即可,每人可以有不同的分工,协同工作使效率倍增。结合实际情况,基于B/S架构的《大学计算机基础》无纸化考试系统的设计模块如图1所示。
图1: 无纸化考试系统结构设计图
无纸化考试系统进入端口分为学生端口、教师端口、管理员端口,学生进入系统有两种方式:一种方式教师通过教师端口中用户管理进行批量导入或单个增加,另一种方式是学生注册,教师审核后方可进入登录界面,登录成功则可以进入在线考试与查询界面,相反返回重新登录。当出现“同意考试规则”,点击同意就可以进入考试。在考试期间将有倒计时提醒考生考试进展情况,考试时间在正常的范围内可以正常交卷,超过时间系统会提示自动交卷,教师通过教师端口登录,可进行试卷生成、题库管理、成绩管理。管理员通过管理员端口可以进行用户管理和网络管理。
2.3无纸化考试系统的应用技术
为实现系统的各功能,更好完成本《大学计算机基础》无纸化考试系统设计,系统采用如下技术:
(1)技术。是一种微软公司开发,建立动态Web应用程序的一种技术,是.NET框架的一部分,包含大量重复使用类的集合,可以使用任何.NET兼容的语言来编写应用程序。
具有以下有点:①制作的页面都能被编译,比传统的ASP快很多。②更好的语言支持,大量的用户控件,基于XML组件,并集成了用户验证。③可以使用VB和C#作为开发语言比脚本语言更出色。④当浏览器请求文件时,的引擎进行读取、编译、执行文件,将普通的HTML文件返回浏览器,提高系统的安全性。
(2)SQL Server 2005技术。SQL Server 2005 是一个全面集成的,端对端的解决方案,通过提供一个集成的管理控制台来管理和监视SQL Server关系型数据库。它通过集成服务、分析服务、通知服务、报表服务、分布式服务器以及数据库上的SQL Mobile,大大简化了管理的复杂度。并且在数据库核心方面同时也作了很大改变,将.NET整合到数据库引擎中,开发人员可以应用原有的T-SQL语法进行开发,还可以使用.NET语言。
(3)技术。技术是微软提供的面向对象,基于.net框架结构数据库访问技术,本系统利用提供对象,通过SQL Server 2005 查询语言可以存取数据库内的数据。同时,可以将数据库中的数据以XML可扩展标记语言的方式传送到客户端,客户端不需要和数据库建立联系,当客户端对数据进行Select,Insert,Update,Delete等业务时,在和数据库建立链接。
技术的优势:①支持XML标准。②支持N层编程,核心技术使用DataSet断开式数据集。③能在断开与数据源链接的环境下工作,减少与数据库链接的次数,提高存取数据的效率。
3 系统测试
所谓测试是对整个无纸化考试系统的工作环境进行测试包括外部环境和内部环境,将已经确认的计算机硬件、计算机软件、网络设备等投入到一起测试,完成信息系统的各种组装,验证系统是否合格,不断的查找出问题出处,进行反复调试,分析问题的原因和具置,提出更加完善的解决方案,进行改正,最终确保各个组成部分能够经得起各种考验,保证系统的正常运行。
4 结语
无纸化考试系统采用B/S架构的三层模式、应用技术、SQL Server 2005技术、技术的详细描述,分析他们的优缺点,对系统进一步完善和科学合理的决策,经过反复对系统检测,达到用最少的时间,最少的工作量,较低的设计成本发现深层次的设计问题,进行修正,保证系统的正确性和完善性。当然,我们还会根据实际情况,对系统在应用过程中存在不合理现象进行改进,让《大学计算机基础》无纸化考试系统创造更多价值。
参考文献
【摘要】
目的: 制备去甲雄三烯醇酮(又称群勃龙,trenbolone,TR)抗体以建立TR特异性检测方法。方法: TR与琥珀酸酐反应生成TR半琥珀酸酯(TRHS),采用混合酸酐法和对乙基N,N二甲基丙基碳二亚胺(EDC)法将TRHS与牛血清蛋白(BSA)偶联制备其偶联物;质谱、核磁共振分析偶联结果;免疫家兔并用双向免疫扩散和ELISA检测抗血清效价,判断偶联物的免疫原性。结果: 经质谱鉴定显示,所获得的修饰物TRHS相对分子质量为370;核磁共振分析表明,各吸收峰与理论相符;基质辅助激光解析电离飞行时间质谱图谱分析表明,TRBSA相对分子质量明显增加、紫外最大吸收峰漂移;TR与BSA混合酸酐法和EDC法偶联比分别为1∶18和1∶12;混合酸酐法偶联物免疫家兔获得的抗血清效价ELISA测得TR特异性抗体效价为1∶320 000;双向免疫扩散测得的抗血清效价为1∶16。结论: 成功制备了具有明显免疫原性的TRBSA偶联物,为TR单克隆抗体的制备和建立TR残留量的快速检测方法奠定了基础。
【关键词】 去甲雄三烯醇酮; 半抗原修饰; 偶联; 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱
[Abstract]Objective: To prepare trenbolone(TR) complete antigen and identify the antigenicity of TR. Methods: TRhalfsuccinate(TRHS) was produced by TR reacting with succinic anhydride, the mixed anhydride and the [3mercaptopropionic acid, 1ethyl3(3diethylaminopropyl) carbodiimide,EDC] methods were used to couple TRHS and BSA. The antigenicity analysis of TRBSA complex was finished by detecting the titre of antiserum separated from rabbits which was immunized with TRBSA. Results: The TRHS molecular weight was determined as 370 by analysis of mass spectrometry, the absorption peak was in accordance with theoretical results by nuclear magnetic resonance. MALDITOFMS analysis showed that the molecular weight map of TRBSA a marked increase and the UV maximum absorption peak drift; the coupling ratios of mixed anhydride and EDC method were 1∶18 and 1∶12, respectively. The results of ELISA and double immunodiffusion test showed that the titre of antiserum to TR was 1∶320 000,1∶16, respectively. Conclusion: RBSA coupling was successfully prepared, which established the foundation for the antiTR monoclonal antibody preparation as well as the method construction of TR Residues rapid test.
[Key words]trenbolone; hapten modification; coupling; MALDITOFMS
去甲雄三烯醇酮,又称群勃龙(trenbolone,TR),是人工合成的甾类男性激素,是家畜的生长促进剂,服用含该激素的肉制品会给人类的身体健康带来危害,同时也成为体育比赛兴奋剂的一个可能来源。欧盟禁止进口使用该类产品的食品,也是我国海关规定必须检测的31种兽药之一[1]。目前,TR在食品中残留量的检测主要依赖于质谱技术,如气相色谱质谱技术(GCMS)、液相色谱质谱技术(LCMS)等[2]。近年来,随着单克隆抗体技术、现代免疫测定技术的发展,建立方便于基层检验检疫部门应用的快速、灵敏的TR检测方法,对从源头上监测、控制此类物质的扩散具有重要意义[3]。TR是小分子化合物,需要与大分子载体(蛋白质)偶联后才具有免疫原性。本研究采用琥珀酸酐对TR进行化学修饰,并将获得的TR半琥珀酸酯(TRHS)与牛血清白蛋白(BSA)偶联以赋予其免疫原性,经注射家兔分析其免疫效果。
1 材料与方法
1.1 主要材料与仪器
紫外扫描仪、核磁共振仪、质谱分析仪、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪(MALDITOFMS);BSA、TR等购自Sigma公司;琥珀酸酐、三正丁胺、吡啶、异丙醇均由中国医药集团提供。
1.2 方法
1.2.1 TRHS的制备及鉴定
1.2.1.1 群勃龙结构的修饰
于烧瓶中加入500 mg TR和1 000 mg琥珀酸酐,然后加入2 ml吡啶溶解,80℃搅拌反应3 h。反应液冷却至室温,调整其pH为3.0,得棕黄色黏稠物,过夜后变硬。用热的异丙醇重结晶提纯,红外灯烘干即为TRHS(图1)。
1.2.1.2 修饰物的鉴定
采用质谱法对其相对分子质量进行预测,并用核磁共振鉴定。
1.2.2 TR的抗原性修饰
1.2.2.1 混合酸酐法[4]
TRHS与BSA按摩尔比100∶1反应。取TRHS 5.5 mg 溶于2 ml的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中,置4℃冰箱中预冷10 min,于冰浴磁力搅拌,加入三丁胺30 μl,再加入氯甲酸异丁酯15 μl,然后将该溶液置4℃冰箱中反应1 h即为反应Ⅰ液;取20 mg BSA 溶于2 ml蒸馏水,溶解后于冰浴边搅拌边用1 mol/L NaOH 调pH为8.5制得Ⅱ液;边搅拌边将Ⅰ液缓慢滴加到Ⅱ液中,于4℃搅拌反应过夜。反应产物充分透析,即得TRBSA 偶联物溶液,将其冷冻干燥保存。
1.2.2.2 对乙基-N,N-二甲基丙基碳二亚胺
[3mercaptopropionic acid, 1ethyl3(3diethylaminopropyl) carbodiimide,EDC]法[5] TRHS与BSA按摩尔比100∶1反应。取TRHS,N-羟基琥珀酰亚胺(NHS),EDC按摩尔比1∶1∶1溶于1 ml DMF,混匀后于4℃下活化1 h,此为反应Ⅰ液;取10 mg BSA 溶于3 ml双蒸水中,加DMF 0.5~1.0 ml混匀, 4℃预冷20 min,得Ⅱ液;边搅拌边将Ⅰ液缓慢滴加到Ⅱ液中,于4℃搅拌反应过夜。反应产物充分透析,即得TRBSA 偶联物,冷冻干燥保存。
1.2.3 TRBSA免疫家兔
将制备的TRBSA用完全福氏佐剂常规法免疫家兔,获得的免疫血清用ELISA间接法和双向免疫扩散测定特异性抗血清效价,分析其免疫原性并判断免疫效果。
2 结果
2.1 群勃龙的化学修饰与修饰物鉴定
修饰产物质谱分析相对分子质量为370,IR(KBr)υmax:3300, 1738 cm-1;1H NMR(400 MHz, CDCl3, rt): δ=0.96(s, 3 H, CH3), 1.32(m, 1 H, CH2), 1.54(m, 3 H, CH2), 1.61(m, 1 H, CH2),1.93(d, 1 H,J=12.4 Hz, CH2), 2.27(m, 1 H, CH2), 2.44~2.60(m, 5 H, CH2), 2.69~2.72(m, 4 H, CH2), 2.86(m, 2 H, CH2), 4.84(t, 1 H, J=7.6 Hz, OCH), 5.81(s, 1 H, CH),6.36(d, 1 H, J=9.6 Hz, CH), 6.44(d, 1 H, J=10.0 Hz,CH),氢为25(图2),由于羧基的氢活性太强故未出峰,13C NMR所示碳原子数为22个,各根值与理论值相符(图3)。
2.2 TRBSA的制备
2.2.1 偶联物的紫外光谱及偶联比[3]
紫外/可见分光光度仪对BSA进行扫描测定,可见BSA最大吸收峰在278 nm处,TRHS最大吸收峰在353 nm处,混合酸酐法偶联物的峰形发生明显变化,278 nm吸收峰明显降低,且在340 nm处吸收值明显增大,说明偶联是成功的(图4);由图5可见EDC法偶联物的峰形也发生明显变化,278 nm吸收峰明显降低,且在343 nm处吸收值明显升高,说明偶联也是成功的(图5)。
按文献[7]估算偶联比率,选择20%乙醇为溶剂并以之调零。混合酸酐法:TRHS浓度为0.035 mg/ml,BSA浓度为2 mg/ml,结合比约为1∶18;EDC法:TRHS浓度同混合酸酐法,BSA浓度为1.9 mg/ml,结合比约为1∶12。
2.2.2 BSA,TRBSA相对分子质量
用MALDITOFMS仪检测BSA和混合酸酐法制备的TRBSA,两者的相对分子质量分别为67 146和74 471(图6)。由此估算偶联比率为20.8。
2.3 TR特异性抗血清效价测定结果
TRBSA免疫的家兔血清,经ELISA测得TR特异性抗体效价为1∶320 000;双向免疫扩散测得的抗血清效价为1∶16。
3 讨论
群勃龙(TR)是在畜牧业养殖中经常使用的一类人工合成的类固醇激素,这类激素的滥用对人和畜的健康、社会和生态环境造成直接和潜在的威胁。因此,20世纪80年代以后许多国家明令禁止在牲畜的饲养中使用这类激素,但由于利益的驱动,世界范围仍有许多TR等类固醇激素在使用。国内外关于尿、血、组织中检测到TR等类固醇激素残留的报道很多[2, 6,7]。目前关于TR残留量的检测方法主要依赖于质谱技术。但质谱技术不适用于基层检验检疫部门快速的筛选检测。
本研究将TR与琥珀酸酐反应并对反应产物TRHS的性质和纯度进行鉴定。经磁共振及质谱分析,相对分子质量、氢谱、碳谱均符合TR结构式,并对修饰产物磁共振氢谱、碳谱与软件所预测的理论值进行了比较,结果显示完全一致,由此认为本研究所采用的TRHS合成方法是一种实用、有效的TR修饰方法。鉴定后的修饰产物采用混合酸酐法及EDC法与BSA偶联。在混合酸酐法实施过程中,严格控制反应Ⅰ液无水,Ⅰ、Ⅱ液混合时遵循Ⅰ液加入Ⅱ液,以使有机溶剂得以稀释。此外,在试验过程中,温度的严格控制可保证蛋白质性质。而在EDC法实施过程中,要严格控制EDC使用量[4,5],因为EDC与羧基反应所形成的氨基反应活性中间体(O酰基脲)很不稳定,在水中会很快水解释放出羧基以及N酰基化脲。过量的EDC产生的N酰基脲会结合在蛋白疏水区域的羟基上,导致蛋白自交联。NHS的介入,可保持水溶液中中间体的稳定,使整个偶联反应分成独立的两步反应[7],从而保证偶联效果。
理想的偶联比率与准确的偶联物相对分子质量的测定,是构成免疫原性的要素[8]。本研究使用MALDITOFMS预测偶联物相对分子质量,具有灵敏度高、准确度高及分辨率高等特点,是生命科学领域一种强有力的分析测试手段,并正扮演着越来越重要的作用[9]。MALDITOFMS分析可直观测得偶联物相对分子质量,并通过计算获得其偶联比率。但该法所需设备昂贵,基层单位难以开展。
采用经上述方法作抗原性修饰后的TR免疫家兔并用ELISA和双向免疫扩散检测其抗血清效价,结果表明TR被赋予了明显的免疫原性,两种方法测得的抗TR特异性抗血清效价分别为1∶320 000和1∶16。TR免疫原性修饰的成功,为进一步制备TR单克隆抗体和建立特异性免疫学检测方法奠定了基础,为食品或其他物品中TR残留量的分析开辟了简便、特异、快速、敏感的途径,可从源头上监测、控制含有TR等类固醇物质食品的扩散。
参考文献
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关键词 冶金工程专业 生产实践教学 评价体系
中图分类号:G642 文献标识码:A DOI:10.16400/ki.kjdkz.2015.12.017
Abstract As one of the most practical engineering specialty, the engineering practice teaching is one of the keys of the entire teaching for metallurgical engineering. For the metallurgical engineering in north China university of science and technology, with years of efforts, the reform of practice teaching mode is deepening constantly, and the preliminary evaluation system of practice teaching has been established, for enhancing the effect of the practice teaching reform in further.
Key words metallurgical engineering; production practice teaching; evaluation system
冶金工程是最具实践特色的工科专业之一,学生就业面相对较窄,主要面向冶金企业和相关研究和设计单位,因此生产实践环节的学习是重中之重。①但近年来,冶金行业整体形势的下滑,给学生的实践学习带来了前所未有的困难。②因此,如何在现有条件下达到实践教学目的,同时构建对生产实践教学环节的评价体系成为冶金工程专业实践教学环节的一大难点。华北理工大学冶金工程专业针对上述问题,对生产实践教学环节进行了系统的改革,并对相应的评价体系进行了初步的构建,以期进一步提高实践教学的效果。
1当前存在的问题
目前,华北理工大学冶金工程专业的实践教学环节包括课程实验、校内实践、校外实践、创新实验和课程设计、毕业设计六大部分,而主要问题集中出现在校外实践,也就是生产实践环节。
1.1 客观条件的制约
(1)招生人数大幅增加。上世纪90年代末,随着钢铁行业的快速发展,开设冶金工程专业的高校及专业招收人数迅速攀升,以华北理工大学为例,2000年冶金工程专业应届毕业生仅为50余人,而2014年包括一本、三本和专科的应届毕业生达到700余人,涨幅超过10倍,专业实践压力略见一斑。(2)企业支持力度下降。近年来,随着行业竞争日益激烈,企业加强生产安全管理和技术保密,并通过整合企业资源进行减员增效。而学生到企业实习并不会为企业带来经济效益,且学生毕业未必会到实习企业工作,特别是大批学生同时到企业进行轮岗式的生产实习,给实际生产带来了巨大的安全压力,而这导致企业在接受学生实习上积极性不高。
1.2 人员条件的制约
(1)年轻教师实践经验不足。在华北理工大学博士点立项建设和繁重的教学压力下,专业在近五年引进了多名具有博士学位的年轻教师,但所引进人才中仅一人有在企业工作过的经历,大多数年轻教师缺乏钢铁企业各生产环节的实践经验,甚至有部分教师非冶金工程专业出身,这就给实践教学带来更大的困难。(2)学生实践缺乏积极性。目前,钢铁行业处在产业调整阶段,毕业生大多走向偏远国企和民营企业,因此学生对专业的认同感变差,大部分学生开始选择考研来缓解就业矛盾。生产实习也开始变得尴尬,部分学生为挤出时间复习考研科目,忽略了生产实践这一学知识的宝贵机会。同时,随着生活条件的改善,学生对未来的工作环境要求也越来越高,部分学生在进入实习单位后对钢厂的环境产生恐惧,专业认同感的下降,大大影响了实践教学的效果。
1.3 评价体系缺失
目前,华北理工大学冶金工程专业的实践成绩包括实习现场表现、网络炼钢成绩和实习报告成绩三个部分,这也是多年来遵循的固定模式。客观上讲,由于生产实践所占学分较多,成绩评定有较强的主观色彩,学生本身就对成绩存在较多的疑问;另外最终的成绩并不能反映出学生真实的实践收获,其结果无法起到应有的反馈效果。
上述原因直接导致实践教学改革缺乏实践主体(学生)的需求,因此有必要进一步加强实践教学的评价体系建设,一方面完善对学生的评价考核,另一方面了解学生对实践教学的认识。
2实践教学改革
针对上述问题,华北理工大学冶金工程专业对生产实践教学环节进行了一系列的深化,具体措施如下。
2.1 与企业签订全面战略合作协议
科技创新是企业发展的命脉,我校通过加强和唐钢、邯钢、国丰等各大钢铁企业在科研、生产、培训等方面的合作,通过各种科技攻关合作,全方位地开展互助互惠的校企战略合作机制。企业发展需要专业人才,需要专项技术,学校可以通过科技服务、人才培训、技术咨询等帮助企业排忧解难。通过与多家企业建立合作伙伴关系,为学生的实习和就业打下坚实的基础。
2.2 制定青年教师企业培养计划
实践过程中,指导教师起主导作用,实践教学效果的好坏,与指导教师的能力和素质有很大关系。针对当前青年教师实践经验缺失的现状,学院积极与唐钢、国丰等合作企业联系,建立教师定期挂职锻炼和顶岗工作的机制,联合设立挂职或顶岗工作岗位;同时在考核和各类评优中,对有企业工程实践经历的教师优先考虑,进一步提高了青年教师参与实践的积极性。
2.3 高水平企业专家的引进
近年来,专业引进了一批具有丰富实践经验的企业退休老专家作为实践教师,在学生实践前后,为学生具体讲解企业的实际生产情况和应注意的问题。通过老专家的讲解,帮助学生明确实习的目的;同时学生将实习中遇到的问题与老专家进行交流,进一步强化了学生的实践效果。
2.4 开展专业认知教育提高学生的实习主动性
提高学生对实习教学的兴趣,调动学生的学习积极性,是顺利完成实习任务的保障。提升学生的实习主动性,关键要解决两个问题:一是如何做好考研复习的准备工作,二是如何调整学生浮躁的心态。
教师在课程教授阶段,多以一个考研成功者的身份向学生传授考研心得,这也从另一方面保障了学生的实习安全。与此同时,为提高学生的实习兴趣,在实习前,引导学生根据兴趣设计一些专题,要求学生在实习中进行调研。在实习结束时,学生对所选择的专题进行讨论分析,在查找文献的基础上撰写专题报告和总结。学生带着问题进入企业,学习更具有针对性,实习内容具有更具广度、深度;不仅强化了实习教学,还锻炼了学生的文献总结、专题研讨能力,使学生对冶金生产过程的认识上升到理论高度。
3实践教学评价体系的初步构建
冶金工程专业构建实践教学评价体系包括两个环节,一个是对学生生产实践的考核评价,一个是学生对实践环节的整体评价。
3.1 对学生的考核评价
对学生生产实践环节的考核评价即学生生产实践的最终成绩。原有考核内容除网络炼钢成绩相对较为客观外,实习报告和实习过程表现均带有较强的指导教师主观色彩,学生往往对成绩带有一定的疑问,因此制定一个客观量化的学生成绩评定指标对指导教师和学生都具有非常重要的意义。
在新的实践条件下,冶金工程专业的成绩考核包括四个部分。一是学生参加实践的出勤情况,包括课程讲座和生产实践环节,占总成绩的30%;二是课程讲座后的小测验,占总成绩的15%;三是学生参加网络炼钢模拟的成绩,占总成绩的15%;四是学生参加企业生产实践后实习报告的成绩,占总成绩的40%。
在新的生产实践大纲修订后,学生的实习成绩并不是简单依靠报告字数,而是对实习报告所涉及到的关键点以及对相关内容的阐述情况进行给分,这样最为最终成绩关键部分的实习报告就有了相应的量化指标,进一步提高了学生对成绩的认可度。
3.2 学生对实践环节的整体评价
生产实践的效果是以学生最终的收获来衡量的。为了更好地改革实践环节,就必须建立以学生为评判主体的实践教学评价体系。
冶金工程专业通过结合兄弟院校和专业的经验,建立的评价体系包括两个层次。③④⑤第一层次包括四个方面:实践教学背景评价、实践教学投入评价、实践教学过程评价和实践教学效果评价,每部分所占比重不同。实践效果最为重要,比重0.35;实践过程其次,比重0.30;实践教学投入比重0.25;实践教学背景比重0.10。
实践教学背景评价第二层次包括教学观念、教学目的和教学计划三个方面。教学计划最为重要,比重为0.65,教学观念比重0.15,教学目的比重0.20。
实践教学投入评价的第二层次包括师资力量投入、实践基地建设和经费投入三个方面。师资力量投入最为重要,比重为0.55,实践基地建设投入比重0.25,经费比重0.20。
实践教学过程评价第二层次包括教学内容、教学方法和教学监管及考核三个方面。教学方法最为重要,比重0.50,教学监管及考核比重0.35,教学内容比重0.15。
实践教学效果评价第二层次包括学生实践能力、改革与创新和社会认可度三个方面。学生实践能力最为重要,比重0.55,社会认可度比重0.30,改革与创新比重0.15。
通过评价体系的构建制定相应的调查问卷,然后在第七学期对学生进行匿名调查,以期更好地对实践教学进行改革。
4 结束语
冶金工程专业的自身特点决定了其实践教学的重要性。针对当前条件的制约,在进一步深化实践教学模式改革的基础上,初步建立了实践教学的评价体系,包括对学生生产实践的考核评价和学生对实践环节的整体评价两个部分,以期进一步提升实践教学的改革效果。
基金项目:华北理工大学教育教学改革研究青专重点项目(编号:Qz1430-08)
注释
① 孙伟,王美,费兆奎.地方工科院校创新创业实践教学模式的科学构建[J].长春工业大学学报(高教研究版),2013.34(1):51-53.
② 魏国,刘承军,沈峰满,等.冶金工程专业本科生实践教学方式探讨[J].中国冶金教育,2012(6):69-71.
③ 陶立新.基于MVC模式的通用教学评价系统的研究与开发[D].湖南:中南大学,2008.
【关键词】化学植筋技术;建筑结构加固工程;技术应用;概况;注意事项
一、化学植筋技术的概况
植筋就是种植钢筋,为了加固建筑物或是续建,在原建筑上钻孔,插入钢筋,用特用胶水灌缝,使钢筋锚固在其中,钢筋和原建筑将成为一体。植筋技术是运用高强度的化学粘合剂,使钢筋、螺杆等与混凝土产生握裹力,从而达到预期效果。施工后产生高负荷承载力,不易产生移位、拔出,并且密实性能良好,无需做任何防水处理。由于其通过化学粘合固定不但对基材不会产生膨胀破坏,而且对结构有补强作用,施工简便迅速安全并符合环保要求,是建筑工程中钢筋混凝土结构变更,加固的最有效的方法。它可以应用在各类建筑结构增建、变更等预留钢筋锚定中,还可以用于横梁、柱头、楼板、剪力墙等加固预留钢筋锚定中,也可用于各类钢结构、机械设备等的螺杆锚定中。它主要的技术特点就是:(1)具有高的承载力(剪力、拉力)。(2)对固定的基材不产生膨胀力,适宜边距、间距小的部位。(3)施工简便,时间短。
二、化学植筋技术在建筑结构加固施工中的应用
1、弹线定位。根据设计图的配筋位置及数量,错开原结构钢筋位置,标注出植筋位置。请有关部门验线,合格后就可钻孔。
2、钻孔。用冲击钻钻孔,钻头直径应比钢筋直径大5mm左右,钢筋选用首钢生产的φ25钢筋,钻头选用φ30的合金钢钻头。孔深大小15d(375mm),实际钻深400mm.钻孔时,钻头始终与柱面保持垂直。
3、洗孔。洗孔是植筋中最重要的一个环节,因为孔钻完后内部会有很多灰粉、灰渣,直接影响植筋的质量,所以一定要把孔内杂物清理干净。方法是:用喜得利毛刷(这种毛刷不掉毛),套上加长棒,伸至孔底,来回反复抽动,把灰尘、碎渣带出,再用压缩空气,吹出孔内浮尘。吹完后再用脱脂棉沾酒精或丙酮擦洗孔内壁。但不能用水擦洗,因酒精和丙酮易挥发,水不易挥发。用水擦洗后孔内不会很快干燥。钻孔清洗完后要请设计等有关单位验收,合格后方可注胶。
4、注胶。取一组强力植筋胶,装进套筒内,安置到专用手动注射器上,慢慢扣动板机,排出铂包口处较稀的胶液废弃不用,然后将螺旋混合嘴伸入孔底,如长度不够可用塑料管加长,然后扣动板机,板机孔动一次注射器后退一下,这样能排出孔内空气。为了使钢筋植入后孔内胶液饱满,又不能使胶液外流,孔内注胶达到80%即可。孔内注满胶后应立即植筋。
5、植筋。在注胶前梁底模板就已支好,便于植筋后钢筋定位。植筋前要把钢筋植入部分用钢丝刷反复刷,清除锈污,再用酒精或丙酮清洗。钻孔内注完胶后,把经除锈处理过的钢筋立即放入孔口,然后慢慢单向旋入,不可中途逆向反转,直至钢筋伸入孔底。
6、固化养护。钢筋植入后,在梁底模板上定位,在强力植筋胶完全固化前不能振动钢筋。强力植筋胶在常温下就可完成固化,50h后便可进行下道工序施工。
7、检测试验。在植筋施工前,要对所用钢筋及植筋胶进行现场拉拔试验,以确定钢筋及植筋胶是否符合设计要求。
方法:制作与要植筋部位混凝土构件相同强度等级的混凝土试件,按植筋步骤,植入3组钢筋,待植筋胶完全固化后,进行拉拔实验。实验用专用的钢筋测力计,当加力达到Ⅱ级钢筋屈服强度(450N/mm2)时,出现颈缩现象,继而拉断。测试时测力计施加于卡具的力应符合FC≥FYK(FC:测力计施加的力,N/mm2;FYK:钢筋的屈服强度,N/mm2)
试验证明:植筋用的植筋胶强度大于钢筋的屈服强度,植筋的破坏是钢筋的屈服破坏,不是胶的粘结破坏,这表明钢筋和植筋胶都是合格的。植筋后进行非破损性拉拔试验,用来检测工作状态下的植筋质量,检测的数量是植筋总数的10%。
检测中,测力计施加的力要小于钢筋的屈服强度、大于由设计部门提供的植筋设计锚固力值。公式为:FM
8、绑筋、支模、浇注混凝土。钢筋在抗拉拔试验合格后就可按施工图开始绑筋、支模、浇注混凝土。
三、化学植筋技术应用的注意事项
1、清孔一般可按以下方法进行:对孔内的积水与异物等进行清除时,可将风机加上导管伸入孔内进行吹干、吹净,也可以采用高压水进行冲洗;根据孔内的干燥程度适当地选用加热杆烘干或自然风干,以不向外排放热气为准;用棉丝来擦拭孔内粉尘,再用丙酮来清洗孔壁。清孔一定干净、彻底。当采用高压水清孔造成孔内较湿时,必须在植筋前采取有效措施来使孔内保持干燥。清孔完毕后要立即植筋,间隔时间如果过长,要用棉花球把孔堵塞,防止掉落物进入孔内。
2、如果钢筋局部锈蚀,可以用人工钢丝刷或电动钢丝刷,来对钢筋表面的锈蚀部分进行清除,直到有金属光泽露出为止,当达到一定批量后进行验收,验收合格后方可使用。钢筋的选用需注意钢筋锚固部位是否遭到油污污染,如存在污染可用沾有丙酮的棉花球进行擦洗,如果钢筋遭到的油污污染比较严重或受到较为严重的锈蚀则不能作为植筋使用。
3、植好的钢筋必须要采取合理有效的措施加以保护与固定,在24小时之内要防止钢筋受到施工人员的扰动。若发现钢筋受到十分大的扰动,必须将受扰动的钢筋马上拔出,重新植筋。如果发现施工场所的平均温度比锚固胶的固化温度低,必须停止施工,或采用电炉、碘钨灯、 水浴等增温方式对胶使用前进行预热至30℃~50℃左右,建议对锚固部位也采取一定的加温措施,并维持在24小时以上。
四、结束语
综上所述,目前我国建筑业经历了蓬勃发展的数十年,随着人们生活水平的进一步提高,人们对建筑功能的要求越来越高,越来越感到已有建筑的规模和功能不能满足新的使用求,而且原有建筑的低标准、建筑的老龄化和长期使用后结构功能的逐渐减弱等引起的结构安全问题已开始引起人们的关注。随着人们环保意识的加强,将走持续发展道路作为21世纪人类社会发展的主体,已在全世界范围内形成共识。建筑化学植筋技术现已在加固改造工程中广泛使用,其优点很多。为了保证施工质量,在进行植筋时必须要按照规范要求进行合理设计,同时严格控制施工过程中的钢筋处理、固定养护与清孔等环节,实现建筑加固施工的目的。
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